黑果枸杞多糖的分離純化及抗氧化活性研究.pdf

1、黑果枸杞作為一種天然果實，有“軟黃金”之稱。國內(nèi)外大量實驗研究發(fā)現(xiàn)，黑果枸杞對機體有一定的保健效能，備受人們的關注。本論文用青海省黑果枸杞的干果為原料，通過超聲波輔助法提取黑果枸杞多糖，并對黑果枸杞粗多糖進行純化，進而對純化后的黑果枸杞多糖進行初步結構表征以及抗氧化活性的研究。
　　1.超聲波法提取黑果枸杞多糖。研究用料液比、超聲波功率、提取溫度、提取時間作為單因素，并用正交試驗優(yōu)化提取工藝。結果表明最適宜的提取條件是料液比是1:

2、20(g/mL)、超聲波功率是150w、提取溫度是70℃、提取時間是30min。此條件下的粗多糖得率為10.74％。
　　2.黑果枸杞多糖的純化。黑果枸杞粗多糖經(jīng)三氯乙酸脫蛋白后，依次采用超濾、大孔樹脂吸附、聚酰胺層析、分級沉淀、DEAE-52纖維素洗脫及流水透析進行純化，再次通過DEAE-52纖維素柱來洗脫以及制備型高效液進一步對多糖進行分離純化。結果表明：經(jīng)分級沉淀后，黑果枸杞多糖由LPR-60、LPR-70、LPR-80、L

3、PR-90四種多糖組成，含量分別為69.27%、76.07%、78.11%、74.43%。用DEAE-52纖維素柱去對其洗脫后，與制備型高效液相結果相差甚微，研究結果表明，黑果枸杞多糖由LPR-80-1、LPR-80-2、LPR-80-3和LPR-80-4四種多糖組成，含量分別為76.68%、78.59%、78.54%和77.43%。選擇多糖組分LPR-80-2做后續(xù)的研究。
　　3.黑果枸杞多糖的初步結構表征。通過紫外光譜、紅外

4、光譜、毛細管電泳、掃描電鏡、原子力顯微鏡、質(zhì)譜對多糖組分LPR-80-2的結構進行初步研究。結果表明：UV檢測顯示其多糖組分在260-280nm的范圍內(nèi)并沒有明顯的吸收，表明該多糖樣品不含蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子；紅外光譜分析表明黑果枸杞多糖含多糖的特征吸收峰，且含有吡喃環(huán)結構；而毛細管電泳結果發(fā)現(xiàn)，該多糖組分由鼠李糖、阿拉伯糖、葡糖糖及半乳糖4種單糖組成。其組成摩爾比為：Rha:Ara:Glc:Gal=0.3:2.2:1.0:1.5；

5、原子力顯微鏡掃描顯示該多糖分子分子間排列緊密，呈圓圈狀堆積結構；掃描電鏡顯示其呈現(xiàn)表面粗糙的片狀聚集結構。
　　4.黑果枸杞多糖的抗氧化。研究以DPPH·、OH·和O2-·為體外抗氧化指標，對比黑果枸杞粗多糖及精制多糖的抗氧化活性，實驗結果發(fā)現(xiàn)，黑果枸杞多糖粗品和和精制樣品均具有清除自由基的能力，具有一定的抗氧化活性，且精制多糖樣品的清除自由基能力略高于粗多糖，而且根據(jù)濃度的增大，抑制自由基的作用效果也隨之加強，研究還發(fā)現(xiàn)，多糖樣