中國鹵蟲胚胎發(fā)育過程中V-ATPase基因的表達.pdf_第1頁
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1、遼寧師范大學碩士學位論文中國鹵蟲胚胎發(fā)育過程中VATPase基因的表達姓名：孫文靜申請學位級別：碩士專業(yè)：海洋生物學指導教師：侯林20070518中國鹵蟲胚胎發(fā)育過程中VATPase基因的表達ExpressionofVATPasegeneduringearlYembryodeveIopmentofChineseArtemiaparthenogeneticaAbstractContent：Brineshrimp(Artemia)iswid

2、elydistributedininnerandsaltlakeandcoastingsaltworks，itbelongstoCrustacea，Branchigpoda，AnostaceaArtemidae，ArtemiaThevacuolarATPase(VaWlases)isalargecomplexenzymethatcanpumpHoutsideofthecellorintothelumensofvacuolarorgane

3、llestomaintainthecytoplasmicpHatarelativestableneutrallevelThiskindofenvironmentisessentialforthesurvivalofcellandcanalsoacidifysomeintracellularapartmentswhicharecontributingtothenodalfunctionofendosomes，lysosom髓andGolg

4、iapparatusFollowingthemRNAsequenceofAnemiaparthenogeneticaVATPasegeneonGenBank，theartideUSeStotalRNAofArtemiafranciscanaastemplateandgets1577bplonggenefragmentbyRTPCRAftertheanalysisonpresumptiveaminoacidsequenceandrelat

5、edproteinaminoacidsequencesupportingbyBlastn，softwareClustaiX183andMEGA30software，wedemonstratedthatthissequenceistheV柵撇geneofArtemiaparthenogeneticaandrevealedthatthefragmentdisplayedupto97％identitywithVATPasegeneinArte

6、mia#anciscanaavailableinGenBankArtemiafranciscana偽Y197611)VATPasegenesequencesencoded401aminoacidresiduesbyCLUSTALWn83)ThededucedArtemiaparthenogeneticaproteinsequencedemonstratesahighlydegreeofaminoacididentitywithArtem

7、iafranciscana98％anditsconsanguinityistheclosestwithAfranciscanaGeneexpressionanalysisusingrealtimeRTPCRiscurrentlythemostsensitiveandreproduciblemethodofdetectingandquantifyingallmRNAtranscriptInthispaperthesamplesofArte

8、miaparthenogeneticawerecollectedat0hour4hour8hour12hour16hourand24hourRealtimePeRanalysisofthemRNAwasusedtodemonstratedifferentialexpressionsthroughencystedembryodevelopmentTheanalysisofmRNAexpressiondemonstratedalowleve

9、lbefore12hour，followedbyanincreasein16hourTheexpressionofV—ATPaseat24hourissimilartothatin16hourTheV—ATPaseofbrineshrimpembryosmaybedownregulatedunderanoxiabefore12hourandthemRNAexpressionofVATPasedecreasesThemechanismof

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