左心輔助裝置致心梗早期心肌卸負荷后心肌細胞及miRNA變化的研究.pdf

1、目的：
　　左心輔助裝置雖已大量使用于終末期心衰患者，但能否應(yīng)用于心梗患者尚存在爭議。為此我們制作了羊急性心梗模型，驗證左心輔助裝置卸負荷干預(yù)下心梗心肌細胞壞死減少的假設(shè)；基于成立的假設(shè)，對大量存活的冬眠心肌細胞，借助高通量測序技術(shù)，較全面的發(fā)現(xiàn)缺血、缺氧條件下的冬眠心肌細胞miRNA的變化，希望對心梗后miRNA以及心肌細胞保護的研究有所幫助。
　　方法：
　　6只成年小尾寒羊經(jīng)結(jié)扎冠狀動脈制作心梗模型，其中實驗組3

2、只在心臟不停跳下植入左心輔助裝置（FW-Ⅱ型軸流泵）,其余3只為對照組不作卸負荷處理。記錄心梗后12、24、36、48、72小時CTnⅠ值評價心肌細胞損傷程度。72小時后取出標(biāo)本，病理檢查觀察心肌細胞破壞及炎癥細胞浸潤情況，TUNEL法檢測兩組動物心肌細胞凋亡情況。將實驗組、對照組的心肌組織分為心梗、梗死邊帶區(qū)域、正常區(qū)域三種樣品。根據(jù)每種樣品中 miRNA的歸一化表達量，計算樣本間Pearson相關(guān)系數(shù)；利用皮爾遜相關(guān)系數(shù)，評價樣本間

3、的相關(guān)性，通過高通量檢測技術(shù)，檢測中心肌細胞miRNA，并在三種樣品間進行對比，發(fā)現(xiàn)期間miRNA的變化情況。
　　結(jié)果：
　　卸負荷后各個時間點實驗組CTnⅠ值變化幅度均較對照組有差異，病理發(fā)現(xiàn)實驗組心梗及梗死邊帶區(qū)域炎癥細胞浸潤較少，壞死心肌細胞較少，大量心肌細胞呈冬眠細胞狀態(tài)存活；而對照組對應(yīng)區(qū)域炎癥細胞浸潤廣泛，壞死心肌細胞較多。TUNEL法檢測細胞凋亡結(jié)果顯示實驗組梗死邊帶區(qū)域心肌細胞凋亡程度低于對照組（47.83

4、±16.24％對75.80±11.16%，P<0.05）。通過計算樣本間Pearson相關(guān)系數(shù)，認為樣品的重復(fù)性達到標(biāo)準(zhǔn)，并表明同種類樣品間的關(guān)聯(lián)性好，實驗設(shè)計合理，對以上三種樣本通過高通量miRNA測序，并兩兩間比較表明，共有53種已知miRNA，370種未知miRNA發(fā)生變化。
　　結(jié)論：
　　通過左心輔助裝置對心梗早期心肌卸負荷，可以有效減輕心梗心肌細胞死亡程度，減少炎癥細胞滲出，能為心梗后續(xù)治療提供良好的心肌細胞基礎(chǔ)