共軛亞油酸對TLR4信號通路相關基因表達的影響.pdf

1、共軛亞油酸(Conjugated linoleic acid,CLA)是一種天然的功能性脂肪酸,具有減少體脂、提高動物生產(chǎn)性能、改善胴體性狀等特殊生理功能,尤其可提高動物機體的免疫力,因而受到廣泛的關注。Toll樣受體是連接機體固有免疫與獲得性免疫的紐帶,在抗感染和免疫調節(jié)方面發(fā)揮重要作用,而有關CLA對TLR4及其相關信號轉導的調節(jié)報道較少。本試驗分別在動物與細胞水平上進行了研究,旨在通過研究CLA對TLR4信號通路相關基因表達的影響

2、,進一步闡明CLA免疫調控機制。
　　 (一)動物試驗60只SPF級22-23g雄性昆明小鼠,隨機分為試驗組和對照組,分別飼喂添加1％CLA和1％大豆油的小鼠飼料。試驗期30d后通過給小鼠腹腔注射細菌內毒素(lipopolysaccharide,LPS)(4 mg/kg)建立免疫應激模型,分別于0h、1.5h、3h、6h、12h采集小鼠脾臟,采用RT-PCR分析其TLR4(Toll-Like Receptor4)、MyD88(m

3、yeloid differentiation factor88)、TRIF(TIR-domain-containing adapter-inducinginterferon-β)、NFκB-p65(nuclear factor kappa-light-chain—enhancer of activated B cells)的表達水平。試驗結果表明:注射LPS后上述各基因表達量升高,均在6h達到峰值。試驗組脾臟TLR4、MyD88、TRI

4、F的mRNA表達量低于對照組,在6h時達到顯著效果(P<0.05),但NFκB-p65的顯著效果(P<0.05)出現(xiàn)在3h時。
　　 (二)細胞試驗設置空白對照組(DMSO)、低劑量組(50μmol/L CLA-DMSO)、高劑量組(100μmol/L CLA-DMSO)的DMEM細胞培養(yǎng)液培養(yǎng)RAW264.7小鼠巨噬細胞,培養(yǎng)24h后加入LPS(100ng/mL)誘發(fā)產(chǎn)生免疫反應,分別于0h、2h、4h、8h后收集細胞,采用R