細胞外基質磷酸糖蛋白在牙齒發(fā)育及牙周組織缺損愈合過程中的表達.pdf

1、目的： 細胞外基質磷酸糖蛋白（matrix extracellular phosphoglycoprotein，MEPE）是小型N端連接整合糖蛋白（small integrin—binding ligand N—linked glycoprotein，SIBLING）家族成員。該家族成員還包括：骨橋蛋白，骨唾液蛋白，牙基質蛋白1，牙本質唾液磷酸蛋白和釉蛋白。SIBLING家族蛋白在基質鈣化、調節(jié)成骨細胞及破骨細胞功能方面發(fā)揮重要

2、作用。MEPE是一種磷調節(jié)因子，對磷酸鹽代謝紊亂及各種骨組織疾病的成骨細胞增生及牙周組織生理連接的重建過程中有重要作用。 本研究擬通過觀察小鼠出生后牙齒連續(xù)發(fā)育過程中MEPE在牙胚和牙周組織中的表達變化，研究MEPE在小鼠牙齒硬組織及牙周組織形成等方面可能發(fā)揮的作用，為進一步研究牙齒發(fā)育的分子機制和牙周組織的再生提供理相應的理論依據(jù)。通過觀察MEPE在牙周組織缺損愈合過程中的組織分布，探討MEPE在牙周組織再生中的作用，為臨床上

3、利用MEPE治療牙周炎及牙槽骨萎縮、頜骨畸形及頜骨骨折等提供理論依據(jù)。 方法： 不同發(fā)育期SPF級BALB/c小鼠（山東大學動物中心提供）88只。戊巴比妥鈉腹腔麻醉，新鮮配制4%多聚甲醛循環(huán)內固定30分鐘，分離雙側下頜骨，4℃下再固定24h，10%EDTA脫鈣30—60天，梯度乙醇脫水、石蠟包埋，近遠中向5μm連續(xù)切片。 成年SPF級Wistar大鼠（山東大學動物中心提供）24只。戊巴比妥鈉腹腔麻醉后行右側磨牙區(qū)

4、牙槽骨開窗手術（5mm×2mm×1mm），分別于術后14天和28天戊巴比妥鈉腹腔麻醉，新鮮配置4%多聚甲醛循環(huán)內固定30分鐘，分離右側下頜骨，4℃下再固定24h、10% EDTA脫鈣90天，梯度乙醇脫水、石蠟包埋，近遠中向5μm連續(xù)切片。 HE染色觀察牙周組織缺損愈合情況。 PV免疫組化兩步法檢測MEPE在牙齒發(fā)育及牙周組織缺損愈合過程中各組織的表達。 結果： 1.MEPE在出生后小鼠牙齒發(fā)育過程中的

5、表達：牙胚發(fā)育早期，MEPE在成釉細胞、成牙本質細胞及牙髓組織中均有表達。隨著牙胚的不斷發(fā)育，MEPE在上述細胞中的表達逐步減弱：在牙周膜中逐漸表達；在前期牙本質中亦有表達；在成年小鼠牙周膜中弱陽性表達。MEPE在嵌入骨陷窩的成熟成骨細胞中呈現(xiàn)高表達。 2.術后14天，術區(qū)有部分新生牙槽骨形成，部分牙周纖維附著于根面牙本質上。術后28天，術區(qū)完全被新生牙槽骨覆蓋，在新生牙槽骨和牙本質之間可見牙周膜和部分牙骨質生成，牙周膜大部分附