青島沿海四株大型海藻代謝產(chǎn)物及其生物活性篩選的研究.pdf

1、海洋生物具有產(chǎn)生豐富多樣的次生代謝產(chǎn)物的能力，其結構新穎、生物活性獨特，引起了國內外科學家的高度重視。植物病原菌對農業(yè)生產(chǎn)的嚴重威脅，化學農藥的殘留問題嚴重、開發(fā)費用過高，以及海洋細菌對海洋設備的污損問題，都亟待解決。因此找尋環(huán)境友好型的新型農藥和天然防污材料的模板化合物是當今刻不容緩的研究課題。
　　海黍子(Sagassum kjellmanianum)、鼠尾藻(Sargassum thunbergii)、酸藻(Desmares

2、tia viridis)和扇形擬伊藻(Ahnfehiopsis flabelliformi)是青島沿海四種常見海藻，本論文通過對這四種海藻的化學和生物篩選來展開研究，以期獲得環(huán)境友好型農藥和防污材料。
　　干燥并粉碎四株大型海藻樣品，分別運用有機溶劑提取、萃取、梯度洗脫、薄板層析等手法，對所選的四株大型海藻進行了初步的提取分離，然后運用高效液相色譜儀(HPLC)對其粗提物的各梯度洗脫組分進行分析；并以5株農業(yè)病原菌和4株海洋細菌作

3、為供試菌株對其不同極性組分的代謝產(chǎn)物進行初步的抑菌活性篩選，發(fā)現(xiàn)海黍子為優(yōu)勢藻種，次級代謝產(chǎn)物豐富、抑菌活性較好。并以海黍子為研究對象，進行次級代謝產(chǎn)物的分離純化。主要結論如下：
　　1.四種海藻的篩選：將在青島沿海采集到的海黍子、鼠尾藻、酸藻和扇形擬伊藻四種大型海藻的干燥藻體粉碎，分別使用乙醇浸提、超聲提取后，濾液蒸干得浸膏，獲得的乙酸乙酯相進行柱層析梯度洗脫。對每種藻體得到的各洗脫組分進行HPLC分析和初步的抑菌活性篩選。篩選

4、結果表明：海黍子化合物豐富度高于其它三種海藻。抑菌活性實驗中，在抑制農業(yè)病原菌活性方面，四株海藻的各梯度洗脫組分對五株植物病原真菌(陽性對照為兩性霉素B)均能產(chǎn)生一定的抑制效果，海黍子表現(xiàn)出了較好的抑制活性，其中Fr2對小麥赤霉菌(XC)以及番茄早疫菌(FZ)的抑制效果最強，抑菌圈分別為11.4mm和11.3mm(陽性對照分別為14.0mm和15.5mm)；在抑制海洋細菌(陽性對照為氯霉素)活性方面，四種海藻也均表現(xiàn)出了一定的抑制活性，

5、其中也以海黍子抑菌活性最明顯，F(xiàn)r4對金黃色葡萄球菌(SA)的抑菌圈直徑達17.5mm(陽性對照為22.5mm)，F(xiàn)r2和Fr4對蘇云金芽孢桿菌(BT)的抑菌圈直徑分別達19.5mm和20.7mm(陽性對照為24.0mm)。另外，四株海藻中以海黍子生物量最大，采集較方便。綜合以上考慮，選擇海黍子作為后續(xù)研究對象。
　　2.海黍子次級代謝產(chǎn)物和初步的抑菌活性研究：干燥并粉碎的海黍子，經(jīng)過溶劑浸取、萃取，制成浸膏后，以常規(guī)的硅膠柱層析

6、、凝膠Sephadex LH-20柱層析、制備薄層層析(pTLC)以及重結晶等分離手段，分離純化得到單體化合物。綜合利用各種現(xiàn)代波譜技術以及與標準品和文獻數(shù)據(jù)比對的方法，進行化合物及結構鑒定。在分離純化過程中，共獲得5個單體化合物，均為首次從該藻種中獲得。運用1H-NMR、13C-NMR、DEPT等現(xiàn)代波譜學技術，鑒定出其中3個化合物的結構。對海黍子17個梯度洗脫組分進行了抑菌活性測定，得到的結論與初次篩選實驗中基本保持一致。對5個單體