晚期非小細(xì)胞肺癌治療順序觀察及惡性胸腔積液特異性多肽標(biāo)志物探索研究.pdf

1、背景:晚期非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)是一種預(yù)后極差的惡性腫瘤，全世界每年死于NSCLC的人數(shù)正逐年遞增。當(dāng)前，晚期NSCLC中，肺鱗癌的治療至今仍以全身化療為主，但其化療順序尚未明確;且對(duì)于NSCLC而言，至今仍缺乏敏感性及特異性均滿(mǎn)足臨床需求的腫瘤標(biāo)志物，現(xiàn)如今，蛋白質(zhì)組學(xué)日益興起，蛋白質(zhì)組學(xué)的新技術(shù)MALDI-TOF質(zhì)譜技術(shù)為篩選患者組織、體液中的多肽性腫瘤標(biāo)志物帶來(lái)福音。為了

2、更好地實(shí)現(xiàn)對(duì)晚期NSCLC患者的個(gè)體化管理，本課題從晚期肺鱗癌的治療順序觀察及肺癌惡性胸水腫瘤標(biāo)志物篩查這兩點(diǎn)出發(fā)，以期為晚期NSCLC患者制訂更好地診斷、治療決策。
　　第一部分
　　目的:吉西他濱和紫杉類(lèi)藥物是晚期肺鱗癌常用的化療藥物，但二者在一、二線治療中的最佳順序尚未明確，本研究旨在分析吉西他濱單藥威聯(lián)合鉑類(lèi)同紫杉類(lèi)藥物單藥/或聯(lián)合鉑類(lèi)在一、二線治療中不同化療順序的療效及毒副作用。
　　方法:回顧性分析了105

3、例ⅢB-Ⅳ期肺鱗癌患者，49例為一線予吉西他濱單藥/或聯(lián)合鉑類(lèi)，進(jìn)展后二線予紫杉類(lèi)單藥/或聯(lián)合鉑類(lèi)治療(G-T組);56例為一線予紫杉類(lèi)單藥/或聯(lián)合鉑類(lèi)，進(jìn)展后二線予吉西他濱單藥/或聯(lián)合鉑類(lèi)治療(T-G組)。主要研究終點(diǎn)為總生存時(shí)間(overall survival，OS);此外，次要研究終點(diǎn)為無(wú)進(jìn)展生存期（progression free survival, PFS）、疾病控制率(disease controlrate，DCR)和客觀

4、緩解率(objective response rate，ORR)及不良反應(yīng)。
　　結(jié)果:
　　(1)主要研究終點(diǎn)，G-T組與T-G組中位OS分別為18.5個(gè)月和19.0個(gè)月，兩組未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.520)。
　　(2) G-T組與T-G組一線化療中位PFS1分別為:一線吉西他濱單藥/或聯(lián)合鉑類(lèi)治療為5.0個(gè)月，一線紫杉類(lèi)藥物單藥/或聯(lián)合鉑類(lèi)治療為4.0月，PFS1未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.645);兩組二線化療中位

5、PFS2為:二線紫杉類(lèi)藥物單藥/或聯(lián)合鉑類(lèi)治療為2.50個(gè)月，二線吉西他濱單藥/或聯(lián)合鉑類(lèi)治療為2.70個(gè)月，PFS2未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.432)。
　　(3) G-T組與T-G組一線化療ORR1分別為36.73％和33.92％(P=0.577)，DCR1分別為79.59％和89.29％(P=0.186);二線化療ORR2分別為4.08％和5.36％(P=0.085)，DCR2分別為51.02％和66.07％(P=0.118)

6、。
　　(4) G-T組與T-G組毒副作用相似，但總體而言G-T組更易出現(xiàn)Ⅲ-Ⅳ級(jí)紅細(xì)胞減低(P=0.027)和血小板減低(P=0.002)。而一線吉西他濱單藥/或聯(lián)合鉑類(lèi)化療的患者在本研究中更易出現(xiàn)Ⅰ/Ⅱ粒細(xì)胞減少，兩組存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.001)。一線吉西他濱化療Ⅳ級(jí)血小板降低亦更為常見(jiàn)，兩組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.002);二線紫杉類(lèi)藥物更易出現(xiàn)Ⅳ級(jí)粒細(xì)胞減低(P=0.042)。
　　結(jié)論:一線吉西他濱單藥/或

7、聯(lián)合鉑類(lèi)序貫二線紫杉類(lèi)單藥/或聯(lián)合鉑類(lèi)與一線紫杉類(lèi)單藥/或聯(lián)合鉑類(lèi)序貫二線吉西他濱單藥/或聯(lián)合鉑類(lèi)療效相當(dāng)，不良反應(yīng)可耐受，兩種序貫?zāi)Ｊ骄鶎?duì)初治晚期肺鱗癌患者有效。在臨床實(shí)踐中，可根據(jù)患者實(shí)際情況為患者制定個(gè)體化治療計(jì)劃。
　　第二部分
　　目的:應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法磁珠聯(lián)合MALDI-TOF質(zhì)譜技術(shù)，對(duì)比NSCLC中晚期肺腺癌的惡性胸腔積液與結(jié)核性胸腔積液的差異多肽，從而篩選肺癌相關(guān)多肽標(biāo)志物，并建立一套鑒別診斷肺腺癌惡

8、性胸腔積液的診斷模型，以期提高肺癌惡性胸腔積液的診斷率。
　　方法:
　　1.將確診為晚期肺腺癌患者的65例胸水樣本，確診為結(jié)核性胸膜炎患者的32例胸水樣本均經(jīng)胸水沉淀細(xì)胞涂片檢測(cè)腫瘤細(xì)胞。
　　2.將胸水細(xì)胞病理學(xué)檢測(cè)到腺癌細(xì)胞的45例惡性胸腔積液，32例結(jié)核性胸腔積液，按2∶1的比例隨機(jī)分為訓(xùn)練組和驗(yàn)證組。訓(xùn)練組30例惡性胸腔積液，22例結(jié)核性胸腔積液通過(guò)銅離子螯合納米磁珠提取胸水上清液多肽，MALDI-TOF質(zhì)譜

9、掃描8000-10000Da質(zhì)核比的多肽，再通過(guò)Clinprotoo ls軟件找出兩者多肽差異，篩選惡性胸水特異性標(biāo)志物，通過(guò)軟件內(nèi)置統(tǒng)計(jì)學(xué)算法(SNN算法、QC算法、GA算法)中的最優(yōu)算法建立鑒別肺癌惡性胸腔積液質(zhì)譜診斷模型;隨后驗(yàn)證組15例惡性胸腔積液，10例良性胸腔積液用同樣方法進(jìn)行多肽提取、質(zhì)譜檢測(cè)，經(jīng)軟件分析后行結(jié)果驗(yàn)證。
　　3.將31例肺腺癌惡性胸腔積液及32例結(jié)核性胸腔積液經(jīng)放射免疫法檢測(cè)CEA。
　　4.將

10、肺癌惡性胸腔積液質(zhì)譜診斷模型與胸水細(xì)胞涂片法及胸水腫瘤標(biāo)志物CEA檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行差異性比較。
　　結(jié)果:
　　1.65例經(jīng)確診的肺腺癌患者胸腔積液中，45例(69.23％)經(jīng)胸水涂片發(fā)現(xiàn)腺癌細(xì)胞（團(tuán)）。
　　2.訓(xùn)練組30例惡性胸腔積液與22例結(jié)核性胸腔積液經(jīng)MALDI-TOF質(zhì)譜分析發(fā)現(xiàn)共有28個(gè)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)的多肽質(zhì)譜峰，15個(gè)在NSCLC惡性胸腔積液中高表達(dá)，13個(gè)低表達(dá)。通過(guò)clinprotool

11、s軟件中最優(yōu)算法（SNN算法）共篩選出5個(gè)多肽峰，建立診斷肺腺癌惡性胸腔積液的診斷模型，其質(zhì)核比分別為:917.37Da，4469.39 Da，1466.5 Da，4585.21 Da，3216.87 Da，最終經(jīng)驗(yàn)證后發(fā)現(xiàn)，該模型敏感性93.3％，特異性100％，準(zhǔn)確率96％。
　　3.31例肺腺癌惡性胸腔積液樣本中，21例CEA檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性（CEA檢測(cè)值＞4.3ug/ml），該方法敏感性為67.74％(21/31);32例結(jié)

12、核性胸腔積液樣本中，23例CEA檢測(cè)結(jié)果為陰性(CEA檢測(cè)值＜4.3ug/ml)，特異性為71.87％(23/32)。
　　4.惡性胸腔積液質(zhì)譜診斷模型與胸水細(xì)胞涂片相比較，其陽(yáng)性率存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.013)。與胸水腫瘤標(biāo)志物CEA檢測(cè)相比較，其敏感性與特異性不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.07，P=0.086)。
　　結(jié)論:肺腺癌患者惡性胸腔積液與結(jié)核性胸腔積液存在明顯的多肽差異，這些差異多肽可能為惡性胸腔積液特異性生物標(biāo)