野生鳥類及山雞禽白血病流行病學調(diào)查.pdf

1、禽白血病是由反轉(zhuǎn)錄病毒科禽白血病病毒引起的禽類多種腫瘤性疾病的總稱。本病在世界各地均有發(fā)生，是危害養(yǎng)禽業(yè)的主要疾病之一。根據(jù)傳播方式禽白血病分為內(nèi)源性禽白血病(ALV-E)和外源性禽白血病。雞外源性禽白血病病毒根據(jù)病毒感染宿主范圍、血清中和及干擾實驗和病毒的基因組結(jié)構(gòu)被劃分為A、B、C、D和J亞群。A亞群病毒感染病例臨床上較為常見，B亞群病毒感染引起的自然病例則較少。由于本病流行所造成的直接經(jīng)濟損失相對較小，曾一度不被人們所重視。自從2

2、0世紀末J亞群禽白血病在世界范圍內(nèi)爆發(fā)、流行以來，給養(yǎng)禽業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失，這才被人們所重視。雖然國內(nèi)已經(jīng)有很多關于禽白血病流行病學的報道，但主要集中在家禽上，國內(nèi)尚無關于野生鳥類感染禽白血病的報道，也未見有關山雞感染的報道。為掌握我國野生鳥類及山雞ALV的流行情況，本研究于2010-2011年在我國東北地區(qū)進行了野生鳥類ALV-A、B和J分子流行病學調(diào)查及重要基因序列分析;在山東省德州市平原縣山雞養(yǎng)殖基地從8個場采集血樣152份進

3、行ALV-A/B、J抗體檢測。試驗結(jié)果表明:用PCR方法從我國東北地區(qū)300份野生鳥類病料中檢測出2份ALV-A、4份ALV-B和7份ALV-J陽性病料;以GenBank上發(fā)表的ALV-J原型株HPRS-103為參考株，設計了4對特異性引物，成功擴增出1株ALV-J前病毒基因組序列，命名為WB11098(J)。
　　 對13份ALV陽性病料進行了env基因擴增，然后與各亞群代表毒株進行序列分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn):(1)通過比對A亞群各毒

4、株gp85基因發(fā)現(xiàn)與美國蛋雞分離株MQNCSU氨基酸同源性最近為97.6％，推測2個A亞群檢測株可能來源于美國雞群;通過對B亞群檢測株env基因進行遺傳進化樹分析，4個B亞群檢測株與國外原型毒株RAV-2和代表毒株Schmidt-Ruppin B同源性較近，說明此次獲得的4株B亞群禽白血病檢測株可能來源于美國雞群;但是對J亞群檢測株env基因比對分析發(fā)現(xiàn)，7株J亞群檢測株與國內(nèi)蛋雞分離毒株JL08CH3-1同源性較近，與A，B亞群檢測株

5、env基因的特點不同。
　　 對WB11098(J)全基因組進行了序列分析，結(jié)果表明:WB11098(J)全基因組長度為7869bp。與GenBank上公布的ALV-J參考毒株相比，WB11098(J)有以下序列特征:(1)對于5'LTR，在第1位前有5個核苷酸(TGTTAT)插入，C/EBP元件因第11和第12位之間有9個核苷酸(ACTCTTGTA)插入而缺失;AIBREP1元件內(nèi)，第107位“A”變?yōu)椤癎”，剩余的元件沒有發(fā)

6、生變化，依然保守。(2) WB11098(J)5'UTR長度為398 bp，在相當于HPRS-1035'UTR362～363位堿基插入了長度為19bp序列，與原型毒株 HPRS-103相比較，除有19bp插入以外，另有29處核苷酸變異，變異較大;(3)本研究中WB11098(J)ALV-J gag和pol基因非常保守，env基因呈現(xiàn)高度多樣性和大量氨基酸突變。變異主要集中gp85基因，主要表現(xiàn)在堿基突變后引起氨基酸化學性質(zhì)的改變。

7、>　　 從8個場152份山雞血清樣品經(jīng)ELISA檢測，共檢出4份陽性:其中ALV-A、B3份;ALV-J1份。我國許多地方特有品種禽類（如蘆花雞、麻雞）已被ALV感染，盡管此次從山雞中檢出的禽自血病陽性率較低，但這是在山雞中首次檢出，由于禽白血病病毒可以水平傳播和垂直傳播，所以不能忽視其對珍稀禽種的潛在危害。
　　 本研究從300份野生鳥類病料中檢測到13份ALV陽性病料，為研究野生鳥類ALV提供了豐富素材，極大的豐富了ALV