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1、廣西師范大學(xué)碩士學(xué)位論文重組人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子8a（rhFGF8a）在大腸桿菌中的表達(dá)優(yōu)化姓名：付燦申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：生態(tài)學(xué)指導(dǎo)教師：黃明20060501IIAbstractAmemberoftheFibroblastGrowthFactfamilyFibroblastGrowthFact8isofma(FGF8a)isacceptedasacrucialganizingsignalduringthedevelopmentofv
2、ertebrateembryos.FurthermetheFGF8aperfmsmanyotherbiologicalfunctionssuchashealingtissuewoundculturingtheneuralstemcellsinducingittodopaminergicneurons.SoitissuggestedthatthepotentialapplicationishugefFGF8atobenefitthecli
3、nicaltreatment.InpresentstudyithasprovedthatthesolubleexpressionbenefitstoenhancefinalproductyieldbioactivityofrhFGF8aproteincomparingwiththeinclusionbodyexpression.Onthebasisofinducinginclusionbodyexpresstionbacterialst
4、rainrhFGF8apET22b()Rosetta(DE3)toexpresssolublerhFGF8awhichhadbeenbuiltinfmerresearchtheoptimumconditionofsolubleexpressionwasobtainedbyhavingparticularlystudiedseveralinfluencingfactsofsolubleexpressionsuchasinducedtemp
5、eratureconcentrationofIPTGinducedtimeinducedperiodcomponentsofculturemedium.ThedatasuggestedthatthecontentofthesolubleexpressedrhFGF8aproteinwasoptimizedtomethan30%ofthetotalbacterialproteins.Usingthetechniqueofchromatog
6、raphyrhFGF8aproteinwasisolatedpurifiedsuccessfully.TheresultofSDSPAGE(SodiumDodecySulfatePolyacrylaeGelElectrophesis)showedthatthepurityofrhFGF8aproteinwasabove90%.MTT(3(45dimethylthiazol2yl)25diphenyltetrazoliumbroe)ass
7、ayrevealedthattheactivityofthepurifiedproteinexpressedsolublywashigherthanthatinthefmofinclusionbodyinEscherichiacolirhFGF8apET22b()Rosetta(DE3).InsummarytheconditionofsolubleexpressionthepurificationmethodofrhFGF8aprote
8、inwhichhavebeenestablishedinthisstudynotonlylaythefoundationfthefollowingresearchlargescaleindustrialproductionbutalsocouldapplytothestudyofothersimilarmembersofFibroblastGrowthFacts.KeyWds:rhFGF8asolubleexpressionoptimi
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