2005_淫羊藿的炮制機理

1、摘要：摘要：研究假說：中藥經(jīng)炮制后可提高活性成分的吸收，從而達到增加藥效的目的。本研究選擇淫羊藿（EpimediumkeanumNakai.），利用ADMETox平臺研究單體活性成分EpimedinA、EpimedinB、EpimedinC、Icariin、BaohusideⅠ的吸收、代謝機理與動力學(xué)及淫羊藿炮制品的標準提取物中這5個主要活性成分的吸收與代謝及其相互作用。從中藥活性成分吸收與代謝的角度闡明淫羊藿的炮制機理。中藥炮制的科學(xué)

2、研究起步較晚，對減毒或增效的物質(zhì)基礎(chǔ)及炮制機理研究較少。目前對中藥炮制機理的闡述只是停留在該過程的兩端即化學(xué)成分的變化和藥理藥效層面，而對闡明炮制機理的重要環(huán)節(jié)——炮制前后有效成分的吸收、代謝研究不夠深入，本課題擬從更深層次上闡明中藥炮制機理，同時為制定合理的炮制工藝和質(zhì)量標準提高科學(xué)依據(jù)，為中藥現(xiàn)代化、國際化做出更大貢獻。(一)立項依據(jù)與研究內(nèi)容依據(jù)與研究內(nèi)容（40008000字）1.項目的立目的立項依據(jù)依據(jù)1.1中藥炮制是我國人民在

3、數(shù)千年的醫(yī)療實踐中不斷總結(jié)、改進、發(fā)展形成的一套傳統(tǒng)制藥技術(shù)，和中藥復(fù)方一起構(gòu)成了祖國醫(yī)藥學(xué)的兩大鮮明特色。目前對中藥炮制機理研究所采用的方法有：①應(yīng)用化學(xué)方法進行研究[1]：中藥的療效，是由于其所含的化學(xué)成分決定的。中藥經(jīng)過炮制后，所含的化學(xué)成分的性質(zhì)和含量會產(chǎn)生不同程度的改變，因而藥理作用、臨床療效也會發(fā)生相應(yīng)變化，可見，研究中藥炮制前后化學(xué)成分性質(zhì)和含量的變化是中藥炮制機理研究的重要內(nèi)容，該方法在一定程度上能闡明炮制原理，而且能指

4、導(dǎo)炮制工藝的設(shè)計和改進，也是制訂質(zhì)量標準的重要依據(jù)。蔡寶昌等[2，3]測定了馬錢子不同炮制品中生物堿和馬錢子苷的含量，表明炮制后生物堿和馬錢子苷的含量均降低；蔡寶昌等[4]從炮制前后的馬錢子中提取鑒定了16個生物堿，其中異馬錢子堿等為新生物堿；②應(yīng)用實驗藥理學(xué)方法進行研究[1]：中藥的臨床研究由于受到復(fù)方用藥和患者對象的制約，一般不易進行，加上很多中藥化學(xué)成分研究還缺乏與藥效的緊密聯(lián)系，或者尚屬空白，因此實驗藥理學(xué)的研究也是揭示中藥炮制

5、機理的方法之一。應(yīng)用實驗藥理學(xué)的方法研究中藥炮制，主要選用適合中醫(yī)病理模型的方法和指標來進行，或選用已有的藥理方法和指標來進行。在化學(xué)成分不清的情況下，通過實驗藥理學(xué)的方法來研究炮制前來源是人結(jié)腸癌細胞同源性好，可用于區(qū)分腸腔內(nèi)不同吸收途徑的差別。①Caco2細胞模型的基本特點Caco2細胞系結(jié)構(gòu)和生化作用類似于人小腸上皮細胞含有與小腸刷狀緣上皮相關(guān)的酶系與正常的成熟小腸上皮細胞在體外培育過程中出現(xiàn)逆向分化(反分化)不同Caco2細胞在

6、傳統(tǒng)的細胞培養(yǎng)條件下生長在多孔的可滲透的聚酯(Polycarbonate)膜上可達到融合并自發(fā)分化為腸上皮細胞形成連續(xù)的單層(monolayer)[8]。培育約10ｄ后單層的跨膜電阻約為2600Ωcm2細胞密度約為0.9106細胞cm2此時Caco2細胞單層對漏出標志物如聚乙二醇(Mr4000)或甘露醇是不滲透的這種性質(zhì)可以維持恒定約20ｄ由于Caco2細胞性質(zhì)類似小腸上皮細胞因此可以在這段時間進行藥物的跨膜轉(zhuǎn)運實驗[910]。②Cac

7、o2細胞模型的藥物轉(zhuǎn)運機理在Caco2細胞模型中藥物的轉(zhuǎn)運過程為:藥物分子從Caco2單細胞層的頂側(cè)腸腔側(cè)(ＡＰ側(cè))跨過Caco2單細胞層或經(jīng)由細胞間隙到達基底側(cè)(ＢＬ側(cè))。藥物跨過腸上皮有4條途徑:①被動轉(zhuǎn)運②胞旁轉(zhuǎn)運③載體介導(dǎo)轉(zhuǎn)運④胞飲。(2)在體腸灌流模型特點：保證了腸道神經(jīng)以及內(nèi)分泌輸入的完好無損同時也保證了血液及淋巴液的供應(yīng)提高了生物活性。在該模型中還可測定腸道代謝物。該法既可從腸腔取樣又可從血液中取樣。雖然這些研究常在麻醉的

8、小動物上進行但借助腸插管非麻醉的實驗動物及人體的灌流研究亦可進行[11]。在體腸道灌流不僅提供了較高的組織活性而且提供了額外的取樣部位。已經(jīng)建立了鼠腸原位灌流實驗取得的藥物腸道滲透率同人體研究中口服給予藥物溶液后吸收的藥物量之間的關(guān)系。HuM.等學(xué)者采用Coca2和腸灌流模型等方法對黃酮和類黃酮成分的吸收與代謝進行了研究[12～19]；研究結(jié)果表明[19～23]：黃酮苷類化合物在腸道中降解成苷元再吸收，而淫羊藿苷主要是以它的次級鼠李糖苷

9、形式吸收。類黃酮的吸收與代謝途徑可歸納為Fig1。1.4淫羊藿為傳統(tǒng)補腎中藥，在民間沿用已有千年歷史，具補腎陽，強筋骨，祛風(fēng)濕功效。臨床常用于陽痿遺精，筋骨痿軟，風(fēng)濕痹痛等證。淫羊藿中含多種黃酮類成分，目前研究證明[24]：淫羊藿總黃酮為淫羊藿主要活性成分淫羊藿總黃酮為淫羊藿主要活性成分。淫羊藿總黃酮在心血管系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、血液系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、抗炎、抗骨質(zhì)疏松、抗衰老、抗腫瘤等[25]方面取得較大的進展。臨床常見的淫羊藿炮制品有淫羊