內毒素誘導Wistar大鼠DIC模型建立及尿激酶干預作用的探討.pdf

1、研究目的： 1．建立內毒素誘導Wistar大鼠DIC模型。 2．探討尿激酶對內毒素誘導Wistar大鼠DIC模型干預的意義。 對象與方法：選用Wistar大鼠72只，雌性，體重160～170g，周齡6～7周。 1、內毒素誘導Wistar大鼠DIC模型建立：符合試驗標準的Wistar大鼠隨機分配入實驗組和對照組，戊巴比妥(30mg/kg)經腹腔麻醉后，尾靜脈持續(xù)輸注生理鹽水2.5ml/h或內毒素3m

2、g/kg/h，分別于1、2、4小時經腹腔靜脈取血，以EDTA和3.8％枸櫞酸鈉抗凝，行PT、APTT、FIB、ALT、Cr、PAI-1和D-二聚體檢測及顯微鏡下計數(shù)血小板?；铙w取大鼠腎、肝、肺標本，10％甲醛固定，經包埋、切片后，行HE、MSB及PTAH染色。 2、尿激酶干預方法：符合試驗標準的Wistar大鼠隨機分配入實驗組和對照組，分別經尾靜脈輸入生理鹽水(NS組)、尿激酶(UK組)、內毒素(LPS組)及尿激酶+內毒素(U

3、K+LPS組)×4h。麻醉、腹腔靜脈取血、取肝、腎、肺標本同前。 結果： 1．內毒素誘導Wistar大鼠DIC造模結果：Wistar大鼠按LPS(3mg/kg/h)濃度分別經尾靜脈輸入1小時、2小時、4小時后，可見血漿PT、APTT逐漸延長，PLT、FIB逐漸降低，ALT、Cr逐漸升高，均在2小時達高峰，4小時表現(xiàn)為平臺狀態(tài)。纖溶指標PAI-1、D-dimer開始上升明顯，隨著PAI-1進一步升高，D-dimer下降

4、。肝、腎、肺病理切片顯示細胞水腫，微血管中可見纖維蛋白微血栓形成，此改變在1小時較輕微，2小時及4小時最明顯，尚伴有灶性出血，纖維蛋白微血栓形成在腎小球易見。提示此模型在LPS輸入1小時時開始出現(xiàn)DIC的跡象，隨著輸注時間的延長，DIC的表現(xiàn)越趨明顯。 2．尿激酶干預試驗顯示：(1)尿激酶干預后PT、APTT、值雖未回復至NS對照組水平，但較LPS組明顯縮短，而PLT、FIB的改變不大；PAI-1濃度減低，而D-dimer含量

5、明顯增高。(2)尿激酶干預組Cr、ALT明顯降低，肝、腎、肺病理切片示：組織損傷較LPS組減輕，腎小球纖維蛋白形成率明顯減少。(3)實驗過程中LPS組實驗鼠死亡只數(shù)為4/10只，主要死于呼吸衰竭。而尿激酶干預組為1/10只。 結論： (1)我們首次在本院血液病研究室用內毒素(3mg/kg/h)誘導Wistar大鼠建立DIC模型成功。 (2)本研究顯示尿激酶對改善LPS誘導Wistar大鼠DIC模型出現(xiàn)的凝血