小麥紋枯病rhizotoniacerealisvanderhoevenapud.boeremaverhoeven有效防衛(wèi)基因的鑒定及轉基因植株的研究

1、西南大學碩士學位論文小麥紋枯?。≧hizotonia cerealis van der Hoevenapud.Boerema 張增艷20080601西南人學碩十學能論文( 3 ) 克隆凡丁質酶基因霖c 7 并構建了原核表達載體，成功進行了誘導表達、體外復性及純純、律多} 擲瑩實驗。蔣R C 7 基因插入劐融含蛋盎表達載體p G E x 毒T ．1 ，在犬腸抒菌囂毛2 l ≤D 囂3 ≥成功地表達了G s T ．R C 7 融合蛋白。讖～

2、步分析表明G S T ．R C 7 融合滋自幾乎全部以包涵體的形式存譙。幾丁質酶活測定表明R c 7 原核表達蛋白體外復性成功。體外抑菌實驗表明，R C 7基因表達產物對落絲生長其有挪制季擘用，對水稻紋撼菌瓣割終娟最強，其次對小麥紋糕菠、 小麥券霉藩( 段鼯r 婦囂黟誼瓣玩刪》、禱藐黃萎菌( 懶潞掰瑤矗黷糯囝、煙草赤星藩也有捧麓作用。( 4 ) 分別構建D Q I 戳U 和震c 7 基網(wǎng)轉化載體p u G L U 、p u R c 7

3、，基因槍法共轉化揚麥1 2妨坯，獲得轉基霾磊代?；u稔轟擊籍，共獲褥3 2 6 抹褥生檀揀，％代K R 檢測擺∞基因陽性植株為4 6 株。轉基閔瑟代的分子檢測過程中，結合了抗病鑒定，菸簿選出撬小麥紋撼病( e級) 且p C R 檢測陽性的轉基岡后代1 6 株。( 5 ) 研究了抗菌肽船州用堙基因在轉基因后代中的基因組分布特點、抗紋枯病分析。S o u 廿l e m雜交結巢表驥，置s ．窟融2 基囂在小麥中為蓽拷貝，說明功憩基囂熱叫用叼已