有氧運動對高脂飲食誘導胰島素抵抗大鼠心肌C-EBPβ表達的影響.pdf

1、研究目的:胰島素抵抗(IR)是高血壓病、冠心病、動脈粥樣硬化、2型糖尿病等疾病的共同發(fā)病基礎。探討改善胰島素抵抗的機制及方法具有重要的臨床意義。本研究建立高脂飲食誘導胰島素抵抗模型,觀察大鼠心肌形態(tài)結構變化,心肌C/EBPβmRNA及蛋白表達。在此基礎上進一步觀察有氧運動訓練對胰島素抵抗大鼠空腹血清葡萄糖(FBG)、空腹甘油三酯(FBTG)及血清游離脂肪酸(FFA)濃度影響及心肌形態(tài)結構改變和心肌C/EBPβmRNA及蛋白表達水平,以及

2、兩者之間的關系探索其可能機制,研究結果可為進一步揭示運動對胰島素抵抗的防治作用機制,以及為胰島素抵抗的防治靶點提供新思路。
　　研究對象與方法:SPF級健康雄性SD大鼠85只,適應性喂養(yǎng)一周后淘汰體重增長緩慢10只,剩余75只隨機分為正常飲食(A組);高脂飲食組(B組);高脂飲食喂養(yǎng)6周后,B組大鼠隨機成4組:高脂飼料+安靜對照組(H組)、高脂飼料+運動組(HE組)、高脂飼料+repamycin(HR)、高脂飼料+運動+repam

3、ycin(HER組)。運動干預方案如下:HE組進行4周有氧跑臺運動干預,運動強度為28m/min,40min(前3天進行適應性運動),6次/周。HR組大鼠腹腔注射repamycin,1mg/kg,每日一次。HER組大鼠干預模式注射定量mTOR抑制劑1h后運動(運動干預和藥物注射同HE組、HR組)。干預4周后,腹腔麻醉大鼠,取腹主動脈血4ml,測定FBG、FBTG、FFA濃度,另取大鼠左心室心肌分別用于HE染色及Western blot實

4、驗檢測C/EBPβ蛋白表達和PCR技術測C/EBPβmRNA表達。
　　結果:(1)體重:H組大鼠體重大于A組,在第7-9周兩者之間有顯著性差異(P﹤0.05),第10周兩者之間有非常顯著性差異(P﹤0.01)。H組大鼠體重大于HE組大鼠,第9、10周兩者之間有顯著性差異(P﹤0.05)。HR組大鼠體重大于HER組大鼠體重,第10周兩者之間有顯著性差異(P﹤0.05)。
　　(2)葡萄糖耐量實驗:第3周,B組大鼠注射定量葡萄

5、糖后血糖急劇上升,且在120min后沒恢復到正?？崭寡撬?表現(xiàn)出糖耐量下降現(xiàn)象;第6周,B組各個時間點血糖濃度大于A組;第10周,H組各時間點血糖濃度大于A組,差異具顯著性(P﹤0.05), HE組0min血糖濃度低于H組,差異非常顯著(P﹤0.01);HR組各時間點血糖濃度與 H組都有非常顯著性差異(P﹤0.01);HER組60min血糖濃度高于HE組,差異顯著(P﹤0.05),120min血糖濃度高于HE組,差異非常顯著(P﹤0

6、.01)。
　　(3)胰島素耐量實驗:第3、6周B組大鼠注射定量胰島素后血糖值下降遲緩,各個時間點血糖濃度高于A組,第6周第30min血糖濃度與A組有顯著性差異(P﹤0.05),第60min血糖濃度與A組有非常顯著性差異(P﹤0.01)。H組各個時間點血糖濃度大于A組,第30minH組與A組有顯著性差異(P﹤0.05);HE組各個時間血糖濃度低于H組,在第30min、60min有非常顯著性差異(P﹤0.01);HER組各個時間點血

7、糖濃度低于HR組,第30min、60min有顯著性差異(P﹤0.05)。
　　(4)FBG:H組FBG濃度大于A組、HE組,差異不顯著;HR組濃度大于HER組,差異不顯著。
　　(5)FBTG:A組大鼠FBTG含量較低,與高脂飲食大鼠各組之間都存在顯著性差異(P﹤0.05);H組濃度比HE組高,但無顯著性差異;HR組濃度大于HER組,無顯著性差異。
　　(6)FFA:H組大鼠血清FFA濃度大于A組,差異顯著(P﹤0.0

8、5);H組大于HE組,但無顯著性差異;HR組大于H組,差異顯著(P﹤0.05);HR大于HER組,但無顯著性差異。
　　(7)心重計數(shù):A組大鼠心重計數(shù)小于H組大鼠心重計數(shù),差異顯著(P﹤0.05);HE組大鼠心重計數(shù)小于H組大鼠心重計數(shù),具顯著性差異(P﹤0.05);HER組大鼠心重計數(shù)小于HR組大鼠心重計數(shù),但無顯著性差異。HE染色切片觀察:A組心肌細胞形態(tài)完整,結構正常,排列規(guī)則,輪廓清晰,呈細長圓柱狀,核呈橢圓形,位于細胞

9、中央;H組、HR組、HER大鼠心肌細胞排列不太規(guī)則,比較肥大,部分呈波浪狀,橫紋排列不規(guī)則,變性明顯,細胞核完整性破壞;HE組大鼠心肌細胞大致排列規(guī)則,形態(tài)結構清晰,染色均勻。
　　(8)C/EBPβ蛋白表達:A組大鼠心肌C/EBPβ蛋白表達量最少,與H組、HER組具顯著性差異(P﹤0.05),與HR組有非常顯著性差異(P﹤0.01)。高脂飲食大鼠心肌C/EBPβ蛋白含量排列順序為:HR組﹥HER組﹥H組﹥HE組;H組大鼠心肌C/

10、EBPβ蛋白表達量與HE組、HR組具有差異顯著(P﹤0.05);HR組大鼠心肌C/EBPβ蛋白表達量與HE組有非常顯著性差異(P﹤0.01);HER組大鼠心肌C/EBPβ蛋白表達與HE組有顯著性差異(P﹤0.05)。
　　(9)C/EBPβmRNA表達:C/EBPβmRNA表達與蛋白表達大體上相一致,A組大鼠心肌C/EBPβmRNA表達最少,與H組、HE組、HER組具有顯著性差異(P﹤0.05),與HR組有非常顯著性差異(P﹤0.