運動經(jīng)PI3K-Akt和MAPK通路間平衡介導(dǎo)調(diào)控高血壓VSMC的表型轉(zhuǎn)換.pdf

1、研究目的：血管平滑肌的表型轉(zhuǎn)換是其增殖和遷移的關(guān)鍵性起始步驟，同時血管平滑肌的增殖和遷移是高血壓、動脈粥樣硬化和血管成形術(shù)后再狹窄等心血管疾病的共同發(fā)病基礎(chǔ)。本實驗旨在探究增齡和有氧運動對SHR胸主動脈平滑肌表型轉(zhuǎn)換及PI3K和MAPK信號通路間平衡的調(diào)控。
　　研究方法：第一部分：選取1、3、9、16月齡的雄性WKY和SHR各12只，尾動脈無創(chuàng)血壓測定后麻醉，取各組大鼠的胸主動脈進(jìn)行實驗。1.H&E染色：測量胸主動脈的管壁厚度；

2、2.免疫組化實驗：檢測平滑肌表型標(biāo)志蛋白α-SM-actin、calponin、OPN的表達(dá)和分布；3.Western Blot蛋白印跡法：檢測平滑肌表型標(biāo)志蛋白α-SM-actin、calponin、OPN的表達(dá)量，信號蛋白p-Akt、Akt、eNOS、p-42/44ERK、42/44ERK、p-p38MAPK、p38MAPK的表達(dá)量。
　　第二部分：選取3月齡雄性WKY和SHR各24只，分組如下：正常血壓安靜對照組（WKY-S

3、ED，n=12）、正常血壓有氧運動組（WKY-EX，n=12）、高血壓安靜對照組（SHR-SED，n=12）、高血壓有氧運動組（SHR-EX，n=12）。運動組進(jìn)行8周跑臺運動干預(yù)，運動前后尾動脈無創(chuàng)血壓測定，取胸主動脈進(jìn)行實驗：實驗檢測指標(biāo)同第一部分。
　　研究結(jié)果：第一部分：（1）血壓：WKY和SHR的SBP均隨年齡增長呈上升趨勢，與同年齡的WKY組相比，SHR組的SBP顯著升高（P<0.01）。（2）H&E染色：胸主動脈的管

4、壁厚度隨年齡增長不斷增加，且在9月齡時WKY和SHR出現(xiàn)顯著差異（P<0.01）。（3）免疫組化和Western Blot實驗：3月齡后，WKY SHR的α-SM-actin、calponin蛋白表達(dá)量均隨年齡增加出現(xiàn)下調(diào)，而OPN出現(xiàn)上調(diào)，且3月齡時WKY和SHR已具有顯著差異（actin、calponin：P<0.05，OPN：P<0.01）。p-Akt、eNOS的蛋白表達(dá)量隨年齡增加逐漸下調(diào)，p-ERK、p-p38蛋白表達(dá)量隨年齡

5、增長逐漸上調(diào)。
　　第二部分：（1）血壓：與WKY-SED組相比，SHR-EX組SBP顯著升高（P<0.01），WKY-EX組SBP顯著性下降（P<0.05）。與SHR-SED組相比，SHR-EX組SBP出現(xiàn)顯著下調(diào)（P<0.01）。（2）H&E染色：與WKY-SED組相比，SHR-SED組胸主動脈管壁厚度明顯增加（P<0.01），WKY-EX組無顯著性差異；與SHR-SED組相比，SHR-EX組胸主動脈管壁厚度顯著降低（P<0.

6、05）。（3）免疫組化和Western Blot實驗：與WKY-SED組相比，SHR-SED組α-SM-actin、calponin蛋白表達(dá)水平顯著性下調(diào)，而OPN顯著性上調(diào)（P<0.01），WKY-EX組無顯著性差異。與SHR-SED組相比，SHR-EX組α-SM-actin、calponin蛋白表達(dá)水平顯著性上調(diào)，OPN顯著性下調(diào)（P<0.05）。與WKY-SED組相比，SHR-SED組p-Akt、eNOS的表達(dá)量顯著性下調(diào)（P<0

7、.01），p-ERK、p-p38的表達(dá)量顯著性上調(diào)（P<0.01），WKY-EX組p-Akt（P<0.05）、eNOS（P<0.01）的表達(dá)量呈上調(diào)趨勢。與SHR-SED組相比，SHR-EX組p-Akt（P<0.05）、eNOS（P<0.01）的表達(dá)量顯著性上調(diào)，p-ERK（P<0.05）、p-p38（P<0.05）表達(dá)量顯著性下調(diào)。
　　研究結(jié)論：隨年齡增長，正常血壓大鼠和高血壓大鼠胸主動脈的血管平滑肌中的收縮表型標(biāo)志蛋白逐漸減