FBP17基因真核重組質粒構建及其L02細胞表達.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：構建攜帶人FBP17基因真核重組質粒p3×FLAG-CMV-10/FBP17，并轉染人正常肝細胞LO2，驗證己轉染重組質粒p3×FLAG-CMV-10/FBP17的LO2高表達FBP17，為FBP17相互作用蛋白研究打下堅實的基礎。
　　 方法：
　　 (1)構建重組質粒p3×FLAG-CMV-10/FBP17。通過酶切pEGFP-C1-FBP17質粒，產物純化后與p3×FLAG-CMV-10載體進行連接反應，構建

2、p3×FLAG-CMV-10/FBP17真核重組質粒。(2)脂質體法將真核重組質粒p3×FLAG-CMV-10/FBP17轉染人正常肝細胞LO2。(3)應用RT-PCR和Western Blotting檢測驗證真核重組質粒p3×FLAG-CMV-10/FBP17在人正常肝細胞LO2中高表達，XTT法檢測其對細胞存活率的影響。
　　 結果：(1)成功地構建真核表達重組質粒p3×FLAG-CMV-10/FBP17。(2)成功將真核表

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