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文檔簡介
1、類彈性蛋白是一類人工設計合成的蛋白多肽,具有良好的生物相容性,低免疫源性等生物學性能,并且廣泛用于蛋白質的分離純化以及藥物緩釋。本課題基于本實驗室設計合成的疏水性類彈性蛋白ELP的基礎上,設計合成了一段親水性的類人膠原蛋白多肽CLP,并通過酶切連接構建出了不同長度的類人膠原蛋白多肽基因CLPn。將單倍體CLP1與三倍體CLP3分別與類彈性蛋白ELP進性無縫拼接,最終得到了疏水性與親水性片段占有不同比例的復合蛋白ELP-CLP1與ELP-
2、CLP3基因,并通過連接表達載體轉入大腸桿菌表達菌表達復合蛋白ELP-CLP1、ELP-CLP3。利用ELP的相變性質對復合蛋白進行純化。實驗結果表明疏水性類彈性蛋白片段與親水性膠原蛋白片段比為1∶1時,復合蛋白ELP-CLP1自組裝結構為直徑約1μm左右的微球結構,疏水性類彈性蛋白片段與親水性膠原蛋白片段比為1∶3時,復合蛋白ELP-CLP3自組裝結構為立體相互連接的疏松網狀結構。這些自組裝結構都受到溫度、pH等因素的影響。此外,將超
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