測定巰基類化合物的熒光探針的合成及應(yīng)用研究.pdf

1、巰基化合物是生物體中許多蛋白質(zhì)和小分子的重要組成部分，在細(xì)胞抗氧化系統(tǒng)中具有重要的作用。細(xì)胞內(nèi)巰基化合物(包括半胱氨酸、高半胱氨酸和還原型谷胱甘肽等)在維持生命體系的氧化還原動(dòng)態(tài)平衡方面起著重要的作用，它們是與酶活性有關(guān)的最具有反應(yīng)性的官能團(tuán)，并且在酶代謝過程中起著重要的作用。體內(nèi)某些巰基化合物水平的高低與很多疾病密切相關(guān)，如：癌癥、老年癡呆癥和心血管疾病等。熒光分析法因其具有靈敏度高、選擇性好、動(dòng)態(tài)響應(yīng)范圍寬及易于進(jìn)行原位分析等優(yōu)點(diǎn)而

2、在生物分子檢測中受到人們的廣泛關(guān)注。因此設(shè)計(jì)合成具有選擇性好、靈敏度高、可用于實(shí)時(shí)檢測巰基化合物的熒光探針成為一個(gè)十分活躍的研究方向。 文獻(xiàn)報(bào)道硝基是強(qiáng)吸電子基團(tuán)，它能有效的活化苯磺酸酯中的C—S鍵，使其與親核試劑發(fā)生反應(yīng)。基于上述原理，本論文設(shè)計(jì)合成了檢測巰基化合物的熒光探針，并對其機(jī)理做了初步的探討。具體研究內(nèi)容如下： 首先，利用2,4—二硝基苯磺酰氯與熒光素反應(yīng)合成了熒光探針熒光素-2,4—二硝基苯磺酸酯(Ⅰ)，并

3、開發(fā)了一種檢測硫離子的新型化學(xué)劑量計(jì)(chemdosimeter)。硫離子作為親核試劑可使熒光探針Ⅰ中的C—S鍵發(fā)生斷裂，釋放出強(qiáng)熒光物質(zhì)熒光素，從而導(dǎo)致體系的吸光度值和熒光強(qiáng)度均顯著增強(qiáng)，且熒光強(qiáng)度與硫離子濃度在一定的范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，當(dāng)向Ⅰ的溶液中加入硫離子后，溶液的顏色由淺黃色變?yōu)辄S綠色，因此利用該探針可實(shí)現(xiàn)對硫離子的裸眼分辨。硫普羅寧中的巰基作為親核試劑與熒光探針Ⅰ發(fā)生親核反應(yīng)，生成強(qiáng)熒光物質(zhì)熒光素，導(dǎo)致體系的吸光

4、度和熒光強(qiáng)度均顯著增強(qiáng)。該探針己被成功的用于硫普羅寧的藥物分析中。其次，以四甲基傘形酮為母體設(shè)計(jì)合成了一系列苯磺酸酯類化合物(4—MUDNBS、4—MUNBS和4—MUTS)，并將熒光探針4—MUDNBS(Ⅱ)用于藥物中卡托普利含量的分析測定。實(shí)驗(yàn)中，我們研究了該探針分子中苯磺?；糠值娜〈鶎晒馓结橅憫?yīng)特性的影響，結(jié)果表明強(qiáng)吸電子性的硝基有利于親核反應(yīng)的發(fā)生。實(shí)驗(yàn)中利用新魚腥草素鈉在堿性條件下可分解生成十二酰乙醛和Na2SO3，SO