重組人堿性成纖維細胞生長因子對HacaT細胞增殖的影響.pdf

1、目的:掌握HaCaT細胞培養(yǎng)的技術(shù)，了解細胞的生長特性；研究重組人堿性成纖維細胞生長因子(rh-bFGF)在不同濃度下對HaCaT細胞的增殖影響，以及rh-bFGF對HaCaT細胞有無異常分化的作用，并以此為臨床準確定量應用rh-bFGF修復創(chuàng)面愈合提供理論依據(jù)。 方法:利用HaCaT細胞體外培養(yǎng)，用不同濃度的rh-bFGF干預細胞，四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT)檢測細胞的活性，選擇最適濃度rh-bFGF干預的HaCaT細胞，用

2、流式細胞儀檢測細胞的DNA倍體情況。 結(jié)果:①HaCaT細胞生長過程的觀察：HaCaT細胞傳代后24h基本貼壁，未貼壁的細胞在換液過程中被清除，約4-5天長滿瓶底的80％，繼續(xù)傳代。該細胞分布較均勻，呈長條形或梭形。②不同濃度rh-bFGF對HaCaT細胞增殖的影響：rh-bFGF的濃度為0-100ng/ml時，不同濃度各組相比，P<0.05，具有統(tǒng)計學差異，吸光度值分別為0.137±0.012，0.216±0.022，0.31

3、8±0.019，0.362±0.011，0.452±0.017，0.510±0.012，提示此濃度下對HaCaT。細胞有增殖作用，在100ng/ml下增殖最強；在500ng/ml時，與Ong/ml組相比，P>0.05,無統(tǒng)計學差異，吸光度值為0.140±0.057，提示無明顯增殖作用。③培養(yǎng)48h時流式細胞儀對rh-bFGF最適濃度下細胞倍體含量的測定：在100ng/ml下無細胞倍體異常的情況。 結(jié)論:rh-bFGF的濃度為1-