烏拉爾甘草同源四倍體誘導(dǎo)技術(shù)研究.pdf

1、烏拉爾甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch.)為豆科（Leguminosae)甘草屬(GlycyrrhizaLinn)多年生草本植物，根和根莖中含有甘草酸(Glycyrrhizinic acid)、甘草甜素(Glycyrrhizin)等次生代謝物質(zhì)，具有清熱解毒、止咳祛痰、補脾和胃、調(diào)和諸藥等功效，自古就是一種非常重要的大宗藥材。核型研究表明烏拉爾甘草染色體數(shù)目為2n=16，倍性變化未見報道。 本試驗以二

2、倍體烏拉爾甘草種子及試管苗莖尖為實驗材料，以秋水仙素為誘變劑進行染色體加倍處理，研究了變異株在形態(tài)學(xué)、細胞學(xué)等方面的變化，建立了適于烏拉爾甘草莖尖染色體加倍、純化和鑒定的技術(shù)體系，首次獲得了烏拉爾甘草的純合同源四倍體植株，并對四倍體移栽后的田間性狀進行了調(diào)查。主要研究結(jié)果如下: 1.優(yōu)化了烏拉爾甘草組織培養(yǎng)條件下快速繁殖和生根體系。單節(jié)段在MS+6BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L培養(yǎng)基增殖倍數(shù)可達10.1，在培養(yǎng)基1/2

3、MS+核黃素1.0 mg/L，生根率達100％且根系發(fā)育正常。 2.在組織培養(yǎng)條件下進行烏拉爾甘草同源四倍體誘導(dǎo)，莖段浸泡法優(yōu)于種子浸泡法和混培法。建立的最佳誘導(dǎo)體系為將莖尖預(yù)培養(yǎng)3d后，用添加1％DMSO的0.1％秋水仙素溶液浸泡處理24h，成活率可達到67％，變異率可達到33％。 3.對誘導(dǎo)后的材料進行了形態(tài)學(xué)鑒定，同工酶鑒定和細胞學(xué)鑒定，建立了同源四倍體鑒定技術(shù)體系，并有效地應(yīng)用于四倍體株系的檢測。 4.建

4、立了烏拉爾甘草誘導(dǎo)嵌合體的純化體系。對誘導(dǎo)出的嵌合體材料進行單腋芽莖段培養(yǎng)可有效純化嵌合體。 5.獲得了烏拉爾甘草純合四倍體植株，并選擇了根莖粗大、枝葉繁茂、生長旺盛的四倍體植株進行了離體快繁。 6.和二倍體植株相比，四倍體植株的株高、葉長、葉寬、葉面積、總節(jié)數(shù)、分支數(shù)、莖粗、根粗、根重都顯著提高，顯示了一般多倍體植株所表現(xiàn)的典型性狀一巨型性。 本研究不僅創(chuàng)新了甘草屬種質(zhì)資源類型，并為開展多倍體育種、選育出產(chǎn)量高