Smad1在小鼠屈光發(fā)育及形覺(jué)剝奪性近視形成中的作用.pdf

1、目的：研究C57BL/6小鼠屈光發(fā)育及形覺(jué)剝奪性近視（form-deprivation myopia，F(xiàn)DM）模型中BMP/TGF-β信號(hào)通路下游因子Smad1的表達(dá)情況，探究Smad1在屈光發(fā)育及形覺(jué)剝奪性近視形成過(guò)程中的作用及機(jī)制。
　　方法：取21日齡實(shí)驗(yàn)小鼠96只，分為實(shí)驗(yàn)組（n=48只）和正常對(duì)照組（n=48只）。實(shí)驗(yàn)組右眼采用遮蓋法進(jìn)行形覺(jué)剝奪，左眼自然暴露作為自身對(duì)照組，正常對(duì)照組雙眼均不予任何處理。實(shí)驗(yàn)組和正常對(duì)照

2、組分別以7d、21d、28d建立動(dòng)物近視模型。在各實(shí)驗(yàn)時(shí)間點(diǎn)對(duì)各組小鼠分別進(jìn)行以下檢測(cè)：帶狀光檢影測(cè)量屈光度；電子游標(biāo)卡尺測(cè)量眼軸長(zhǎng)度；蘇木素-伊紅（HE）染色聯(lián)合光鏡觀察眼球后壁形態(tài)學(xué)變化；免疫熒光染色法及免疫組織化學(xué)法檢測(cè)眼球后壁Smad1蛋白表達(dá)情況；實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（QRT-PCR）檢測(cè)眼球后壁中Smad1 mRNA表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　?。?）形覺(jué)剝奪7d時(shí)，實(shí)驗(yàn)眼屈光度、眼軸長(zhǎng)度與自身對(duì)照眼、正常對(duì)照

3、眼相比無(wú)顯著性差異（P>0.05）；形覺(jué)剝奪21d、28d后，實(shí)驗(yàn)眼分別誘導(dǎo)出（-4.65±0.13）D及（-7.40±0.27）D的相對(duì)近視，眼軸分別拉長(zhǎng)（16±12）um及（21±13）um，與自身對(duì)照組及正常對(duì)照組相比，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均<0.05），且近視漂移程度隨著剝奪時(shí)間的延長(zhǎng)而加深（P<0.05）；
　?。?）相比自身對(duì)照組及正常對(duì)照組，眼球后壁形態(tài)學(xué)觀察可見(jiàn)形覺(jué)剝奪21d、28d時(shí)實(shí)驗(yàn)眼視網(wǎng)膜（尤其是內(nèi)層區(qū)

4、）明顯變薄、細(xì)胞結(jié)構(gòu)排列稀疏，鞏膜變薄、膠原纖維排列紊亂；
　　（3）免疫熒光法結(jié)果示Smad1表達(dá)于鞏膜和視網(wǎng)膜（尤其是內(nèi)層區(qū)和外核層）；免疫組織化學(xué)染色法及QRT-PCR結(jié)果顯示，在正常對(duì)照組中Smad1的表達(dá)并沒(méi)有隨著鼠齡的增長(zhǎng)而增加，而在形覺(jué)剝奪實(shí)驗(yàn)眼中Smad1 mRNA及蛋白表達(dá)量較自身對(duì)照組及正常對(duì)照組均明顯減少，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。自身對(duì)照組的上述所有檢測(cè)指標(biāo)與正常對(duì)照組相比均無(wú)明顯差異（P>0.0