神經生物學研究技術與方法

1、神經生物學研究技術與方法,,電生理技術行為學腦功能成像技術,腦立體定位儀又稱腦固定裝置(stereotaxic apparatus),,它是利用顱骨外面的標志或其它參考點所規(guī)定的三度坐標系統(tǒng),來確定皮層下某些神經結構的位置,以便在非直視暴露下對其進行定向的刺激、破壞、注射藥物、引導電位等研究。動物腦立體定位儀是神經解剖、神經生理、神經藥理和神經外科等領域內的重要研究設備，用于對神經結構進行定向的注射、刺激、破壞、引導電位等操作，可

2、用于帕金森氏病動物模型建立，癲癇動物模型建立，腦內腫瘤模型建立，學習記憶，腦內神經干細胞移植，腦缺血等研究。,1 腦的立體定位技術stereotaxic technique of brain,定位原理,,bregma,,,大鼠顱骨表面,,定位圖譜,,海馬,,,,,,Dual Manipulator Stereotaxic Frame with 18° or 45° Ear Bars ■ 此儀器為神經解剖、神經生理、神

3、經外科等領域的重要研究設備，WPI的立體定位儀可以提供準確、穩(wěn)定的定位程序，適用於大多數小型動物的實驗,Stereotaxic Frame,(a) After a mouse is mounted on a stereotaxic frame and its skull is exposed, the bregma is localized (arrowhead). Antero-posterior (AP) axis is indic

4、ated on left. (b) The needle tip is moved onto the bregma (arrowhead). (c) The tip is moved posteriorly and laterally to an appropriate stereotaxic coordinate. The position of the tip (arrow) is marked by a marker pen. (

5、d) A small hole (arrow) is made in the skull by using an electric drill. (e) The needle is brought down to an appropriate coordinate through the hole (arrow).,,,,,Digital Stereotaxic Frame with 18° or 45°Ear Ba

6、rs,數位,定位儀,,微量注射器,電動顱骨鉆,,,Mouse and Neonatal Rat Adaptor ■ 針對小鼠及幼大鼠頭部構造，提供無創(chuàng)且穩(wěn)定的固定方式,,,1、根據體重腹腔注射麻醉藥,,待麻醉后固定在定位儀上,,用雙氧水擦除腦膜，直至露出前囟和后囟并標記。,,找出需要定位的點，電轉打孔。,,進針給藥縫合,,2 單細胞記錄技術,Single-unit recording胞外動作電位是指通過微電極在細胞外記錄到的單細胞動作

7、電位，可以使用玻璃或金屬微電極 If the electrode is a microelectrode, with a tip size of 3 to 10 micrometres, the electrode will often isolate the activity of a single neuron,,,記錄電極,電極材料：鎢、鉑銥合金、不銹鋼等尖端形狀：尖端鈍圓、尖端銳利（角度）絕緣物質和絕緣方法：Epoxy、Gl

8、ass記錄電阻(測量頻率1000Hz)：500k?2M電極尾端電極個數：單電極、多電極,單電極尖端,多電極陣列,microelectrode,玻璃微電極,,麻醉狀態(tài)下記錄實驗方法,Plexon放大器玻璃微電極(1-3 MΩ),,麻醉狀態(tài)下記錄,,清醒狀態(tài)下單細胞記錄裝置,學習和記憶的行為學研究,1 經典的條件反射和操作式條件反射2 迷宮學習模型,Morris water maze 水迷宮,Eight-arm maze

9、八臂迷宮,Y迷宮Y maze,,學習和記憶的行為學研究,3 一次性被動回避,,跳臺實驗,避暗法-達標訓練 (Passive avoidance response, trials to criterion),小雞一次性厭惡回避反應,學習和記憶的行為學研究,延遲性與樣本不匹配操作任務（delayed nonmatching to sample task)。,正確的百分率和延遲的時間可作為這一任務的成績指標。,,其它方法,神 經