botryosphaeriadothidea和valsamalivar.mali遺傳轉化體系的建立

1、關于學位論文原創(chuàng)性和使用授權的聲明本人所呈交的學位論文，是在導師指導下，獨立進行科學研究所取得的成果。對在論文研究期間給予指導、幫助和做出重要貢獻的個人或集體，均在文中明確說明。本聲明的法律責任由本人承擔。本人完全了解山東農業(yè)大學有關保留和使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留和按要求向國家有關部門或機構送交論文紙質本和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權山東農業(yè)大學可以將本學位論文的全部或部分內容編入有關數據庫進行檢索，可以采用影印、縮印

2、或其他復制手段保存論文和匯編本學位論文，同時授權中國科學技術信息研究所將本學位論文收錄到《中國學位論文全文數據庫》并向社會公眾提供信息服務。保密論文在解密后應遵守此規(guī)定。論文作者簽名：導師簽名： 盯叩公日 期：冱蝤6 司帥、立弘一 受雅2 ．2 培養(yǎng)基????????????????????????????????l 12 ．3 常規(guī)分子生物學實驗技術????????????????????????1 32 ．3 ．1P C R 反應?

3、???????????????????????????????????????1 32 ．3 ．2D N A 瓊脂凝膠電泳??????????????????????????1 42 ．3 ．3 酶切反應??????????????????????????????．1 42 ．3 ．4D N A 片段的凝膠回收??????????????????????：???1 42 ．3 ．5 質粒D N A 的提取????????????????

4、??????????。1 52 ．3 ．6 大腸桿菌感受態(tài)細胞的制備??????????????????????．1 62 ．3 ．7 大腸桿菌的轉化???????????????????????????．1 62 ．3 ．8 農桿菌的凍融轉化??????????????????????????．1 72 ．4 且d o t h i d e a 菌株原生質體的制備與再生條件優(yōu)化??????????????1 72 ．4 ．1 置d o

5、t h i d e a 菌絲的準備?????????????????????????1 82 ．4 ．2 酶解液的準備????????????????????????????．1 82 ．4 ．3 丑d o t h i d e a 原生質體的制備??????????????????????．1 82 - 4 ．4 最d o t h i d e a 原生質體的再生??????????????????????．1 82 ．5 載體構建???

6、????????????????????????????1 82 ．5 ．1p K 0 1 ．H P H 構建???????????????????????????????????1 82 ．5 ．2 農桿菌的凍融轉化??????????????????????????．1 92 ．6 廈d o t h i d e a 與形m a l i v a r ．m a l i 菌株的T - D N A 轉化????????????一1 92 ．

7、6 。1 最d o t h i d e a 和形m a l i v a r ．m a l i 菌株對潮霉素B 的敏感性測定????????1 92 ．6 ．2 丑d o t h i d e a 菌株的T - D N A 轉化????????????????????～1 92 ．6 ．3 礦m a l i v a t ．m a l i 菌株的T - D N A 轉化???????????????????2 02 ．7 轉化子穩(wěn)定性及D N

8、 A 提取與分析????????????????????2 l2 ．7 ．1 轉化子的穩(wěn)定性分析?????????????????????????．2 l2 ．7 ．2C T A B 法提取基因組D N A ???????????????????????2 12 ．7 ．3P C R 驗證???????????????????????????????．2 22 ．7 ．4S o u t h e r n 雜交???????????????