墓頭回抗腫瘤有效部位的篩選及其作用機制的初步探討.pdf

1、目的:篩選墓頭回抗癌有效部位并初步探討其抗腫瘤機制。方法:將墓頭回粗粉進行熱回流提取，采用吸附柱層析等色譜法進行分離、純化粗提物及用紅外光譜法和核磁共振波譜法鑒定化合物結構，采用細胞體外培養(yǎng)技術篩選活性部位，用吉姆薩(Giemsa)染色法觀察細胞凋亡的形態(tài)變化，MTT法檢測墓頭回提取物對細胞的增殖抑制作用，流式細胞儀(FCM)檢測細胞凋亡，免疫細胞化學SABC法觀察凋亡相關蛋白的表達。 結果:(1)分離得到三個單體，主要為齊墩果

2、酸；得到一個活性較強的部位為5％乙醇-水洗脫組分。(2)墓頭回不同濃度組對細胞的增殖活力有顯著的抑制作用，與相應對照組比較有顯著性差異(p＜0.05)；其抑制作用隨劑量增加而增加。(3)在倒置相差顯微鏡下，觀察用吉姆薩(Giemsa)染色后細胞凋亡的形態(tài)：細胞核染色質固縮、碎裂、染色較深，細胞膜褶皺、卷曲，出芽形成凋亡小體。(4)流式細胞儀(FCM)檢測結果表明，墓頭回提取物可增加G0/G1期細胞，減少S、G2/M期細胞數量，細胞增殖指

3、數(PI)降低，尤其以72h組變化最為明顯(p＜0.05)。(5)K562細胞經藥物48h作用后，Bax蛋白表達明顯上調，表現為陽性細胞增多且隨時間著色逐漸加深，與空白組比較有顯著差異(p＜0.05)。 結論:1.墓頭回提取物對慢性白血病細胞K562體外生長有明顯的抑制作用，其機理可能與細胞的G1期阻滯有關。 2.墓頭回提取物可誘導K562細胞凋亡，其機理可能為通過上調Bax蛋白的表達，從而啟動凋亡級聯(lián)反應。 3