新型溫敏性水凝膠培養(yǎng)系統(tǒng)的構(gòu)建及BMSCs膜片培養(yǎng)與分離的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：
　　通過生物仿生的方式制備溫敏性水凝膠培養(yǎng)系統(tǒng)，探索BMSCs膜片培養(yǎng)與分離的最佳條件，為生物組織工程的構(gòu)建提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　方法：
　　1）將2g/L多巴胺（dopamine,DA）溶液加入聚苯乙烯培養(yǎng)皿（tissue culture polystyrene,TCPS）中，在60℃下，使DA自聚合生成聚多巴胺（polydopamine,PDA）薄膜覆蓋于培養(yǎng)皿表面，堿溶液氧化后，將末端氨基化的聚異丙基丙烯酰

2、胺（PNIPAM-NH2）接枝到聚多巴胺表面，形成溫敏性培養(yǎng)系統(tǒng)。采用傅里葉轉(zhuǎn)換紅外光譜分析儀（FTIR）、掃描電子顯微鏡（SEM）及接觸角測試儀對化學(xué)鍵、表面形貌及潤濕性進(jìn)行表征。
　　2）在水凝膠溫敏培養(yǎng)系統(tǒng)中接種兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）,置于37℃，5％CO2孵箱培養(yǎng)構(gòu)建BMSCs膜片，并于20℃下分離，獲得BMSCs膜片。通過倒置相差顯微鏡，MTT（噻唑藍(lán)）法研究BMSCs膜片的生長條件及特性，以及細(xì)胞膜片分離的條

3、件和結(jié)構(gòu)。
　　結(jié)果與結(jié)論：
　　1）FTIR結(jié)果顯示聚苯乙烯表面出現(xiàn)聚多巴胺及PNIPAM的特征吸收峰；SEM可見顆粒狀PNIPAM凝膠接枝于聚苯乙烯上；接觸角測試結(jié)果顯示，當(dāng)溫度為37℃時(shí)，呈現(xiàn)相對疏水性，當(dāng)溫度為20℃時(shí)，呈現(xiàn)相對親水性。因此成功地構(gòu)建了接枝有PNIPAM水凝膠的培養(yǎng)系統(tǒng)。
　　2）MTT結(jié)果顯示，溫敏性水凝膠培養(yǎng)系統(tǒng)中細(xì)胞存活率均大于對照組（普通TCPS培養(yǎng)皿）細(xì)胞存活率（100%），材料毒性分

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