衣霉素預處理對膿毒癥乳鼠心肌細胞活性及線粒體功能的影響.pdf

1、目的：觀察衣霉素預處理誘導適度內質網應激對膿毒癥乳鼠心肌細胞活性及線粒體功能的影響。
　　 方法：分離純化乳鼠心肌細胞，進行體外培養(yǎng)。第一部分：觀察不同濃度衣霉素對心肌細胞內質網應激的影響。實驗分為4組：對照組（C），0.05μg/ml衣霉素組（T0.05），0.1μg/ml 衣霉素組（T0.1），0.5μg/ml 衣霉素組（T0.5）。Western Blot 測定各組心肌細胞GRP78 蛋白表達變化，確定適宜衣霉素濃度。第二

2、部分：觀察衣霉素預處理誘導適度內質網應激對膿毒癥乳鼠心肌細胞活性及線粒體功能的影響。實驗分為四組：對照組，衣霉素組，LPS組，衣霉素預處理+LPS組。MTT 測定各組心肌細胞存活率，熒光顯微鏡觀察線粒體膜電位變化，流式細胞儀檢測細胞內活性氧（ROS）產量。
　　 結果：第一部分：與對照組相比T0.05，T0.1組GRP78 蛋白表達無明顯變化，T0.5組表達顯著增加（P<0.01）。第二部分：單純0.5μg/ml 衣霉素作用對心

3、肌細胞活力及線粒體功能無明顯影響。1μg/ml LPS 對心肌細胞存活率無明顯影響，但可致線粒體膜電位下降，ROS 產量明顯增高（P<0.05）。衣霉素預處理可改善LPS 所致心肌細胞線粒體膜電位的喪失，同時細胞內ROS 產量明顯減低（P<0.01）。
　　 結論：0.5μg/ml 衣霉素可誘導原代乳鼠心肌細胞產生適度內質網應激，上調GRP78 蛋白表達，不降低細胞存活率，對線粒體功能無影響。1μg/ml LPS 對心肌細胞存活