星形膠質(zhì)細胞在帕金森病神經(jīng)元鐵代謝紊亂中的調(diào)節(jié)作用研究.pdf

1、分類號：Q42密級：1E密UDC610JlllJMIIIJlltlIdlIIMIJJlPlllIIIIJdllll學飛蜘必wF28144耳j”№44駕是大學博士學位論文星形膠質(zhì)細胞在帕金森病神經(jīng)元鐵代謝紊亂中的調(diào)節(jié)作用研究指導教師學科專業(yè)名稱論文提交日期論文答辯日期答辯委員會主席張皓云謝俊霞教授生理堂一20131007楊雄里院士出現(xiàn)明顯的衰減，且100州組減弱較101xM組明顯。再給予鐵離子螯合劑1mMDFO灌注后，10州、100州6O

2、HDA處理組細胞內(nèi)熒光增強均較對照組明顯。說明6OHDA處理后星形膠質(zhì)細胞鐵轉(zhuǎn)運效率增加。2原代培養(yǎng)星形膠質(zhì)細胞在10gM、100lxM6OHDA處理24h后，DMTIIRE蛋白表達升高，分別約為對照組的151倍及195倍，且10“M組與100洲組相比差別有統(tǒng)計學意義。鐵轉(zhuǎn)出蛋白FPNl蛋白表達也較對照組升高，升高幅度分別為40％、29％。免疫熒光雙重標記技術(shù)檢測到6OHDA處理24h后星形膠質(zhì)細胞內(nèi)DMTIIRE表達增強，呈顆粒狀分布

3、于胞核、胞漿；FPNl表達同樣增強，主要分布在胞體及突起。與蛋白水平的變化一致，10gM、100gM6OHDA處理24h后，星形膠質(zhì)細胞中DMTIIREmRNA的表達升高，分別約為對照組的19倍及3倍，且10gM組與100gM組相比差別有統(tǒng)計學意義。FPNlmRNA的表達同樣升高，分別約為對照組的18倍及27倍，且10gM組與100lxM組間差別有統(tǒng)計學意義。3鐵調(diào)節(jié)蛋白1(ironregulatoryprotein1，IRPl)蛋白表

4、達隨6OHDA處理時間呈動態(tài)改變，6OHDA處理12h可見IRPl表達顯著升高，10“M，100lxM6OHDA組分別為對照組的152及131倍。然而隨6OHDA作用時間延長，24hIRPl表達反而低于正常水平，分別為對照組的69％、79％。但10洲組與100lxM組兩組間沒有顯著性差異。410gM、100uM6OHDA處理05h后，星形膠質(zhì)細胞內(nèi)核因子nB(nuclearfactorrBNFxB)p65亞基磷酸化增強，并出現(xiàn)明顯的核移

5、位。IvB抑制劑BAYll7082(5Ⅲ)預處理05h可有效抑制6OHDA誘導的NFvBp65亞基磷酸化。6OHDA處理24h仍可見細胞核內(nèi)磷酸化NFKBp65表達較對照組升高。5LLMBAYll7082預處理O5h后與10gM、100gM6OHDA共同孵育24h，可阻斷6OHDA誘導的星形膠質(zhì)細胞內(nèi)DMTIIRE蛋白表達升高，提示6OHDA誘導的DMTl上調(diào)與NFrd3p65磷酸化有關。510“M、100“M6OHDA處理后6h，星形

6、膠質(zhì)細胞內(nèi)BDNF、GDNFmRNA的表達迅速到達高峰，其中10gM6OHDA處理組BDNFmRNA在6h時為對照組的34倍，100pM組為對照組的24倍；12h時分別為對照組的19倍及16倍，24h與對照組差異無顯著性。GDNFmRNA在6OHDA處理6h時10gM組為對照組的33倍，100gM組為對照組的51倍；12h時分別為對照組的15倍及19倍，24h分別為對照組的18倍、21倍。這些結(jié)果提示，在6OHDA誘導的氧化應激狀態(tài)下星