簡介：目的了解河北省腎綜合征出血熱疫源地鼠種構(gòu)成、帶毒率及宿主動物所攜帶漢坦病毒與種群遺傳特性間的關(guān)系，指導(dǎo)對本病的預(yù)防和控制。方法1疫源地調(diào)查，夾夜法捕鼠，無菌取鼠肺；2用冷凍切片機切鼠肺，冷丙酮固定，間接免疫熒光法篩選漢坦病毒陽性鼠肺；3從陽性和陰性鼠肺中提取鼠基因組DNA；4根據(jù)文獻以及GENEBANK中已知的微衛(wèi)星位點查找特異性引物，用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）進行擴增，并進行電泳和觀察結(jié)果；5根據(jù)電泳結(jié)果顯示，比較同一地區(qū)和不同地區(qū)陰性陽性標本間的差異，并根據(jù)相似系數(shù)計算不同地區(qū)間種群的親緣關(guān)系。結(jié)果12008年的鼠間疫情資料顯示褐家鼠占總捕獲鼠種的7039％，是河北省的優(yōu)勢鼠種。河北省居民區(qū)鼠種主要為褐家鼠和小家鼠，分別占居民區(qū)總捕獲鼠種的7338％和2410％；野外鼠種主要為褐家鼠、大倉鼠和小家鼠，分別占野外總捕獲鼠種的5472％、2075％和1321％。河北省居民區(qū)鼠密度為216％，高于野外鼠密度（053％）。2將331份鼠肺冷凍切片，冷丙酮固定后用間接免疫熒光法檢測，陽性鼠肺共1份，陽性率為030％。提示我省腎綜合征出血熱疫源地鼠帶毒率較低，帶毒鼠為宅區(qū)褐家鼠，野外及其它鼠種未檢出。3通過對同一地區(qū)攜帶與未攜帶漢坦病毒的褐家鼠間微衛(wèi)星擴增結(jié)果比較得出，D4MIT20、D16MIT4和D18MIT1三個位點均不穩(wěn)定，但D16MIT4位點擴增出的條帶在唐山地區(qū)穩(wěn)定存在，D18MIT1位點僅可在滄州地區(qū)的陽性標本上擴增出條帶，D2MIT12、D3MIT15、D3MIT22、D7MIT26、D12WOX10、D12WOX11和D14MIT2這7個位點上陽性與陰性標本的擴增結(jié)果未顯現(xiàn)出明顯差別。4通過對同一地區(qū)未攜帶漢坦病毒的褐家鼠間微衛(wèi)星擴增結(jié)果比較得出，D4MIT20、D16MIT4和D18MIT1三個位點極不穩(wěn)定，但偶爾會出現(xiàn)，不能作為遺傳特征的標記位點；D2MIT12、D7MIT26和D12WOX10三個位點在各地區(qū)內(nèi)比較穩(wěn)定且發(fā)生變異?。籇3MIT15、D3MIT22、D12WOX11和D14MIT2四個位點在各地區(qū)內(nèi)遺傳變異大，表現(xiàn)出多態(tài)性，鼠個體間存在遺傳差別。5通過對不同地區(qū)未攜帶漢坦病毒的褐家鼠間微衛(wèi)星擴增結(jié)果比較得出，褐家鼠在D3MIT15、D12WOX10、D12WOX11和D14MIT2位點上存在地區(qū)間差異，表明不同地區(qū)的褐家鼠在遺傳上存在差別，其余微衛(wèi)星位點未顯示出差別。經(jīng)過比較相似系數(shù)發(fā)現(xiàn)，邯鄲與保定、石家莊與唐山、滄州與邯鄲的褐家鼠種群間親緣關(guān)系較遠，遺傳距離較大。滄州與唐山的相似系數(shù)為08，親緣關(guān)系較近。6通過對不同地區(qū)攜帶漢坦病毒的褐家鼠間微衛(wèi)星擴增結(jié)果比較得出，D16MIT4位點在唐山地區(qū)的標本上擴增出條帶；D18MIT1位點在滄州標本上也可以擴增出條帶，但不穩(wěn)定；D2MIT12、D3MIT22、D12WOX10和D14MIT2位點上各地區(qū)標本擴增出的條帶電泳位置一致，呈單態(tài)性，這三個地區(qū)間的陽性標本在這些位點上無差異；D7MIT26、D12WOX11和D3MIT15位點在三個地區(qū)擴增結(jié)果穩(wěn)定，但表現(xiàn)出多態(tài)性；D4MIT20位點擴增結(jié)果穩(wěn)定，但與預(yù)期結(jié)果不符。經(jīng)過比較相似系數(shù)發(fā)現(xiàn)，唐山、滄州和保定三個地區(qū)攜帶有漢坦病毒的褐家鼠在這十個位點上的遺傳距離不大，親緣關(guān)系較近。結(jié)論1褐家鼠、小家鼠是河北省居民區(qū)主要鼠種，褐家鼠、大倉鼠和小家鼠是野外主要鼠種。褐家鼠是河北省的優(yōu)勢鼠種，并且是腎綜合征出血熱的主要傳染源。2經(jīng)過對攜帶漢坦病毒和未攜帶漢坦病毒的褐家鼠在十個微衛(wèi)星位點的比較，未發(fā)現(xiàn)兩者之間存在明顯差別，還不能說明褐家鼠感染漢坦病毒與其遺傳因素有關(guān)。3通過計算相似系數(shù)得出，滄州與唐山的褐家鼠親緣關(guān)系較近；邯鄲與保定、邯鄲與滄州、石家莊與唐山間的褐家鼠親緣關(guān)系較遠，遺傳距離大。不同地區(qū)的褐家鼠存在遺傳上的差別。4在所研究微衛(wèi)星位點中，D16MIT4、D18MIT1和D4MIT20三個位點極不穩(wěn)定；D2MIT12、D7MIT26和D12WOX10位點表現(xiàn)出單態(tài)性，遺傳差異??；D3MIT15、D3MIT22、D12WOX11和D14MIT2位點表現(xiàn)出多態(tài)性，遺傳差異大。

簡介：點擊查看更多丙型肝炎病毒NS5B RNA聚合酶抑制性多肽篩選.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：目的揭示抗炎保肝藥物治療慢性乙型病毒性肝炎的誤區(qū)觀察肝榮湯治療經(jīng)抗炎保肝干預(yù)后的慢性乙肝的臨床療效證實治療該病必須堅持辨證論治的方法。方法收集160例使用甘草制劑和或五味子制劑和或水飛薊制劑三種抗炎保肝藥物治療的慢性乙肝患者的臨床資料進行統(tǒng)計與分析總結(jié)其臨床效果。對經(jīng)抗炎保肝干預(yù)后的患者改用辨證論治的方法以健脾疏肝、清熱利濕化痰、活血解毒方法組方為肝榮湯每日一劑療程3個月觀察其對乙肝五項、HBVDAN定量、臨床癥狀、肝功能、肝臟B超的影響。結(jié)果抗炎保肝藥物可降低ALTP001但對AST、GGT、TBIL作用不明顯P005并見ALTAST比值、A和AG比值的降低G的升高P001。肝臟超聲圖像損傷程度和臨床癥狀加重P001。辨證論治結(jié)果顯示肝榮湯加減綜合臨床療效總有效率894％臨床癥狀總有效率93?？山档虯LT、AST、GGT、TBIL、G和升高A、ALTAST、AGP001并改善肝臟超聲圖像P001。100例HBEAG陽性患者中2例HBEAG陰轉(zhuǎn)1例HBEAG抗HBE血清轉(zhuǎn)換。1例HBVDNA陰轉(zhuǎn)。LOGHBVDNA下降幅度平均為005LOGCOPIESML無統(tǒng)計學(xué)意義P005。結(jié)論抗炎保肝藥物臨床療效不確切不能有效地控制或逆轉(zhuǎn)病變的進展。以健脾疏肝、清熱利濕化痰、活血解毒方法組方肝榮湯加減可有效地消除或改善臨床癥狀恢復(fù)肝臟功能修復(fù)肝組織損傷改善肝臟超聲圖像。

簡介：該研究采用同時進行單鏈構(gòu)象多態(tài)SINGLESTREDCONFMATIONALPOLYMPHISMSSCP與異源雙鏈分析HETERODUPLEXANALYSISHDA、核苷酸序列分析等方法①觀察HCV在黑猩猩間傳代和持續(xù)感染時準種的演變并與人慢性HCV感染進行比較以說明黑猩猩與人對HCV的免疫選擇作用的差異②人免疫缺陷病毒HIV感染常導(dǎo)致機體免疫缺陷利用HCV感染者重疊HIV感染后免疫功能低下這一模型作對照觀察免疫功能低下者與正常者間HCV準種的演變以闡明機體免疫壓力對HCV變異的作用結(jié)論1們發(fā)現(xiàn)黑猩猩的DNDS是低的而又不能用強有力的負選擇作用來解釋說明黑猩猩對HCV準種形成的正選擇壓力較人的為弱這些發(fā)現(xiàn)對于解釋黑猩猩感染HCV模型所得的數(shù)據(jù)具有重要意義并且支持在低選擇壓力下優(yōu)勢株序列的變異低的觀點2雖然目前對影響HCV序列演變的因素了解很少而該研究結(jié)果可證明慢性感染不引起非同義變異的積累這一發(fā)現(xiàn)提示免疫功能可通過檢測準種非同義變異來驗證這是對現(xiàn)有檢測宿主與病毒關(guān)系方法的補充3HIV重疊感染后尤其是迅速發(fā)展為AIDS者HCV包膜區(qū)DNDS比例降低提示HIV感染導(dǎo)致機體對HCV的免疫選擇壓力下降但并未證實早期HIV感染對HCV序列演變產(chǎn)生具有統(tǒng)計學(xué)意義的顯著影響仍需進行更多研究以了解HIV是如何改變丙型肝炎進程的4初步發(fā)現(xiàn)在HIV感染前進展緩慢者HCV包膜區(qū)的DNDS較進展迅速者高如果得到證實這一發(fā)現(xiàn)將提示對HCV產(chǎn)生較強免疫應(yīng)答者同樣也對HIV產(chǎn)生較強有效的免疫應(yīng)答

簡介：高致病性流感是一種急性傳染病，引起該疾病的為H5N1高致病性流感病毒。該病毒的天然宿主源于野生禽類，不表現(xiàn)出明顯癥狀，但卻可以導(dǎo)致大量家禽死亡，造成巨大的經(jīng)濟損失。自1997年中國香港首次證實了H5N1高致病流感病毒感染人類的病例，該病毒具備了跨越種屬障礙感染人類的能力，幸運的是，尚不能造成人與人之間的傳播。目前的數(shù)據(jù)顯示，該病毒的傳播范圍在不斷擴大，感染人數(shù)在不斷上升，未來大范圍的爆發(fā)高致病性流感的可能性越來越大。高致病流感病毒目前尚無特效治療方法。疫苗被認為是最有效的途徑，臨床上針對H5N1高致病人流感的疫苗正在研制過程中，但實際上疫苗的應(yīng)用具有滯后性和易變性等缺點，故尚未有理想的人用的高致病流感疫苗問世。藥物治療使用的神經(jīng)氨酸酶抑制劑和M2離子通道阻斷劑存在一定的副作用，并且臨床上已經(jīng)出現(xiàn)耐藥病毒株。因此，采用新的實驗技術(shù)尋找新穎的作用靶點成為研發(fā)抗病毒新藥的重點。流感病毒侵入細胞作為病毒感染宿主的第一步，同時也是研究抗流感病毒藥物的重要環(huán)節(jié)。血凝素蛋白（HA）在流感病毒侵入宿主細胞過程中起關(guān)鍵作用成熟的HA由HA1和HA2兩個亞基組成，其功能分別為識別并結(jié)合宿主細胞表面受體唾液酸（SA）及介導(dǎo)膜融合過程。作為一個新靶點，目前尚未有以HA為靶點的藥物，所以建立以HA為靶點的藥理篩選模型對尋找抗T5N1高致病流感病毒藥物具有重要意義。目的建立由流感病毒外殼蛋白（HA）與人類免疫缺陷病毒HIV1核心包裝成的重組病毒藥理篩選模型，尋找作用于HA的抗H5N1高致病流感病毒的化合物并對其進行機制研究。方法（1）應(yīng)用WESTERNBLOT和HA抗體結(jié)合實驗對HA蛋白的表達情況進行考查；（2）應(yīng)用流感病毒外殼蛋白質(zhì)粒HA與艾滋病毒核心基因組質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染，制備重組病毒HA（VIET）HIVLUC，HA（QH）HIVLUC，HA（H5N2）HIVIUC；（3）應(yīng)用重組病毒對不同細胞系感染實驗對重組病毒的感染能力進行考察；（4）對不同病毒株進行稀釋（12，14，18，116，132），繪制滴度相關(guān)熒光素酶活性單位曲線，考察該模型進行定量分析的可行性；（5）應(yīng)用HA（VIET）HIVLUC模型對2000余種化合物進行初篩，進一步地采用重組病毒HA（VIET）MLVGFP、VSVGHIVLUC、VSVGMLVGFP和不同的細胞系對活性化合物的作用靶點進行確定；（6）應(yīng)用MTT法檢測活性化合物對宿主細胞的毒性；（7）將化合物與宿主細胞孵育不同時間，通過比較考察化合物對宿主細胞表面受體表達的影響；（8）應(yīng)用HA介導(dǎo)的細胞細胞融合實驗，進一步考察藥物的作用環(huán)節(jié)。結(jié)果（1）對重組病毒模型HA（VIET）的表達采用了分子生物學(xué)的方法進行考察WESTERNBLOT結(jié)果表明，轉(zhuǎn)染48小時后提取宿主細胞蛋白，檢測到HA蛋白的表達，并且清楚看到HA0和HA1條帶；（2）通過磷酸鈣轉(zhuǎn)染法制備出外殼蛋白為血凝素HA（不同來源），核心為HIV（報告基因為LUC）的重組病毒，即HA（VIET）HIVLUC、HA（QH）HIVKUC、HA（H5N2）HIVLUC。病毒原液加入后感染293ET細胞，HA（VIET）HIVLUC相關(guān)熒光素酶活性單位（RLUS）達到2107，接近FB15熒光檢測器的最大檢測值；HA（QH）HIVLUC和HA（H5N2）HIVLUC原液感染293ET細胞，其RLUS分別達到106和105，比陰性對照組相的信號高35個數(shù)量級，表明模型已經(jīng)初步建立；（3）隨后進行了重組病毒顆粒對人類不同組織來源的細胞系進行感染性檢測，結(jié)果表明重組病毒顆?？梢愿腥径喾N細胞，尤其對293ET和A549細胞的感染性較強?？贵w結(jié)合實驗結(jié)合結(jié)果顯示抗HA的多克隆抗體可以阻斷病毒對宿主細胞293ET和A549的感染。以上的實驗證實重組病毒HA（VIET）HIVLUC具有高度感染能力。病毒滴度相關(guān)熒光素酶活性單位曲線可以清楚的反映出重組病毒核心復(fù)制水平與熒光素酶報告基因表達水平間的劑量依賴效應(yīng)。因此，該模型可用于針對HA侵入宿主細胞和HIV1復(fù)制環(huán)節(jié)的雙靶點藥物篩選模型（4）篩選2000余種樣品得到3個海洋來源的活性化合物YCUA6，YC72，GC29，經(jīng)過HA（VIET）HIV、HA（VIET）MLVGFP、VSVGHIVLUC、VSVGMLVGFP四組模型進行特異性比較，結(jié)果表明三個化合物在10ΜM濃度下對HA（VIET）HIVLUC和HA（VIET）MLVGFP的抑制率50％，而在相同濃度下對VSVGHIVLUC對照組模型的抑制率（5）MTT結(jié)果顯示，10ΜM濃度下，活性化合物對293ET和A549細胞作用48小時、72小時、96小時之后均無細胞毒作用；（6）活性化合物誘導(dǎo)宿主細胞15分鐘和24小時后，進行感染性檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)感染的程度無顯著性差異；（7）活性化合物對三株重組病毒HA（VIET）HIVLUC，HA（QH）HIVLUC，HA（H5N2）HIVLUC均有抑制作用，而且IC50值均在110ΜM（8）HA介導(dǎo)的細胞細胞融合實驗結(jié)果表明，與DMSO對照組比較，活性化合物都能夠抑制HA蛋白與宿主之間的相互作用，其中以YCUA6的作用最為明顯。結(jié)論（1）成功建立了3種流感病毒血凝素蛋白HA介導(dǎo)的重組病毒模型，成功優(yōu)化了以流感病毒侵入環(huán)節(jié)為靶點的細胞水平的藥理學(xué)篩選模型；（2）通過篩選不同來源的2000余個化合物，發(fā)現(xiàn)了3個海洋來源化合物呈劑量依賴性的抑制病毒對宿主的感染，并確定靶點為HASA相互作用環(huán)節(jié)；（3）初步探討了化合物抑制流感病毒的作用機理即活性化合物呈劑量依賴性的抑制高致病性流感病毒。其作用靶點可能是不同流感病毒共同氨基酸序列或是保守氨基酸序列上；而不是通過調(diào)節(jié)宿主受體的表達而發(fā)揮作用的。

簡介：目的JC病毒屬于人類多瘤病毒屬，是一種重要的機會感染性疾病病原體。JC病毒廣泛分布于人群中，有80％的成人血清學(xué)檢測為陽性1。當免疫力低下時，JC病毒會引發(fā)多灶性腦白質(zhì)病PML2。然而，JC病毒的臨床檢測，以及它的包膜蛋白VP2入核的機制和入核轉(zhuǎn)運受體并不清楚。本研究擬通過原核表達、抗體制備、核定位信號鑒定和入核轉(zhuǎn)運受體的鑒定幾個方面初步闡釋JC病毒的小包膜蛋白VP2基因在PML發(fā)生發(fā)展過程中的生物學(xué)功能。方法1構(gòu)建原核表達載體PET32AVP2，轉(zhuǎn)化BL21宿主菌后經(jīng)IPTG誘導(dǎo)，獲得了帶有組氨酸標簽的重組融合蛋白的優(yōu)化表達。2利用NI親和柱純化表達蛋白并免疫BALBC小白鼠，獲得抗VP2多克隆抗體。以純化VP2為抗原，利用WESTERNBLOT和ELISA法對多克隆抗體進行特異性和效價檢測。3構(gòu)建重組綠色熒光表達載體PEGFPC1VP2，轉(zhuǎn)染7402細胞，24HR后觀察各截短體的亞細胞定位情況。4表達純化PGEX2TIMPTINIMPTINΑ1、3、5、7和IMPINΒ的GST融合蛋白。5通過GSTPULLDOWN方法，尋找并確定VP2的入核轉(zhuǎn)運受體。結(jié)果1通過PCR方法從病人的腦脊液中獲得VP2的目的片段，并成功構(gòu)建了PET32AVP2原核表達載體。PET32AVP2原核表達載體在IPTG的誘導(dǎo)作用下，成功表達融合蛋白通過NI親和層析法獲得了融合蛋白純品。2用純化的VP2融合蛋白免疫BALBC小鼠，成功制備了高效價，高特異性的鼠抗VP2多克隆抗體。通過ELISA法表明多克隆抗體效價1160，000，WESTERNBLOT檢測證明多克隆抗體的特異性良好。3通過PCR方法獲得了VP2截短體的目的片段，成功構(gòu)建了VP2各截短體的綠色熒光表達載體；將構(gòu)建好的VP2各截短體綠色熒光表達載體轉(zhuǎn)染7402人肝癌細胞，通過各截短體的亞細胞定位分析出了VP2蛋白的核定位信號為946972段。4成功表達純化了五個PGEX2TIMPTIN融合蛋白。5通過GSTPULLDOWN實驗，分析發(fā)現(xiàn)VP2能夠與入核轉(zhuǎn)運受體蛋白IMPTINΑ1、IMPTINΑ3結(jié)合，從而被轉(zhuǎn)運入細胞核，發(fā)揮它的生理和生化作用。結(jié)論1我們成功構(gòu)建了PET32AVP2原核表達載體，在IPTG的誘導(dǎo)下，成功表達純化了VP2融合蛋白。這就為抗體的制備以及研究VP2蛋白與其它蛋白的相互作用做了物質(zhì)上的準備。2將VP2蛋白免疫BALBC小鼠，制備了高效價、高特異性的鼠抗VP2多克隆抗體。這對于VP2抗原的檢測，以及免疫組化奠定了基礎(chǔ)。3成功的鑒定出VP2的核定位信號，通過構(gòu)建四個PEGFPC1VP2綠色熒光載體，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染7402細胞株，在熒光顯微鏡下觀察PEGFPC1VP2各截短體的亞細胞定位。這是第一次鑒定出VP2的核定位信號，為進一步的研究提供了信息。4通過GSTPULLDOWN方法，我們成功的鑒定出VP2的入核轉(zhuǎn)運受體為IMPTINΑ1、IMPTINΑ3。初步闡明了VP2入核過程中參與的入核轉(zhuǎn)運受體。

簡介：四川大學(xué)博士學(xué)位論文HTRSIRNA腺病毒抑制宮頸癌細胞端粒酶活性及其抗腫瘤研究姓名李燕申請學(xué)位級別博士專業(yè)病原生物學(xué)指導(dǎo)教師李明遠20070501四川大學(xué)博士學(xué)位論文PHOSPHATEBUFFERED∞LJNEPLAQUEFORMATIONUNITPROPIDIUMIODIDEPEPTIDENUCLEIACIDRNAINTERFERENCERNAINDUCEDSILENCINGCOMPLEXREPLICATIONCOMPETENTADENOVINMESREVOLUTIONSPERMINUTERESPIRATORYSYNCYTIALVIRUS∞MROCTRAM酬P(guān)MSEPCSSECONDSMALLHAIFPINRNASMALLINTERFERENCERNASERFACTAMPROTEINCSP∞遢OP習曲。窖CN矗_∞TERMINAL咖BASEDNICKENDWOEANGTETRAMETHYLBENZIDINETELOMERIC∞PE砒AMPLIFICATIONPROTOCOLTERMINALDEOXYNUCLEOTIDYL嘶鰣FCNISCVASCULARENDOTHELIALGROWTHFACTOR磷酸鹽緩沖液空斑形成單位碘化丙啶肚核酸RNA干擾對執(zhí)介導(dǎo)的沉默復(fù)合體復(fù)制型腺病毒輳澮呼吸道合胞病毒反轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈式反應(yīng)秒小發(fā)夾RNA小干擾RNA表面活性蛋白C無特殊病原體TAT介導(dǎo)的缺口末端標記四甲基聯(lián)苯胺螭粒重復(fù)序列擴增法末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶內(nèi)皮血管生長因子箸H篡三L|L≥一W一

簡介：乙型肝炎是由乙肝病毒HBV引發(fā)的一種高傳染性疾病，抗乙肝病毒治療是乙型肝炎治療的核心。本文在我們課題組原有工作的基礎(chǔ)上合成了兩種化合物，為以后設(shè)計合成新型抑制HBV先導(dǎo)化合物提供了原料。合成方法是在氫化鈉強堿性條件下，分別用N乙基4羥基苯甲酰胺和N，N二甲基4羥基苯甲酰胺與4苯偶氮基苯甲酰氯反應(yīng)，得到了目標產(chǎn)物4（苯偶氮基苯甲酸）4（乙胺甲?；锦ィ┖?（苯偶氮基苯甲酸）4（N，N二甲胺甲?；锦ィ?。目標產(chǎn)物都通過紅外光譜和核磁共振波譜進行了結(jié)構(gòu)鑒定。酰胺存在于多種具有生物活性的化合物及其衍生物中，因此酰胺化合物在有機化學(xué)和生物化學(xué)中占有重要地位。N芳基仲酰胺的甲醇衍生物在有機合成和藥物化學(xué)中是非常有用的中間體。本文基于N芳基酰胺中CH和N的相互作用（CHN氫鍵）發(fā)現(xiàn)了一種簡單有效的合成N芳基仲酰胺羥甲基化合物的方法。合成方法是室溫下，在碳酸鉀和四丁基溴化銨的作用下，在氯仿溶液中，分別用Α乙酰萘胺、4二甲胺基1乙酰萘胺和2苯基1乙酰苯胺與多聚甲醛反應(yīng)，得到目標產(chǎn)物N羥甲基1乙酰萘胺、N羥甲基4二甲胺基1乙酰萘胺和N羥甲基2苯基1乙酰苯胺，所有目標產(chǎn)物收率較高，并且通過紅外光譜和核磁共振波譜進行了結(jié)構(gòu)鑒定。

簡介：丙型肝炎病毒（HCV）為單股正鏈RNA病毒，感染了全世界約17億人，可導(dǎo)致慢性肝炎、肝硬化、肝癌等嚴重的肝臟疾病。以往的報道已經(jīng)證實IFNΛS能夠在體外抑制HCV的復(fù)制，但是關(guān)于具體的機制IL28A是如何進行抗病毒尚未可知，并且IL28A誘導(dǎo)基因的功能也不是全部都了解的很清楚。在本課題中，我們發(fā)現(xiàn)IL28A可以在全長復(fù)制子細胞系和病毒感染肝癌細胞系中抑制HCV復(fù)制?？梢燥@著的抑制病毒的復(fù)制、組裝、釋放等生活周期，但對病毒的入侵沒有影響。IL28A和IFNΑ誘導(dǎo)基因表達的時間點不同，IFNΑ處理較短時間，誘導(dǎo)的基因表達水平就達到頂峰。但IL28A處理較長時間后，誘導(dǎo)的基因表達水平才達到頂峰。兩種干擾素聯(lián)合使用后，對病毒的抑制水平、STATS蛋白磷酸化水平和激活基因的表達水平都比任何一種干擾素單獨使用時高。這些都說明兩種干擾素具有協(xié)同抗病毒作用。人上皮間質(zhì)相互作用蛋白1（EPSTI1），是一種IL28A誘導(dǎo)的干擾素誘導(dǎo)基因，在IL28A介導(dǎo)的抗病毒活動中起到了非常重要的作用。在沒有干擾素處理的情況下，EPSTI1的表達可以抑制病毒的復(fù)制，而沉默EPSTI1會促進病毒的增長。并且EPSTI1選擇性的抑制HCV的復(fù)制，對其它生活周期沒有顯著影響。EPSTI1能夠激活PKR的啟動子，并且誘導(dǎo)許多PKR依賴的早期ISGS的表達，如IFNΒ、IFIT1、OAS1和RNASEL。EPSTI1通過激活PKR依賴的信號途徑起到抗病毒的作用。這些結(jié)果暗示了在IL28A的抗病毒過程中EPSTI1主要通過激活PKR依賴的基因起作用。

簡介：前瞻記憶是指對將來要完成的活動和事件的記憶，是近十幾年來記憶領(lǐng)域的研究熱點之一。到目前為止，前瞻記憶的研究經(jīng)歷了三個階段在萌芽階段，F(xiàn)REUD和LEWIN等研究者在著作中提及到了前瞻記憶而沒有深入探索；在日常范式階段，研究者明確了前瞻記憶的概念，并在日常生活情景中對這種記憶加以研究。而EINSTEIN和MCDANIEL的研究開創(chuàng)了實驗室范式的階段，將前瞻記憶的研究推向了一個新的高度。前瞻記憶的研究現(xiàn)狀可以從以下幾個方面進行概括一，確定了定義、分類、加工過程等基本問題，二，提出了前瞻記憶的幾種心理機制的模型，如簡單激活模型、注意搜索模型、多重加工模型等。三，對前瞻記憶的年齡效應(yīng)進行了深入研究，提出了解釋年齡效應(yīng)的“回溯成份說”和“認知資源限制說”。四，探討了前瞻記憶的生理機制，發(fā)現(xiàn)前瞻記憶不僅涉及前額葉的多個部位的相互作用，而且還與前額葉與丘腦、顳葉內(nèi)側(cè)等多個腦區(qū)的相互作用有關(guān)。本文的四個實驗分別以年齡、認知負載、任務(wù)情境等為自變量，以前瞻記憶成績等為因變量進行了研究。實驗一對1220歲個體前瞻記憶的發(fā)展進行了研究，發(fā)現(xiàn)在這一年齡段，個體前瞻記憶呈現(xiàn)上升趨勢，且在1416歲速度最快。實驗二著重探討了認知負載對前瞻記憶雙任務(wù)影響的規(guī)律，提出了“雙任務(wù)負載對應(yīng)優(yōu)先假說”，為進一步確定前瞻記憶的心理機制提供了啟發(fā)。實驗三對比了四種不同實驗情境下被試前瞻記憶的表現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)日常情境與實驗室情境中的前瞻任務(wù)成績不能相互印證，由此引發(fā)對實驗室范式的生態(tài)效度的思考。實驗四使用以連貫的文字材料制作的前瞻記憶任務(wù)，對19至48歲被試的前瞻記憶進行了研究，發(fā)現(xiàn)在實驗室條件下，1930歲被試前瞻記憶成績高于3148歲的被試，但在日常條件下則相反。實驗四的后續(xù)研究通過改變當前任務(wù)的負載，進一步為“雙任務(wù)負載對應(yīng)優(yōu)先假說”提供了佐證。另外，四個實驗還對延時、焦慮、前瞻記憶與回溯記憶的關(guān)系等進行了研究。最后，論文對前瞻記憶的理論與實驗進行了總結(jié)。認為未來前瞻記憶研究發(fā)展的趨勢是進一步發(fā)展和完善研究方法、重視前瞻記憶研究與日常生活實際的結(jié)合、加強前瞻記憶的神經(jīng)心理學(xué)研究。

簡介：目的本研究以8位學(xué)習分心學(xué)生為研究對象，驗證元認知干預(yù)技術(shù)對高中生學(xué)習分心的干預(yù)的有效性。探討高中生學(xué)習分心問題的心理機制、治療效果、治療時間等問題，為學(xué)生學(xué)習分心問題的解決提供借鑒，也為學(xué)校心理健康教育探索一條新道路。方法選取某重點高中8位存在學(xué)習分心問題的學(xué)生作為被試進行元認知干預(yù)技術(shù)的干預(yù)，采用少量被試多基線實驗設(shè)計進行研究。運用中學(xué)生學(xué)習行為障礙問卷中學(xué)習分心因子和學(xué)習低效因子分、癥狀自評量表中焦慮因子以及學(xué)習狀態(tài)滿意度自我評價作為干預(yù)有效性的標準。實驗設(shè)計中使用學(xué)習分心頻率、分心持續(xù)時間作為多基線實驗設(shè)計的指標。結(jié)果干預(yù)結(jié)束后8位被試在中學(xué)生學(xué)習行為障礙問卷中學(xué)習分心與學(xué)習低效因子分降至臨界值以下，癥狀自評量表焦慮因子得分低于劃界標準。多基線圖顯示，被試學(xué)習分心持續(xù)時間與發(fā)生頻率均明顯下降，學(xué)習狀態(tài)滿意度大幅度提高。在咨詢結(jié)束后的3次回訪中，所有被試均無復(fù)發(fā)。結(jié)論高中生學(xué)習分心問題是消極的條件性情緒反應(yīng)為主導(dǎo)因素，結(jié)合消極自我認知評價過程的惡性循環(huán)。元認知干預(yù)技術(shù)對高中生學(xué)習分心進而導(dǎo)致的學(xué)習低效的干預(yù)效果明顯，并且有效的降低來訪者的焦慮情緒在干預(yù)后1個月、3個月、6個月的3次回訪中，8位來訪者均無復(fù)發(fā)跡象。可證明元認知干預(yù)技術(shù)對高中生學(xué)習分心問題干預(yù)的有效性。

簡介：Y1407275分類號R373密級學(xué)位類別科學(xué)學(xué)位∥專業(yè)學(xué)位口學(xué)校代碼學(xué)號L006220052019夭湃醬耕六垮TIANJINMEDICALUHLVERSLLL碩士學(xué)位論文MASTER’SDISSERL7ATL0N論文題目副粘病毒TIANJIN株NP基因的表達及在兒童下呼吸道感染檢測中的應(yīng)用TITLEEXPRESSIONOFPARAMYXOVIRUSTIANJINSTRAINNUCLEOCAPSIDPROTEINANDAPPLICATIONINCLINICALDETECTIONFORCHILDRENWITHLOWERRESPIRATORYINFECTION一級學(xué)科基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)二級學(xué)科病原生物學(xué)論文作者王卿指導(dǎo)教師李梅副教授天津醫(yī)科大學(xué)研究生院二00／K年五月天津醫(yī)科人學(xué)碩士研究生畢業(yè)論文無明顯反應(yīng)性；NPL和NP3抗血清與副流感病毒I、III型，NDV呈陽性反應(yīng)，NP2抗血清僅與副流感病毒III型呈陽性反應(yīng)；而副粘病毒TIANIIN株鼠多克隆抗血清與除肺炎支原體以外的上述病原體均有交叉反應(yīng)。由于重組蛋白比全病毒抗原易獲得、更安全、有利于提高特異性和敏感性，以重組蛋白NPL、NP2和NP3為抗原檢測抗體，比全病毒抗原更有優(yōu)勢。3全病毒抗原ELISA法檢測186例患兒血清標本IGG、IGM的陽性率分別是3065％和1989％；重組蛋白NPL、NP2和NP3為抗原，IGG陽性率分別為2419％、2204％、2097％；IGM陽性率分別為1882％、1667％、1560％。重組蛋白ELISA法比全病毒抗原ELISA法有特異性更好的趨勢。4獲得了一株穩(wěn)定分泌NP2MCAB的細胞株G189D5。該細胞株培養(yǎng)上清液與NPL和NP3不結(jié)合，說明這株MCAB的抗原識別位點在NP蛋白AA202AA324范圍內(nèi)。MCABG189D5與常見下呼吸道感染病原體沒有交叉反應(yīng)，特異性好。為進一步研究病毒蛋白結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系及致病機制，建立快速、敏感、特異的檢測副粘病毒TI姐JIN株的方法奠定了基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞副粘病毒TIANJIN株；仙臺病毒；核衣殼蛋白基因表達；免疫反應(yīng)性；單克隆抗體；

簡介：背景目前，有關(guān)歸因風格與主觀幸福感關(guān)系的研究大部分還僅涉及外顯的測量，一般都是采用自陳量表做問卷調(diào)查，然后再進行相關(guān)分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，外顯歸因風格和外顯主觀幸福感的相關(guān)顯著。近20年，關(guān)于內(nèi)隱社會認知的研究迅速興起，從生理基礎(chǔ)到理論框架，從研究方法到研究內(nèi)容，都得到了發(fā)展。已有研究者對內(nèi)隱歸因風格和內(nèi)隱主觀幸福感進行了探索性的研究，但此二者之間關(guān)系的研究還未曾見到。目的本研究旨在應(yīng)用外顯和內(nèi)隱的兩種測量手段，驗證大學(xué)生歸因風格和主觀幸福感的雙重結(jié)構(gòu)模型，探討外顯和內(nèi)隱歸因風格與外顯和內(nèi)隱主觀幸福感的關(guān)系。方法1研究對象為119名大學(xué)生，其中男生40人，女生79人，18至25周歲，身體健康，具備一定的計算機操作能力，視力或矯正視力正常，此前未參加過類似的實驗。2外顯歸因風格測量的研究工具選用多維度多歸因因果量表，外顯主觀幸福感測量選用幸福感指數(shù)量表、情感平衡量表和總體生活滿意度量表，內(nèi)隱歸因風格和內(nèi)隱主觀幸福感測量選用內(nèi)隱聯(lián)想測驗。3采用SPSS170FWINDOWS對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計處理，主要采用T檢驗，相關(guān)分析和回歸分析等方法。顯著性水平選定為005Α005。結(jié)果1在外顯歸因風格方面，性別不同的被試在內(nèi)外傾性上有顯著的差異，男生更傾向于歸因于內(nèi)，女生更傾向于歸因于外；無論成功或失敗，被試都更多的做出內(nèi)歸因，而較少的外歸因，差異達到了顯著性水平。2內(nèi)隱歸因風格的性別差異不顯著，都更傾向于將成功歸因于內(nèi)，將失敗歸因于外；被試對成功事件更多的做內(nèi)歸因，而把失敗事件更多的歸因于外，差異達到了顯著性水平。3外顯和內(nèi)隱歸因風格部分維度之間負相關(guān)，部分不相關(guān)。4外顯和內(nèi)隱主觀幸福感的性別差異都不顯著；各維度之間的相關(guān)均不顯著。5外顯歸因風格與外顯主觀幸福感顯著相關(guān)；外顯歸因風格與內(nèi)隱主觀幸福感相關(guān)不顯著；內(nèi)隱歸因風格與外顯主觀幸福感部分維度之間相關(guān)；內(nèi)隱歸因風格與內(nèi)隱主觀幸福感顯著正相關(guān)。6外顯歸因風格可以預(yù)測外顯主觀幸福感，內(nèi)隱歸因風格可以預(yù)測外顯主觀幸福感和內(nèi)隱主觀幸福感。結(jié)論1大學(xué)生歸因風格的結(jié)構(gòu)是雙重的，存在外顯歸因風格和內(nèi)隱歸因風格兩種成分。2大學(xué)生主觀幸福感的結(jié)構(gòu)是雙重的，存在外顯主觀幸福感和內(nèi)隱主觀幸福感兩種成分。3外顯歸因風格可以預(yù)測外顯主觀幸福感，內(nèi)隱歸因風格可以預(yù)測外顯主觀幸福感和內(nèi)隱主觀幸福感。

簡介：目錄中英文縮略詞匯表1中文摘要2英文摘要4引言8正文101實驗材料與方法1111實驗材料1112實驗方法1113分組及給藥劑量1314取材1415WESTERNBLOT檢測大鼠海馬TAU蛋白異常磷酸化1416E1ISA法檢測蛋白質(zhì)磷酸酶2APP2A和糖原合酶激酶3DGSK3D的活性162統(tǒng)計學(xué)處理173結(jié)果1731大鼠行為觀察及評價1732WESTERNBLOT檢測大鼠海馬TAU蛋白異常磷酸化結(jié)果1933E1ISA法檢測蛋白質(zhì)磷酸酶2APP2A和糖原合酶激酶3GSK3D的活性204討論2141現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對TAU蛋白在AD中的主要相關(guān)研究2142祖國醫(yī)學(xué)對AD的認識及溫脾通絡(luò)開竅方組方原理2243AD大鼠模型及MWM實驗2544溫脾通絡(luò)開竅方對AD大鼠的認知行為的影響2645溫脾通絡(luò)開竅方對AD大鼠TAU蛋白、GSK3D、PP2A的影響及相關(guān)中英文縮略詞匯表英文簡稱英文全稱中文全稱ADALZHEIMER，SDISEASE老年性癡呆OAOKADAICACID岡田酸PP2APROTEINPHOSPHATASETYPE2A蛋白磷酸酶2AGSK313GLYCOGENSYNTHASEKINASE糖原合酶激酶一3PNFTNEUROFIBRILLARYTANGLE神經(jīng)元纖維纏結(jié)PⅢSPAIREDHELICALFILAMENTS雙螺旋纖維絲SPSENILEPLAQUES老年斑PMSFPHENYLMETHANESULFONYLFLUORIDE苯甲基磺酰氟MWMMORRISWATERMAZETESTMORRIS水迷宮1

簡介：自閉癥譜系障礙（ASD）是一種以社會交流障礙、興趣范圍狹窄、刻板重復(fù)行為為基本特征的神經(jīng)發(fā)育障礙，社會交流障礙是該譜系障礙的核心癥狀，而社會認知障礙被認為是社會交流障礙的原因之一。眾多研究表明ASD兒童的社會認知與普通兒童相比存在“質(zhì)”的差異或缺陷，過去研究通過ASD個體對社交信息的注意側(cè)面了解其社會認知特點，并未進一步探究社交信息注意如何預(yù)測社會認知。圖畫書是幼兒主要閱讀材料，ASD兒童對圖畫書中的社交信息注意表現(xiàn)如何與圖畫故事理解會有怎樣的關(guān)系圖畫所在的背景又是如何影響社交信息注意及故事理解呢本研究選擇7～12歲的ASD兒童，及與其智力相匹配的5～6歲的正常兒童，考察被試在圖畫書閱讀中的社交信息注意及故事理解特點，進一步探究影響ASD兒童故事理解的因素及不同圖畫背景類型中ASD兒童圖畫書社交信息注意及故事理解的特點。實驗一試圖探究ASD兒童圖畫書閱讀中的社交信息注意及故事理解的特點，進一步考察ASD自閉癥癥狀、社交信息注意與故事理解之間的關(guān)系。實驗二在實驗一的基礎(chǔ)上，通過控制圖畫書呈現(xiàn)的背景，探究與圖畫伴隨出現(xiàn)的背景對ASD圖畫書閱讀及理解的影響。結(jié)果顯示（1）ASD兒童圖畫書閱讀中社交信息注意及故事理解與普通兒童存在顯著差異，相對于正常兒童，ASD兒童覺察關(guān)鍵社交信息的時間更長，維持時間更短，圖畫故事理解能力發(fā)展也顯著滯后于正常兒童，說明其社會認知存在缺陷。（2）ASD兒童的社交障礙程度、對人物形象、關(guān)鍵物體、手部的注意是影響故事理解的重要因素。（3）ASD兒童在背景信息“弱”條件下，對人物形象的注視時間較長，對關(guān)鍵物體、事件行動、心理狀態(tài)、整體故事的理解情況較好。因此，背景信息“弱”的圖畫書可以作為社會認知能力教育干預(yù)的材料之一。