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1、一氧化碳中毒動物模型復(fù)制和形態(tài)學技術(shù)實驗,形態(tài)學中心實驗室,賈雪梅,1.掌握形態(tài)學實驗技術(shù)基本方法和技能 2.熟悉一氧化碳中毒模型復(fù)制的基本程序3.熟悉實驗論文撰寫的方法與步驟4.了解圖像分析和激光共聚焦顯微鏡技術(shù)應(yīng)用,目的和要求,實驗內(nèi)容,通過一氧化碳中毒實驗,了解復(fù)制動物模型基本過程;通過尼氏體染色,觀察一氧化碳中毒對動物大腦皮質(zhì)神經(jīng)元結(jié)構(gòu)的影響;通過免疫組化染色,觀察一氧化碳對神經(jīng)元內(nèi)神經(jīng)營養(yǎng)因子活性的影響;通過圖像
2、分析,對免疫組化染色結(jié)果進行定量分析。,技術(shù)路線,實驗組 對照組 取材 石蠟包埋 切片 Nisslbody染色 免疫組織化學染色 共聚焦顯微鏡 圖像分析技術(shù),,,,,一氧化碳中毒模型復(fù)制,未處理,,,,,
3、,,一氧化碳中毒實驗,目的和要求,1.熟悉一氧化碳中毒實驗方法及 操作技巧。2.掌握一氧化碳吸入所致大腦皮層 結(jié)構(gòu)的形態(tài)學變化。,原 理,一氧化碳中毒,紅細胞內(nèi)血紅蛋白與一氧化碳結(jié)合,而與氧結(jié)合能力降低,進而導(dǎo)致組織缺氧。 腦組織缺氧可導(dǎo)致腦體積增大,腦溝變淺,腦回增寬,切面見點狀出血;小灶狀壞死;神經(jīng)元變性、壞死;小膠質(zhì)細胞增生、腫脹、吞噬脂質(zhì)而呈泡沫狀等一系列病理變化。,材 料,1.動物:小鼠或大鼠
4、; 2.器材:手術(shù)刀、手術(shù)剪、解剖鑷、 試管、廣口瓶、制做切片的系列 儀器和設(shè)備;3.試劑:一氧化碳;,操作步驟,1.將動物分為2組, 把小鼠放入廣口瓶內(nèi);,2.實驗組動物: 給予一氧化碳吸入,待小鼠出現(xiàn)明顯呼吸困難、煩躁、暈厥時開瓶塞,使小鼠蘇醒; 對照組動物: 不吸入一氧化碳;,3.第二天重復(fù)上述操作, 連續(xù)四天, 致小鼠急性中毒死亡;,4. 切開小鼠皮膚, 用鉗子打開顱骨,
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