實驗六細菌生理生化實驗

1、實驗六 細菌的生理生化實驗,實驗?zāi)康撵柟涛⑸餆o菌接種技術(shù)；了解細菌鑒定中常用的生理生化實驗的原理和方法,微生物的生理生化反應(yīng),微生物細胞在酶的催化下進行各種各樣的生理生化反應(yīng)把微生物細胞在一定的條件下培養(yǎng)，通過觀察生理現(xiàn)象和檢查代謝產(chǎn)物，可以了解微生物的代謝過程和代謝的特點由于不同的微生物可能具有不同的酶，代謝途徑和代謝產(chǎn)物可能也有不同，生理生化反應(yīng)是微生物分類鑒定的重要指標之一。,淀粉水解實驗,,,淀粉培養(yǎng)基,,+,淀粉培養(yǎng)

2、基,+,接種,,,+,,,,,,,變色圈，水解圈,培養(yǎng)24h,,加盧哥氏碘液I-KI,結(jié)果： 有水解圈—淀粉水解實驗陽性，用 + 表示； 無水解圈—淀粉水解實驗陰性，用 - 表示；,糖發(fā)酵實驗,原理：丙酮酸裂解生成乙酰CoA與甲酸，甲酸在酸性條件下在甲酸氫解酶作用下可進一步裂解生成H2和CO2——產(chǎn)酸產(chǎn)氣缺少甲酸氫解酶——產(chǎn)酸不產(chǎn)氣步驟：配制糖發(fā)酵培養(yǎng)基——接種——培養(yǎng)（約24h)——觀察結(jié)果結(jié)果：紫色無氣泡，既不產(chǎn)酸也

3、不產(chǎn)氣用 - 表示；黃色無氣泡，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，用 + 表示；黃色且有氣泡，產(chǎn)酸產(chǎn)氣，用 0 表示。,甲基紅實驗（M.R實驗）,原理微生物進行混合酸發(fā)酵，產(chǎn)生各種有機酸——pH下降——加入指示劑甲基紅——紅色步驟：配制蛋白胨水培養(yǎng)基——接種——培養(yǎng)（約24h) ——加入指示劑甲基紅1~2滴——觀察結(jié)果結(jié)果： 紅色——M.R實驗陽性，用 + 表示； 不變色——M.R實驗陰性，用 - 表示；,V.P實驗,V.P實驗,步驟：

4、配制蛋白胨水培養(yǎng)基——接種——培養(yǎng)（約24h) ——5~10d 40%KOH, 5~10d 5%a-奈酚和少量肌 醇 ，取出塞子，用力震蕩，保溫（37度15~30min）——觀察結(jié)果結(jié)果： 紅色——V.P實驗陽性，用 + 表示； 不變色——V.P實驗陰性，用 - 表示。,實驗內(nèi)容,以組為單位進行淀粉水解實驗、糖發(fā)酵實驗、 V.P實驗和M.R實驗。實驗菌種：淀粉水解實驗、糖發(fā)酵實驗：大腸桿菌、蘇云金芽孢桿菌V.P實驗和

5、M.R實驗：大腸桿菌、產(chǎn)氣桿菌注意事項：實驗報告：1、列表記錄實驗結(jié)果2、思考題：第4小題,四大類細胞型微生物菌落的鑒定,初步鑒定,確證：顯微鏡觀察,微生物菌落特征的記錄和描述,菌落形態(tài)：形狀，邊緣情況大小：表面狀況：濕潤、粘稠或干燥，隆起或扁平，厚或薄，是否粉末狀質(zhì)地：致密或疏松蔓延程度：與培養(yǎng)基結(jié)合程度顏色（正面、反面、邊沿、中心）氣味,示例,將菌株在查氏瓊脂平板上25 ℃培養(yǎng)7d 后菌落直徑18~19mm ，