橄欖苦苷對破骨細胞分化以及骨吸收功能的影響.pdf

1、骨質疏松、腫瘤骨轉移、人工關節(jié)假體的無菌性松動等疾病是常見的骨破壞相關疾病。在人體內破骨細胞是唯一具有骨吸收功能的細胞，所以靶向性抑制破骨細胞的分化形成是預防和治療這類疾病最重要的方向。然而對于治療這類疾病的手段和藥物，目前可供種類比較缺乏，副作用也比較明顯。由此可見，開發(fā)對破骨細胞具有靶向性和對人體副作用更輕微的治療藥物迫在眉睫。天然植物化學提取物具有相對有效、副作用小的功效，為治療骨破壞相關疾病提供了創(chuàng)新的思路。橄欖苦苷(oleur

2、opein，Ole)是橄欖油提取物中一種主要的酚類化合物，具有多用途的藥理作用,如治療動脈粥樣硬化、抗氧化、抗炎等作用。研究報道橄欖苦苷能夠促進骨髓間充質干細胞分化成骨分化，但抑制成脂分化，可是在但橄欖苦苷對破骨細胞的影響及分子機制尚不明確。本實驗主要研究橄欖苦苷對破骨細胞分化、骨吸收功能及相關信號通路的影響。本實驗采取了抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase，TRAP)染色、凋亡實驗

3、、骨片實驗、Western blot等研究方法。把不同濃度的橄欖苦苷（12.5、25、50μmol/L）分別加入由核因子κB受體活化因子配體(receptoractivator of nuclear factor kappa B ligand，RANKL)誘導的體外破骨細胞培養(yǎng)體系中，用TRAP染色方法觀察呈TRAP陽性的多核細胞；RAW264.7細胞也用RANKL誘導，用流式細胞儀分析橄欖苦苷對破骨細胞凋亡的影響；在掃描電鏡（scan

4、ning electron microscope，SEM）下觀察骨吸收陷窩，并用圖像分析軟件統(tǒng)計其面積。采用Western blot法檢測橄欖苦苷對破骨細胞特異性蛋白組織蛋白酶 K(cathepsin K，CTSK)、激活 T細胞核因子1(nuclear factor of activated T-cells1，NFATC1)及相關信號通路蛋白表達的影響。TRAP染色結果顯示，橄欖苦苷能顯著抑制RANKL誘導的破骨細胞的形成，且呈濃度依