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文檔簡介
1、DNA邏輯門在癌細胞識別中的應用,王鑫瑞,利用DNA探針識別癌細胞,將特定的,與癌細胞DNA特異性結合的DNA片段連接到被標記(熒光,放射性同位素,酶等)的探針上,組成DNA分子探針。 將待測細胞DNA分離提取,然后加入DNA分子探針。由于DNA分子雜交遵循堿基互補配對原則,只有目標DNA能與探針結合,從而帶有熒光信號。 分子雜交結束后將未配對的DNA單鏈洗脫。檢測余下樣品的熒光活性可知目標DNA分子的有
2、無。,,,核酸探針識別識別癌細胞,細胞膜表面含有蛋白質,脂類等物質。一些膜蛋白為某一種或幾種細胞所獨有。細胞癌變后也會產生特有的蛋白質,例如酪氨酸蛋白激酶7和免疫球蛋白重鏈μ。 核酸適配體是一類從隨機合成寡居核苷酸單鏈中篩選出來的,能特性性結合特定蛋白或其他小分子物質的寡居核苷酸短鏈。(例如Sgc8c,Sgc4f,TD05等) 將能識別癌細胞產生蛋白質的核酸適配體連接在探針上,在探針上連接信號源(熒光物質
3、等)即可使含目標蛋白的細胞被標記。而將藥物分子連接在探針上則可以實現(xiàn)靶向給藥。 核酸適配體的優(yōu)勢在于核酸序列的多樣性。,,與DNA分子探針的方法類似,核酸適配體探針法的思路依然是將目標底物特異性結合物質,探針,信號源連接起來,從而使目標物質受到信號標記,從而進行測定。不同點在于,核酸適配體識別的目標底物主要是蛋白質。 核酸適配體探針可以快速對目標膜蛋白的有無做出測定。 由于膜蛋白與細胞并非
4、一一對應關系,因此需要對多種膜蛋白進行測定,然后對分析結果進行處理。 使用邏輯門可以使分析工作自動化。,邏輯門,邏輯門又稱“數字邏輯電路基本單元”。執(zhí)行“或”、“與”、“非”、“或非”、“與非”等邏輯運算的電路。任何復雜的邏輯電路都可由這些邏輯門組成。,與門,只有當兩個輸入值同時為真時,輸出才為真。(既A且B,維恩圖中為交集),或門,只要輸入值中存在真,輸出值即為真。(A或B,并集),非門,當輸入值為非真時,輸出值才為真
5、。(非A,補集),與非門,只要輸入值存在非真,輸出值就為真。(非A或非B或非A且非B,交集的補集),或非門,只有輸入值全為非真時,輸出值為真。(非A且非B,并集的補集),,例如,若目標細胞含蛋白A或B,且含蛋白C,且不含蛋白D,那么目標細胞對應的信號為A OR B AND C ANDNOT D. 在實際測定中,首先找出目標細胞所屬集合。用相應的蛋白質探針進行檢測。設定信號強度的閾值,所得信號將轉變?yōu)?和1(無和有)。將所
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