海藻多糖提取、純化及其補體結(jié)合活性的研究.pdf

1、中國是海洋大國，“21世紀海上絲綢之路”的戰(zhàn)略構(gòu)想為促進我國從海洋大國向海洋強國的邁進制定了目標(biāo)，因此發(fā)展海洋經(jīng)濟，提高海洋科研水平，海洋生物質(zhì)資源化等都具有重要戰(zhàn)略意義。本研究以海帶加工產(chǎn)業(yè)中產(chǎn)生的廢渣為原料，研究并評價海帶渣生物質(zhì)資源利用的可行性，期待能夠?qū)⒑г白儚U為寶”，既克服其帶來的環(huán)境污染難題，又可以帶來較高的經(jīng)濟效益。
　　課題首先以海帶渣為材料，進行了海藻多糖提取工藝的優(yōu)化研究。采用均勻設(shè)計法進行方案設(shè)計，探討了

2、海藻多糖提取工藝中不同提取溫度、提取pH、提取時間、提取次數(shù)以及不同料液比對多糖提取率的影響。通過建立不同優(yōu)化模型，采用多種回歸分析方式進行分析，確定了以多糖提取率為優(yōu)化指標(biāo)的海藻多糖提取工藝：提取溫度123.7℃，提取pH為8.25，提取時間96.6min，提取三次，料液比為1:9.7。該模型預(yù)測海帶渣多糖提取率的預(yù)測值為2.19％，驗證實測值為2.44%，優(yōu)化條件下獲得的多糖提取率比優(yōu)化前的多糖提取率提高約50%，并且顯著高于同時設(shè)

3、置的四組不同多糖提取方法。
　　其次，本研究對均勻設(shè)計法提取的海帶渣粗多糖進行了補體結(jié)合活性的測定，并根據(jù)不同多糖補體結(jié)合活性的IC H50值進行了方案優(yōu)化。結(jié)果表明不同均勻設(shè)計提取方案所得海帶渣粗多糖均具有良好的補體結(jié)合活性，IC H50值最低為5.6873μg/mL，最高為47.7665μg/mL。以補體結(jié)合活性為指標(biāo)建立優(yōu)化模型，多種回歸分析模型預(yù)測和實際驗證結(jié)果顯示用有偏回歸分析模型得出的優(yōu)化模型提取多糖的補體結(jié)合活性得到

4、了進一步提高，ICH50值達到3.6865μg/mL。
　　采用柱層析法對提取的海帶渣粗多糖進行分離純化。首先對4種大孔樹脂進行動態(tài)吸附篩選，確定大孔樹脂D3520為后續(xù)實驗所用樹脂，海帶渣粗多糖經(jīng) D3520純化后，實際回收率達到62.4%，色素去除率為65.0%，蛋白質(zhì)脫除率為70.1%，多糖純度提高了2.38倍。經(jīng)離子交換樹脂DEAE Sepharose CL-6B純化后分為10個不同多糖級分，總多糖回收率為69.94%，且