麻瘋樹苯丙氨酸解氨酶jatrophacurcasl.phenylalanineammonialyase基因的克隆及功能研究

1、Y1 2 1 2 1 2 7題 目四川大學碩士學位論文作者 張淑文培養(yǎng)單位 生全疊堂堂墮指導教師 盆童型童邀專 業(yè) 墊塹堂研究方向 蕉塑壘直壘塹魚生塑墊盔授予學位E t 期 主 旦 旦。池’：水必四川大學碩士學位論文麻瘋樹苯丙氨酸解氨酶( J a t r o p h a c u r c a sL ．p h e n y l a l a n i n ea m m o n i a —l y a s e ) 基因的克隆及功能研究植物學專業(yè)研究生

2、：張淑文 指導老師：徐鶯副教授苯丙氨酸解氨酶( p h e n y l a l a n i n ea m m o n i a - l y a s e ，P A L ) 是苯丙烷類代謝途徑的關鍵酶，催化苯丙氨酸轉化為肉桂酸，促進黃酮、香豆素等次生代謝物的生成。麻瘋樹的這些次生代謝物具有多種生物學活性，具有廣闊的運用前景。從麻瘋樹( J a t r o p h a c u r c a sL ．) 葉片中應用R T —P C R 和R A C

3、 E 技術獲得麻瘋樹P A L 基因e D N A 全序列，命名為J c , o A L ，登陸G e n e b a n k 的序列號為D Q 8 8 3 8 0 5 。序列分析表明：該c D N A 全長2 3 3 6 b p ，從第4 6b p 開始至f J 2 1 8 7b p 為開放閱讀框，編碼一個含7 1 3個氨基酸的蛋白質(zhì)。多序列比對分析顯示- ，∥舭的氨基酸序列與多種植物苯丙氨酸解氨酶的氨基酸序列有一定的同源性，其中與同

4、科植物木薯的同源性最高，達至J J 9 6 ％。通過生物信息學分析，發(fā)現(xiàn)如覷￡推測蛋白質(zhì)的分子量約為7 7 k D a ，等電點為6 ．5 9 ，可能組成四個單體的聚合物。其單體的三維結構與歐芹的P A L 非常相似。獲得的J c P A L 部分基因組序列顯示，麻瘋樹苯丙氨酸解氨酶D N A 序列包含一個內(nèi)含子，位于J e P A L 翻譯起始密碼予下游4 3 5 b p 處，這與其他植物苯丙氨酸解氨酶基因的結構類似。通過染色體步移技