神經(jīng)生長因子及其受體在形覺剝奪性近視中作用的實驗研究.pdf

1、鄭州大學博士學位論文神經(jīng)生長因子及其受體在形覺剝奪性近視中作用的實驗研究姓名：陳悅申請學位級別：博士專業(yè)：眼科學指導教師：張金嵩20070515鄭州大學博士研究生論文 神經(jīng)生長因子及其受體在形覺剝奪性近視中作用的實驗研究然后研究T F D M 發(fā)展過程中視網(wǎng)膜光感受器細胞是否也存在細胞凋亡現(xiàn)象及凋亡基因p 7 5 N T R 、C a s p a s e 一3 蛋白和m R N A 表達的變化，并觀察了N G F 對視網(wǎng)膜細胞的保護作用

2、，探索治療高度近視的新途徑。最后研究了N G F 對體外培養(yǎng)的人鞏膜成纖維細胞的影響。第一部分神經(jīng)生長因子及其受體在豚鼠形覺剝奪性近視的表達方法1 ．動物模型的建立：選用出生7 天花色豚鼠8 0 只。隨機分為4 組，每組2 0 只。A組( 遮蓋2 周) ，B 組( 遮蓋4 周) ，C 組( 遮蓋8 周) ，D 組( 遮蓋7 周去遮蓋1 周) 。每組1 0 只用于H E 染色及免疫組織化學檢測，另1 0 只用于R T —P C R 檢測。

3、右眼以半透明眼罩遮蓋作為遮蓋眼，左眼不做任何處理為對照眼。2 ．屈光度及眼軸長度測量：分別于遮蓋前、遮蓋后2 周、4 周、8 N 及遮蓋7 周去遮蓋1 周，檢影鏡檢測豚鼠雙眼屈光狀態(tài)，A 型超聲儀測定雙眼軸長度。3 ．H E 染色與形態(tài)學觀察：光學顯微鏡下觀察遮蓋前后視網(wǎng)膜形態(tài)學變化。4 ．免疫組織化學染色檢測：N G F 蛋白、T r k A 蛋白表達。5 ．逆轉錄聚合酶鏈反應( R T - P C R ) 檢測：視網(wǎng)膜N G Fm

4、R N A 、T r k Am R N A 的表達。6 ．統(tǒng)計學處理：應用S P S S l 2 ．O 統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學處理，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差( x + s ) 表示，雙眼比較采用配對t 檢驗，組問比較采用單因素方差分析，取a = O ．0 5 作為檢驗標準。結果1 ．遮蓋眼與對照眼屆光度及眼軸比較：遮蓋眼由實驗前遠視眼演變?yōu)榻曆郏㈦S遮蓋時間延長，近視度數(shù)加深，眼軸延長。遮蓋8 周，遮蓋眼屈光度( 一4 ．3 8

5、77;1 ．1 1 ) D 與對照眼( 3 ．7 5 ±O ．7 1 ) D 相比，眼軸長( 8 ．1 8 ±0 ．1 6 ) m 與對照眼( 7 ．2 6±O ．2 0 ) 咖相比屈光度前后變化為8 ．1 3 D ，眼軸前后變化為0 ．9 2 m m ，差異有統(tǒng)計學意義( 尸< O ．0 1 ) 。遮蓋7 周去遮蓋1 周屈光度前后變化為5 ．9 1 D ，眼軸前后變化為0 ．5 2 n l n 。去