重型乙型肝炎恢復期患者肝組織FGL2凝血酶原酶表達的研究.pdf

1、目的：
　　通過觀察重型乙型肝炎恢復期患者肝組織中 FGL2凝血酶原酶（Fibrinogen-like protein2 prothrombinase）及HBVDNA的表達，并分析其FGL2凝血酶原酶的表達與患者肝臟病理變化、肝功能、凝血酶原活動度（PTA）、肝組織HBVDNA及血清HBVDNA的相關性，探討FGL2凝血酶原酶在重型乙型肝炎發(fā)病機制及進展過程中的作用，進而了解FGL2凝血酶原酶表達測定的臨床意義。
　　方法：

2、
　?。?）根據(jù)重型肝炎診斷標準《2012年版肝衰竭診治指南》和慢性乙型肝炎診斷標準《2015年版慢性乙型肝炎防治指南》，收集乙型肝炎患者57例，其中重型乙型肝炎恢復期患者38例為研究組（根據(jù)患者肝組織病理結果將無肝硬化的分為研究1組，有肝硬化為研究2組）；慢性乙型肝炎患者19例為對照組（根據(jù)患者肝組織病理結果將輕度分為對照1組，中重度為對照2組）。
　?。?）通過B超定位行肝臟穿刺活檢術獲取肝組織。行肝組織病理切片，HE染

3、色，后做FGL2免疫組化制片。觀察采集到的FGL2陽性表達強弱，即以細胞漿顯現(xiàn)黃色、棕黃色、棕褐色染色為標準，選擇每張切片上有代表性的高倍視野區(qū)域（×200），再以染色程度和陽性細胞面積來判斷結果。
　?。?）將石蠟切片的肝組織通過鹽析法提取HBVDNA，采用實時熒光定量PCR法檢測肝組織HBVDNA和血清HBVDNA的表達。
　?。?）檢測肝功能：主要為血清總膽紅素（TBiL）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）和門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移

4、酶（AST）的表達水平；檢測凝血酶原活動度（PTA）的表達情況。
　?。?）應用SPSS17.0軟件，對研究組與對照組，研究組之間分別進行兩兩對比統(tǒng)計分析肝組織中FGL2及HBVDNA的表達差異，并分析研究組FGL2的表達與患者肝臟病理變化、肝功能、PTA、肝組織HBVDNA及血清HBVDNA的相關性。
　　結果：
　?。?）研究組（重型乙型肝炎恢復期）肝組織相當于炎癥分級（G）及纖維化分期（S）的病理特點為：無肝硬化

5、的重型乙型肝炎恢復期組（研究1組）30例，G12例（6.67％），G22例（6.67%），G311例（36.66%），G415例（50%）， S17例（23.33%），S23例（10%），S35例（16.67%），S415例（50%）。有肝硬化的重型乙型肝炎恢復期組（研究2組）8例：G23例（37.5%），G33例（37.5%）， G42例（25%）。提示重型乙型肝炎恢復期肝組織相當于以G3-4S3-4為主，存在壞死后明顯的肝纖維化，或

6、存在壞死后的肝硬化，且肝組織炎癥及纖維化同時表現(xiàn)。對照組（慢性乙型肝炎）經(jīng)病理診斷為輕度10例（對照1組）；中重度9例（對照2組）。
　　（2）各組肝組織中FGL2表達的情況為：研究1組有29例（96.67%）陽性表達和1例（3.33%）陰性表達，其中陽性表達分別為：9例（30%）弱陽性，5例（16.67%）中度陽性，15例（50%）強陽性。研究2組和慢性中重度乙型肝炎組（對照2組）均有中強陽性表達。研究2組陽性表達分別為1例（1

7、2.5%）中度陽性，7例（87.5%）強陽性。對照2組陽性表達分別為5例（55.56%）中度陽性，4例（44.44%）強陽性。慢性輕度乙型肝炎組（對照1組）為陰性至弱陽性表達，其中有7例（70%）弱陽性表達和3例（30%）陰性表達。
　?。?）肝組織中FGL2表達的平均分值情況為：研究組7.47±4.18，對照組4.11±4.51，經(jīng)比較差異有統(tǒng)計學意義（P=0.007，P＜0.01）。即研究組FGL2表達的平均分值高于對照組，說

8、明重型乙型肝炎恢復期組肝組織中FGL2的表達強于慢性乙型肝炎組，提示重型乙型肝炎恢復期肝細胞炎癥壞死程度高于慢性乙型肝炎。
　?。?）各組肝組織中FGL2表達的平均分值分別為：6.47±4.03（研究1組），11.25±2.12（研究2組），0.80±0.63（對照1組），7.78±4.06（對照2組）。經(jīng)檢驗F=18.065，組間比較，P＜0.01，提示FGL2的表達在四組中存在顯著差異。
　　1）研究1組與研究2組比較，

9、其差異有統(tǒng)計學意義（P=0.001，P＜0.01）。即研究1組的平均分值低于研究2組，說明無肝硬化的重型乙型肝炎恢復期組肝組織中FGL2表達弱于有肝硬化的重型乙型肝炎恢復期組。提示無肝硬化的重型肝炎恢復期肝細胞炎癥壞死程度低于有肝硬化的重型乙型肝炎恢復期。
　　2）研究1組與對照1組比較，其差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。即研究1組的平均分值高于對照1組，說明無肝硬化的重型乙型肝炎恢復期組肝組織中FGL2表達強于慢性輕度乙型肝炎

10、組。提示無肝硬化的重型肝炎恢復期肝細胞炎癥壞死程度高于慢性輕度乙型肝炎。
　　3）研究1組與對照2組比較，其差異無統(tǒng)計學意義（P=0.191，P＞0.05）。即研究1組的平均分值與對照2組相仿，說明無肝硬化的重型乙型肝炎恢復期組肝組織中FGL2表達與慢性中重度乙型肝炎組相似。提示無肝硬化的重型肝炎恢復期肝細胞炎癥壞死程度與慢性中重度乙型肝炎相似。
　　4）研究2組與對照1組比較，其差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。即研究2組

11、的平均分值高于對照1組，說明有肝硬化的重型乙型肝炎恢復期組肝組織中FGL2表達強于慢性輕度乙型肝炎組。提示有肝硬化的重型肝炎恢復期肝細胞炎癥壞死程度高于慢性輕度乙型肝炎。
　　5）研究2組與對照2組比較，其差異有統(tǒng)計學意義（P=0.021，P＜0.05）。即研究2組的平均分值高于對照2組，說明有肝硬化的重型乙型肝炎恢復期組肝組織中FGL2表達強于慢性中重度乙型肝炎組。提示有肝硬化的重型肝炎恢復期肝細胞炎癥壞死程度高于慢性中重度乙型

12、肝炎。
　?。?）肝組織中 HBVDNA表達的平均值(lg copies/ml)情況為：研究組3.95±1.18，對照組4.79±1.49，經(jīng)比較差異有統(tǒng)計學意義（P=0.041，P＜0.05）。即研究組平均值低于對照組，說明重型乙型肝炎恢復期肝組織中HBVDNA的表達低于慢性乙型肝炎，提示重型乙型肝炎恢復期肝細胞HBV復制程度低于慢性乙型肝炎。
　?。?）肝組織中HBVDNA表達的各組平均值(lg copies/ml)情況

13、分別為：3.89±1.21（研究1組），4.18±1.07（研究2組），4.70±1.84（對照1組），4.88±1.08（對照2組）。研究1組分別與研究2組、對照1組、對照2組進行兩兩比較，研究2組分別與對照1組、對照2組進行兩兩比較，僅研究1組與對照2組比較差異有統(tǒng)計學意義（P=0.038，P＜0.05）。即研究1組表達的平均值低于對照2組，說明無肝硬化的重型乙型肝炎恢復期組HBVDNA表達低于慢性中重度乙型肝炎組。提示無肝硬化的重

14、型乙型肝炎恢復期肝細胞HBV復制程度低于慢性中重度乙型肝炎。其他組間比較經(jīng)檢驗均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　?。?）重型乙型肝炎恢復期肝組織中FGL2表達的平均分值與其恢復期的TBiL、ALT、AST、PTA、肝組織HBVDNA、血HBVDNA行Spearman相關分析，相關系數(shù)均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　結論：
　　重型乙型肝炎恢復期肝組織相當于以G3-4S3-4為主，存在壞死后明顯的肝纖維化，且肝組

15、織炎癥及纖維化同時表現(xiàn)，存在壞死后的肝硬化。肝組織中FGL2的表達重型乙型肝炎恢復期高于慢性乙型肝炎，其中無肝硬化的重型乙型肝炎恢復期低于有肝硬化的重型乙型肝炎恢復期，且與慢性中重度乙型肝炎相似；有肝硬化的重型乙型肝炎恢復期高于慢性中重度乙型肝炎；重型乙型肝炎恢復期高于慢性輕度乙型肝炎，說明肝組織中FGL2凝血酶原酶的表達并非為重型肝炎所特有的現(xiàn)象，F(xiàn)GL2在重型乙型肝炎恢復期為強表達，與病情存在壞死后的肝硬化正相關，且會隨著重型乙型肝