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文檔簡介
1、目的:
本研究主要通過觀察1,25(OH)2D3對 IgA腎病大鼠 IL-4的影響,探討1,25(OH)2D3對大鼠IgAN的免疫調節(jié)作用,為臨床治療IgA腎病提供新的思路。
方法:
?。?)選用Wister大鼠52只,隨機抽取8只大鼠作為正常對照組(A組),余44只大鼠采用抗原(牛γ球蛋白)直接刺激粘膜免疫的方式建立IgA腎病模型。
?。?)剔除造模鑒定用大鼠及死亡大鼠,將造模成功的32只大鼠隨機分
2、為為干預組(B組)、強的松組(C組)、1,25(OH)2D3組(D組)、及強的松+1,25(OH)2D3聯合治療組(E組),每組8只,各治療組分別進行相應的藥物干預,正常對照組及未干預組給予等量生理鹽水灌胃。
?。?)分別檢測各組大鼠尿紅細胞計數、24小時尿蛋白、血肌酐、血鈣、血磷的變化情況,采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(Real-time PCR)檢測各大鼠脾臟淋巴細胞白細胞介素4(IL-4)mRNA的水平,采用免疫組化及We
3、stern blot檢測大鼠腎臟IL-4蛋白水平的變化。
結果:
(1)24小時尿蛋白定量(mg/24h):A組(正常對照組)為7.27±0.86;B組(未干預組)為49.37±2.96;C組(強的松組)為15.26±1.57;D組(1,25(0H)2D3治療組)為21.05±2.06;E組(強的松+1,25(0H)2D3聯合治療組)為10.16±1.39。經治療后C、D、E組24h尿蛋白較B組均有下降(P<0.05
4、),其中E組下降最顯著(P<0.05)。
?。?)尿紅細胞計數(個/ul):A組為5.03±2.55;B組為328±7.04;C組為18±3.06;D組為162±5.36;E組為9±3.15。經治療后C、D、E組尿紅細胞計數較B組均有下降(P<0.05),其中E組下降最顯著(P<0.05)。
(3)各組大鼠的血肌酐(μmol/L)水平:A組為42.76±2.42;B組為45.23±2.01;C組為45.21±1.52;
5、D組為43.98±2.36;E組為43.44±2.4。各組大鼠的血鈣(mmol/L)水平:A組為2.35±0.22、B組2.28±0.17、C組2.38±0.09、D組2.44±0.11、E組2.50±0.14。各組大鼠的血磷(mmol/L)水平:A組為2.85±0.27;B組為2.90±0.32;C組為2.86±0.22;D組為2.89±0.33;E組為2.80±0.25。各組血肌酐、血鈣、血磷水平未見顯著變化,差別無統(tǒng)計學意義(P>
6、0.05)。
?。?)IL-4平均光密度值:A組為0.080±0.030;B組為0.230±0.013:;C組為0.162±0.021;D組為0.199±0.031;E組為0.092±0.024。經治療后C、D、E組平均光密度較B組均有下降(P<0.05),其中E組下降最顯著(P<0.05);IL-4的表達與24小時尿蛋白呈正相關(P<0.05),與尿紅細胞計數無明顯相關性。
?。?)大鼠脾臟淋巴細胞IL-4的mRNA相
7、對表達量:A組為0.1897±0.0010;B組為0.8314±0.0013;C組為0.5901±0.0008;D組為0.6617±0.0018;E組0.3822±0.0007。經治療后C、D、E組尿紅細胞計數較B組均有下降(P<0.05),其中E組下降最顯著(P<0.05)。
?。?)大鼠腎臟IL-4蛋白表達:A組、B組、C組、D組、E組分別為0.137±0.004、0.701±0.003、0.390±0.001、0.517±
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