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文檔簡介
1、基因對基因抗性是植物抵抗病原菌侵染的一個重要手段。水稻的抗稻瘟病基因Pi9與Pi2具有廣譜的稻瘟菌抗性。這2個基因編碼的蛋白屬于NBS-LRR家族。在前期研究工作中,我們利用域替換技術,將Pi2的NBS結構域與Pi9的LRR結構域相融合,構建了鑲嵌基因Pi2/Pi9。與Pi9不同,Pi2/Pi9轉基因植株激活了水稻自體免疫抗性反應。因此,在本研究中我們將Pi2/Pi9命名為MPIC((m)odifier of(Pi)9,(c)onsti
2、tutively)。
為了研究MPIC基因激活的水稻自體免疫反應的分子機制,我們開展了以下的研究內容:(1) MPIC和Pi9轉基因植株的稻瘟病菌抗譜和其它表型的差異分析;(2)比較MPIC和Pi9蛋白的亞細胞器定位異同;(3)表達分析篩選MPIC調控的下游基因;(4)部分MPIC下游應答基因的啟動子克隆和功能初步分析。
目前,我們取得了以下主要實驗結果:(1) MPIC轉基因水稻表現為生長發(fā)育滯后、植株矮小
3、、根部發(fā)黑、葉片卷曲并有類病斑等自體免疫表型。(2) MPIC轉基因水稻的過氧化氫以及水楊酸(salicylic acid,SA)水平顯著提高;(3)MPIC轉基因水稻的稻瘟病菌抗譜和Pi9相同;(4) MPIC蛋白更多地集中于細胞核或細胞核區(qū)域,而Pi9蛋白則在整個細胞中都有分布。(5)篩選了13個在MPIC轉基因水稻中特異表達的基因,并克隆其中的6個基因的啟動子,構建了相應的啟動子和LUC報告基因的融合載體。上述結果為進一步分析MP
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