Intermedin預(yù)處理對大鼠腎臟缺血再灌注損傷的相關(guān)修復(fù)基因的影響.pdf

1、垂體中葉素Intermedin（IMD）是2004年發(fā)現(xiàn)的降鈣素相關(guān)肽（CGRP）超家族成員，是重要的內(nèi)源性心血管、腎臟保護因子，在腎臟有很高的分泌，可增加腎血流、尿量，降低腎血管阻力，但其對腎臟的保護機制尚不清楚。本研究采用基因轉(zhuǎn)染的方法使腎組織局部高表達IMD，觀察IMD 預(yù)處理對腎臟IRI修復(fù)再生過程中相關(guān)修復(fù)基因的表達的影響，探討IMD對腎臟IRI修復(fù)過程的影響及機制。
　　 目的：探討Intermedin(IMD)預(yù)處

2、理對大鼠腎臟缺血再灌注損傷（IRI）修復(fù)再生過程中Vimentin等相關(guān)修復(fù)基因的影響。
　　 方法：健康雄性Wistar大鼠144只，隨機分為假手術(shù)組、IRI組、轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒組和轉(zhuǎn)染IMD組。動物右腎切除后，用超聲微泡技術(shù)將質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入左腎，一周后制作腎臟IRI模型。分別于再灌注1d、2d、3d、4d、7d和14d 留取腎組織標(biāo)本。RT-PCR 法檢測腎組織Pax-2、ZO-1、Ncam、Wt-1和Vimentin的Mrna表達變

3、化；Western blotting 法分析Pax-2、Wt-1和Vimentin蛋白表達變化；ELISIA 法檢測ZO-1、Ncam的蛋白表達變化。
　　 結(jié)果：（1）IRI組大鼠Pax-2、Zo-1、Ncam、Wt-1和Vimentin在IRI后1d 到3d明顯表達增加，與假手術(shù)組相比具有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.01）。4d后基本恢復(fù)（P>0.05）。（2）轉(zhuǎn)染IMD組，在IRI后1d 到4d的Pax-2、Zo-1、Nca

4、m、Wt-1和Vimentin表達均顯著高于同時間點其它3組，與其它3組分別比較均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。（3）IRI組、轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒組和轉(zhuǎn)染IMD組三組上述基因的7d、14d表達和正常組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；IRI組和轉(zhuǎn)空質(zhì)粒組4d的表達較正常組增高，但無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。（4）IRI組和轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒組之間的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。（5）運用RT-PCR 檢測上述指標(biāo)的Mrna表達變化與運用we