BMP9對骨微環(huán)境中非小細胞肺癌A549細胞的影響及機制研究.pdf

1、目的：探討骨形態(tài)發(fā)生蛋白9（bone morphogenetic protein9, BMP9）對骨微環(huán)境中非小細胞肺癌A549細胞的作用及其機制研究，為肺癌的診斷和治療提供新的標志物和實驗基礎。
　　方法：采用qRT-PCR、western blot法分別檢測人肺腺癌細胞A549和正常支氣管上皮細胞HBE中BMP9的mRNA、蛋白表達水平。用重組腺病毒AdBMP9感染A549細胞，qRT-PCR和western blot法驗證B

2、MP9的變化；應用MTT、流式細胞術、劃痕愈合和Transwell侵襲實驗分別檢測各組細胞的增殖、凋亡、遷移和侵襲等生物學特性，并用western blot檢測增殖、凋亡及遷移相關蛋白的變化。應用Transwell小室構建A549與骨髓基質細胞HS-5的共培養(yǎng)體系，AdBMP9感染A549細胞，用MTT、劃痕愈合和Transwell侵襲實驗分別檢測各組細胞生物學特性的變化；并用qRT-PCR和 western blot檢測遷移及破骨相關

3、因子IL-6、IL-8的mRNA和蛋白水平；western blot檢測MAPK、PI3K/AKT和 NF-κB通路的激活情況。在體內，構建裸鼠皮下成瘤和脛骨轉移模型，分別檢測BMP9對肺癌瘤體生長及骨轉移的影響。
　　結果：BMP9在A549細胞中的表達低于HBE細胞；過表達BMP9明顯抑制了A549細胞的增殖、遷移和侵襲，并促進其凋亡能力。A549與HS-5細胞共培養(yǎng)后，A549細胞的增殖、遷移和侵襲能力有所增加，且IL-6、

4、IL-8的mRNA和蛋白水平及p-ERK、p-P65表達均升高；共培養(yǎng)體系中過表達BMP9明顯抑制了HS-5對A549細胞的促進作用。在體內，HS-5促進A549細胞的成瘤能力，BMP9抑制了A549細胞的皮下成瘤及對骨的溶骨損傷。
　　結論：過表達BMP9能明顯抑制A549細胞的增殖、遷移和侵襲能力，并促進其凋亡；骨髓基質細胞HS-5促進了A549細胞的增殖、遷移和侵襲能力，BMP9亦能抑制HS-5對A549細胞的促進作用；其機