IGF-1對胚胎小鼠神經(jīng)干細(xì)胞體外增殖和分化的影響.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)旨在探討胰島素樣生長因子(IGF-1)對體外培養(yǎng)的胚胎小鼠神經(jīng)干細(xì)胞增殖和分化的影響。 研究方法：將孕14天小鼠引頸處死，分離取出胚鼠大腦皮層，制成單細(xì)胞懸液，采用無血清培養(yǎng)法，在表皮生長因子(EGF)和堿性成纖維生長因子(bFGF)作用下培養(yǎng)，觀察不同階段的神經(jīng)干細(xì)胞生長情況。連續(xù)傳代，傳至第三代后，加入不同濃度的IGF-1，觀察神經(jīng)干細(xì)胞的生長和分化情況。用MTT法檢測干細(xì)胞增殖情況，用免疫熒光技術(shù)對神經(jīng)干細(xì)胞的分化情

2、況進(jìn)行鑒定，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 研究結(jié)果：從胚胎小鼠大腦皮層中分離培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞能快速增殖形成懸浮生長的細(xì)胞團(tuán)。經(jīng)免疫熒光技術(shù)鑒定，細(xì)胞團(tuán)Nestin抗體標(biāo)記陽性，誘導(dǎo)分化后的細(xì)胞NSE和GFAP標(biāo)記陽性。 在對神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)過程中，發(fā)現(xiàn)隨著IGF-1濃度的增加，干細(xì)胞增殖速度亦隨之加快，且有劑量依賴性。 去除EGF和bFGF，加入不同濃度IGF-1，并誘導(dǎo)神經(jīng)干細(xì)胞分化。用免疫熒光技術(shù)對神經(jīng)干細(xì)胞的分化情況進(jìn)