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文檔簡介
1、接骨草屬于忍冬科接骨木屬,接骨草的根、莖、葉、花及果實均可入藥。在傳統(tǒng)中醫(yī)藥中,它可治療風濕疼痛、跌打損傷和骨折。目前關于接骨草防治骨質疏松和促進成骨的報道較多,但其促進成骨及骨折愈合的有效成分尚不清楚。本研究以接骨草的主要化學成分之一——綠原酸(chlorogenicacid,CGA)為研究對象,研究其對體外培養(yǎng)的成骨細胞活性的影響,以期闡明其是否具有成骨活性,為接骨草的臨床應用提供理論依據。
本研究以成骨細胞系MC3T3-
2、E1為模型,用MTT法檢測CGA對成骨細胞增殖的影響、用堿性磷酸酶試劑盒檢測CGA對成骨細胞ALP活性的影響,并用實時熒光定量PCR技術檢測CGA對成骨細胞成骨相關基因表達的影響。
MTT實驗結果表明,11.02~88.19μmol/L的CGA對成骨細胞的增殖均具有明顯的促進作用,因此,本研究以22.05和44.09μmol/L兩個濃度的CGA進行進一步研究。
CGA對成骨細胞ALP活性的影響的結果表明,CGA長期處
3、理(6天)具有抑制成骨細胞ALP活性的作用。
實時熒光定量PCR結果顯示,在整個培養(yǎng)過程中,CGA可以促進Col-1、OCN、BMP-2基因的表達。CGA短期處理細胞(2天)可以促進Jun-D、c-Jun、c-fos,Fra-1,Fra-2,ALP,Runx2,Osterix等基因的表達;CGA長期處理細胞(6天)可以促進BSP,OPN基因的表達。
綜上所述,CGA具有調控成骨細胞增殖和分化的能力,對成骨細胞前體的分
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