20-羥二十烷四稀酸(20-HETE)經(jīng)NADPH氧化酶衍生的活性氧途徑引起乳鼠心肌細(xì)胞鈣超載效應(yīng).pdf_第1頁(yè)
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1、抑制細(xì)胞色素P-450(CYP450)ω-羥化酶作用20-羥二十烷四烯酸(20-hydroxyeicosatetraenoic，20-HETE)產(chǎn)生降低，明顯抑制心肌梗死面積。但是20-HETE對(duì)心肌細(xì)胞的作用還不清楚。因此，本研究旨在研究20-HETE對(duì)細(xì)胞內(nèi)鈣離子水平和活性氧( ROS)的影響。利用鈣離子熒光探針Fluo-3染色，運(yùn)用激光共聚焦顯微鏡檢測(cè)20-HETE對(duì)培養(yǎng)大鼠乳鼠心肌細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度及鈣瞬變的影響；ROS熒光探針D

2、HE可穿透細(xì)胞，檢測(cè)胞內(nèi)ROS，Image ProPlus軟件測(cè)定藥物處理前后熒光強(qiáng)度的變化；運(yùn)用光澤精化學(xué)發(fā)光法測(cè)定NADPH氧化酶活性。20-HETE（0.1umol/L）孵育，可以使胞內(nèi)鈣離子濃度由531±35.0增加到942±47.2，升高44％，且鈣瞬變的幅度由2.8±0.24增加到4.2±0.27升高33％，20-HETE造成的細(xì)胞內(nèi)鈣離子超載的作用可明顯被ROS清除劑tempol(100 u M)和NADPH氧化酶抑制劑加

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