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文檔簡介
1、目的:觀察應用原代提取的大鼠的心臟周細胞對心肌梗死的治療效果,應用SD大鼠的心肌梗死模型,將周細胞植入大鼠梗死的心肌,研究周細胞移植對梗死后心肌組織的影響:1)移植前后心功能變化2)梗死區(qū)膠原纖維及炎癥細胞變化3)梗死區(qū)血管密度變化。
方法:原代提取的心臟周細胞(pericyte),來源于三周齡的SD大鼠,經(jīng)膠原酶消化2次后分離培養(yǎng),擴增數(shù)量至第三代。取第三代周細胞做移植準備。用20只SD大鼠(雄性)做急性心肌梗死模型,將20
2、只SD大鼠隨機分為兩組,每組10只大鼠。1)周細胞組:應用左冠狀動脈前降支結扎法建立SD大鼠的心肌梗死模型,結扎后5分鐘,在梗死區(qū)及梗死周圍區(qū)分別注入周細胞,然后逐層縫合肌肉皮膚,關閉胸腔。2)對照組:也結扎左冠狀動脈前降支建立SD大鼠的心肌梗死模型,結扎后5分鐘,在梗死區(qū)和梗死周圍區(qū)注入磷酸鹽緩沖溶液(PBS),然后關閉胸腔。兩組SD大鼠均于移植前和移植后4周做心臟超聲檢查,檢測:左心室收縮末期容積,左心室舒張末期容積,左心室短軸縮短
3、率,左心室射血分數(shù)。術后4周取大鼠的心臟組織做冰凍切片,并做抗CD31的免疫熒光染色,觀察梗死區(qū)的血管密度。做Masson染色觀察梗死區(qū)膠原纖維變化,做HE染色觀察炎癥細胞浸潤。
結果:1)與對照組組對比,移植前后周細胞組大鼠左心室舒張末期容積、左心室收縮末期容積擴大較小,左心室短軸縮短率及射血分數(shù)也僅有很少的降低。2)與對照組對比,周細胞植入組梗死區(qū)域心肌纖維化較少。3)與對照組比較,HE染色顯示周細胞植入組梗死區(qū)域炎性細胞
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