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文檔簡介
1、該文建立了HPLC方法提純、分析、檢測鯽魚卵黃蛋白原(VTG)的分析方法,其檢測下限為25μg/ml.經(jīng)SDS-PAGE凝膠電泳測定鯽魚VTG分子量為160Kda左右.并將提純的VTG經(jīng)冷凍干燥后作為抗原,制備鯽魚VTG的多克隆抗體,建立了測定鯽魚VTG的ELISA分析方法,其檢測下限為10ng/ml.在HPLC方法分析VTG的基礎(chǔ)上,對天津地區(qū)北京排污河中的野生鯽魚和天津永定新河附近養(yǎng)殖鯽魚血漿中進行檢測.在所捕獲的12條野生鯽魚中(
2、其中兩條為雄性鯽魚),其血漿中均檢測出VTG,其濃度范圍為0.284-5.971mg/ml;對同期捕獲的35條養(yǎng)殖鯽魚(1條雄性鯽魚)也進行了檢測,同樣也檢測到VTG,濃度范圍為0.119-0.250mg/ml.而同期在實驗室飼養(yǎng)的雌雄鯽魚血漿中,HPLC方法均未檢測出VTG.同時對野生鯽魚的肝、性腺組織做組織切片,經(jīng)不同染色方式染色觀察,該時期大部分雌魚性腺發(fā)育處于Ⅵ期;肝出現(xiàn)空泡化病變,并且雌雄魚的病變比率明顯不同;免疫組化定位可見
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