甬江中下游兩種纖毛蟲的形態(tài)研究【開題報告+文獻綜述+畢業(yè)設計】

1、<p><b>　　本科畢業(yè)論文系列</b></p><p><b>　　開題報告</b></p><p><b>　　生物技術</b></p><p>　　甬江中下游兩種自由生纖毛蟲形態(tài)學研究</p><p>　　一、選題的背景與意義</p><

2、p>　　甬江水系為浙江省八大水系之一，發(fā)源于奉化、新昌和嵊州交界的烏山。上游稱剡江，中游稱奉化江，在寧波市區(qū)以下始稱甬江，在鎮(zhèn)海口外游山注入東海, 是寧波的母親河，干流總長106km，流域面積5400km2。</p><p>　　原生動物在動物界中屬于最原始、最低等的單細胞動物，它們身體通常較微小，一般長度在100～300um之間。原生動物的種類繁多，如今記載的種類已逾65000種， 其中至少有半數(shù)為現(xiàn)存種

3、。原生動物結構簡單，生命周期短，對污染反應迅速，水體環(huán)境的突然變化能及時從原生動物群落的變化上反映出來。原生動物除了可以在自然水域中廣泛分布外，還可以在處理廢水和污水時建立起來的人工體系中棲居。在污水處理的人工體系中， 原生動物的種類及數(shù)量與生物處理的效果有著密切的關系，因此，原生動物又可以用來作為污水處理的指示生物。原生動物與細菌之間存在相互依存的功能關系，直接觀察原生動物的種類組成和生長，不僅能反映出細菌的生長情況，也能間接地監(jiān)測出

4、水質，起著指示的作用。利用化學綜合污染指數(shù)這一普遍接受的水質化學評價方法，將原生動物對污染的反映屬性直接建立在化學參數(shù)的基礎之上，從而更客觀地反映出水質的狀況。</p><p>　　二、研究的基本內容與擬解決的主要問題：</p><p><b>　　研究的基本內容；</b></p><p>　　1、定期對甬江中下游水體中的纖毛蟲進行采集；<

5、;/p><p>　　2、光學顯微鏡觀察目標生物的活體形態(tài)；</p><p>　　3、對纖毛蟲原生動物的活體形態(tài)與染色后得到的結構進行種類確定；</p><p>　　4、了解纖毛蟲對甬江水體的影響；</p><p><b>　　擬解決的主要問題：</b></p><p>　　纖毛蟲的分離與培養(yǎng)；<

6、/p><p><b>　　蛋白銀法染色技術；</b></p><p>　　三、研究的方法與技術路線：</p><p><b>　　研究方法：</b></p><p><b>　　1、采集工具準備：</b></p><p>　　準備500和1000ml廣口瓶各

7、一, 用于盛放載玻片的染色缸(數(shù)量視采集點設置而定), 裝PFU (海綿塊約7x7x7 cm)的密閉塑料袋或具蓋水桶等, 拖浮網(wǎng)，同時還應準備若干個由培養(yǎng)皿改制成的潮濕房以備用(分離培養(yǎng)用)。</p><p><b>　　2、標本采集：</b></p><p>　　在淺的水體(如水塘、河溝、淺灘或潮間帶的積水處), 可先用木桿將水攪動, 至底層沉積物泛起后以大廣口瓶采

8、水, 并應撈取若干地點之植物莖葉或漂浮物(枯葉、敗絮等)。</p><p><b>　　3、分離與培養(yǎng)：</b></p><p>　　分離：根據(jù)蟲體的大小而選用不同口徑的微吸管將所需蟲體挑選至已備好的培養(yǎng)皿或多孔凹玻片內(對于蟲體數(shù)量不多時推薦后者)。當用多孔凹玻片分離蟲體時, 為防止干涸，分離后的玻片即應置于潮濕房內?？梢暻闆r選擇不同的培養(yǎng)方式如不能立刻分離時,

9、則建議加培養(yǎng)水(或清潔水)至樣品內(至少等量)以稀釋并暫于低于原水環(huán)境5-10℃的培養(yǎng)箱內保存(但此步不應超過24小時)。對土壤樣本則可取土樣數(shù)克入10-12cm之培養(yǎng)皿內, 加入培養(yǎng)水, 24小時后解剖鏡下觀察, 或將水以紗布濾出后觀察, 并挑取蟲體進行分離。</p><p>　　一經(jīng)分離后即刻應對分離標本進行編號，以備查。</p><p>　　培養(yǎng)：根據(jù)培養(yǎng)蟲體的單一程度可至少將培養(yǎng)

10、類型分為三種, 即粗培養(yǎng), 純培養(yǎng)和克隆培養(yǎng), 使用者可根據(jù)所需選取其適用的方式。一般說來，對于做分類區(qū)系或生態(tài)學研究中的種類鑒定時, 可優(yōu)先考慮選用前兩者，而從事分子生物學、細胞發(fā)生、種下關系的研究或存疑種的鑒定時則可主要采用后兩種方法。</p><p><b>　　活體觀察：</b></p><p>　　用毛細吸管吸一小滴蟲體(液量盡可能少! 以將蓋玻片壓至極限而

11、水不至于自四邊溢出為度)于載玻片上, 加蓋玻片(四周涂以少許凡士林以避免直接壓在蟲體上)；觀察與標本原始數(shù)據(jù)的記錄（采集地、日期、編號），在低倍鏡下測量 (應至少選取大、中、小三個不同個體以得到蟲體變幅的信息), 觀察并記錄蟲體的大小、外形(尤其應注意個體間的外形差異, 同一個體之外形變化以及同一蟲體之具體不同部位的變化特征)、運動特征(主要包括蟲體運動特征，纖毛器的運動特征，游泳的體位變化);中倍鏡下觀察(輕壓蓋玻片以減緩蟲體運動):

12、 纖毛及纖毛器(長度,分布和排列特征等), 伸縮泡(位置/數(shù)目以及形成過程，排空間歇時間，有無收集管等)、內質情況(有無特殊的油球、空泡、結晶體、食物泡數(shù)目/分布特征等)、色素體的有無及體色。油鏡下觀察(輕壓蓋玻片至蟲體無法運動為止), 此時應特別注意細胞的表膜結構、纖毛特征、射出體的有無/分布/形態(tài)、伸縮泡的形成及變化過程、食物泡和內質/表膜下顆粒分布特點等分類學特征。</p><p>　　觀察所用光學顯微鏡以

13、微分干涉顯微鏡為最好, 如以相差顯微鏡, 推薦正低相差為佳(PL positive low), 若僅有明視野觀察則可通過改變數(shù)值光欄以詳細觀察表膜結構。</p><p><b>　　記錄：</b></p><p>　　在記錄用紙上對所觀察標本予以編號 （如1999-12-5-01）（同時盡可能給出一日后可辨別的名稱）</p><p>　　采集

14、人，地點，日期，生境特征（鹽度、水溫、pH等）</p><p><b>　　技術路線</b></p><p>　　四、研究的總體安排與進度：</p><p>　　2010年10月—2010年12月：</p><p>　　1.實驗前的準備工作：查找資料，對實驗內容做初步的了解；</p><p>　　

15、2.實驗儀器和藥品的準備；</p><p><b>　　3.取樣；</b></p><p>　　4.完成開題報告及任務書。</p><p>　　2011年11月—2011年2月：</p><p>　　撰寫文獻綜述及翻譯英文文獻</p><p>　　2011年2月—2010年3月：</p>

16、;<p><b>　　撰寫初稿。</b></p><p>　　2010年4月—2010年5月：</p><p>　　1.初稿經(jīng)指導老師指正后進行修改和完善；</p><p>　　2.畢業(yè)論文定稿，準備答辯。</p><p><b>　　五、主要參考文獻：</b></p>

17、<p>　　[1]張毅強.近代獸醫(yī)原生動物學的分類概況[J].廣西畜牧獸醫(yī)2005,21(2):88-91.</p><p>　　[2]齊桂蘭,劉桂杰.常見原生動物纖毛蟲的采集、分離與培養(yǎng)[J].生物學教學,2008,33(7): 38-39.</p><p>　　[3]陳琳.纖毛蟲的生物學基礎與危害魚類的常見種屬[J].福建畜牧獸醫(yī),1999,2: 45-51.</p&g

18、t;<p>　　[4]Pierce RW, Turner JT. Ecology of planktonic ciliates in marine food webs[J]. Rev Aquat Sci, 1992, 6: 139-181.</p><p>　　[5]張毅強.近代獸醫(yī)原生動物學的分類概況[J]. 廣西畜牧獸醫(yī),2005,21(2):88-91.</p><p>

19、;　　[6]劉磊.簡析活性污泥中微生物群體的特征及作用[J].環(huán)境科學與技術,2009,32(6C):561-562.</p><p>　　[7]科海所.海洋原生動物[J].齊魯漁業(yè),2007,24(8):60.</p><p>　　[8]Campbell L, Landry LR. Response of microbial community structure to env- -ir

20、onmental forcing in the Arabian sea[J]. Deep-sea Research.1998, 45(2): 2301-2325. </p><p>　　[9]李江平,李雯.指示生物及其在環(huán)境保護中的應用[J].云南環(huán)境科學,2001,20(1):51-54.</p><p>　　[10]范曉鵬,沈韞芬.環(huán)境因素對原生動物群落特征的影響[J].應用與環(huán)境生物

21、學報,2001,7(6):554-447.</p><p>　　[11]黃彬,張明鳳,陳寅山,許友勤.原生動物生物指數(shù)在福州市內河水質評價中的運用[J].福建環(huán)境,2003,20(4):29-31. </p><p>　　[12]劉松巖,吳坤杰,田海軍.原生動物在水體生物監(jiān)測中的應用研究[J]. 信陽農業(yè)高等?？茖W校學報,2007,17(3):112-113.</p><

22、;p>　　[13]王婭寧,施心路,劉桂杰等.纖毛原生動物研究的經(jīng)濟意義[J].生物學雜志, 2009,26(6):72-75.</p><p>　　[14]周可新,許木啟,曹宏等.土壤原生動物在環(huán)境監(jiān)測中的應用[J]．動物學雜志, 2003,38(1):80-83. </p><p>　　[15] Martin-gonzalez A, Borniquel S, Diaz S. Ult

23、rastructural alterations in ciliated protozoa under heavy metal exposure[J]. Cell BiolInt, 2005, 29(2): 119-126.</p><p>　　[16]沈韞芬,馮偉松,顧曼如.河流的污染監(jiān)測[M].北京:中國建筑工業(yè)出版社,1995. </p><p>　　[17]崔木子,施心路,劉桂杰等

24、.原生動物的水質監(jiān)測及凈化作用研究綜述[J].吉首大學學報(自然科學版),2008,28(1):90-93.</p><p>　　[18]邢宏,邢光印,張楊.水中原生動物對細茵的影響[J].中國給水排水,2006,22(10):4.</p><p>　　[19]林利明,朱延彬,譚石慈.利用原生動物的趨化性進行水質生物檢測的方法研究[J].華南師范大學學報:自然科學版,1994,4:42-4

25、6. </p><p>　　[20]許木啟,翟家驥,邵永怡.利用PFU原生動物群落多樣性快速監(jiān)測北京通惠河水質[J].動物學雜志,1998,33(4):1-7. </p><p>　　[21]李風超,沈韞芬,劉存歧.應用原生動物群落評價枯水期白洋淀的水質現(xiàn)狀[J].生態(tài)學雜志,2005,24(7):785-789. </p><p>　　[22]Cairns JJ.

26、 Bidwell JR. Toucity testing with communities : microcosms mesocosms and whole-sustem manipulations[J]. Rev Environ Contam Toxical.1996,147:45-69.</p><p>　　[23]陳聲貴，許木啟,楊向平等.原生動物在活性污泥中的作用[J].生態(tài)學雜志,2002,21(3):

27、47-51. </p><p>　　[24]Lin Xiaofeng, Song Weibo. Redescription of the marine ciliate, Certesia quadrinucleata (Protozoa: Ciliophora) from Qingdao, China[J]. J. Mar. Biol. Ass. U.K.,2004,84, 1-6.</p><

28、;p>　　[25]Song Weibo, Chen Shao, Yi Zhenzhen, Li Liqiong, et al.. The morphology, morphogenesis and SSrRNA gene sequence of a new marine ciliate, Diophrys apoligothrix spec. nov. (Ciliophora; Euplotida) [J].ScienceDire

29、ct,2009,45,38-50.</p><p>　　[26]劉春龍, 李忠秋, 孫海霞. 纖毛蟲對反芻動物瘤胃內環(huán)境指標、營養(yǎng)物質代謝的影響的研究[J]. 家畜生態(tài), 2004, 25(3): 57-60.</p><p><b>　　畢業(yè)論文文獻綜述</b></p><p><b>　　生物技術</b></p&

30、gt;<p>　　原生動物對水質監(jiān)測作用的研究進展</p><p>　　摘 要：纖毛蟲是原生動物中種類數(shù)量最多、個體最大的一個類群，在水生生態(tài)系統(tǒng)中，纖毛蟲對水體的物質循環(huán)起著重要的促進作用，對水體纖毛蟲的生態(tài)學研究，對全面了解水體中有機物質的循環(huán)過程及類群間相互關系、結構與功能的變化等有重要的意義，它的某些種類可作為有機污染的指示生物，應用其種類組成分布特征及優(yōu)勢種的生態(tài)耐性，可監(jiān)測評價水體的污

31、染狀況。</p><p>　　關鍵詞：原生動物；纖毛蟲；水質；生物監(jiān)測；</p><p>　　原生動物在動物界中屬于最原始、 最低等的單細胞動物，它們身體通常較微小，一般長度在100～300um之間。原生動物的種類繁多，如今記載的種類已逾65000種，其中至少有半數(shù)為現(xiàn)存種[1]。常見的纖毛蟲有草履蟲(Paramecium)、棘尾蟲(Stylonychia)、喇叭蟲(Stentor)、鐘蟲

32、(Vorticella)[2] 等。纖毛蟲（ciliate）是原蟲中結構最復雜，種類最多的一個門，包括4700種由生活和2500種營固著生括或寄生的蟲種，海水水和淡水中都有分布自由生活種類是浮游生物的組成部分[3]，如鐘蟲、游樸蟲、棘尾蟲等個體較大者，均可作為魚類的餌料，形成食物鏈的一大部分基礎，也是連接微食物環(huán)和經(jīng)典食物鏈的重要中介[4]，故在水系中起著重要作用。</p><p><b>　　原生動物

33、概述</b></p><p>　　原生動物是動物界中最低等的一類真核單細胞動物，個體一般微小，由單個細胞組成。它們活領域分布的及其廣泛，一般在淡水、海水、沼澤甚至潮濕的土壤中均可生存，也有不少寄生在其他動物的體內。原生動物的分類相對復雜，德國學者Butschli是第一個提出原生動物在單細胞模式基礎上的分類系統(tǒng)的人，他把原生動物門劃分為4個綱--鞭毛蟲綱、肉足蟲綱、 孢子蟲綱、纖毛蟲綱[5]。原生動物能

34、用來改善水質、評價和指示污水廠的運行和處理效果[6]。在水處理工作中常見的主要是3類：(1) 肉足蟲。它們最主要的特征是蟲體的細胞質可以延伸形成偽足，并利用其作為運動和攝食的主要胞器， 某些無明顯偽足的種類可以利用原生質流進行運動。(2)鞭毛蟲。通常具有一根或一根以上的鞭毛，作為運動的細胞器。鞭毛蟲種類繁多，分布很廣，生活方式多種多樣。營寄生生活的鞭毛蟲主要寄生于宿主的消化道、泌尿道、血液及陰道毛滴蟲對人體危害較大。(3) 纖毛蟲。纖毛

35、蟲的體形多樣化，是在原生動物中特化程度最高、最為復雜的一大類群。以纖毛為運動胞器是纖毛蟲的主要特征，多數(shù)種類終生全身被有纖毛，有的只在生活某一階段存在纖毛。絕大多數(shù)纖毛蟲具有一層柔軟的表膜和</p><p>　　原生動物在海洋微食物網(wǎng)及近岸生態(tài)系的物質流動與能量傳遞過程中擔當著樞紐作用，因此，長期以來，該類群的種類鑒定一直是制約相關微生態(tài)研究的一個瓶頸。有人研究酸度對原生動物群落的影響：當酸度達到一定程度，再增大

36、同樣會對其產生破壞性影響，其它物理化學因素也是如此[8]。因此，利用原生動物監(jiān)測水質可以直接反映出環(huán)境質量變化對水生生物的影響及其危害的程度，是實現(xiàn)水環(huán)境監(jiān)測目的的一種最直接而有效的手段。 </p><p>　　2 原生動物的指示作用</p><p>　　2.1 環(huán)境污染指示</p><p>　　指示生物又叫生物指示物，指那些在一定地區(qū)范圍內，能通過其特性、數(shù)量、種

37、類群落等變化，指示其環(huán)境或某一環(huán)境因子特征的生物[9]。目前比較經(jīng)典的生物指數(shù)如：Beck生物指數(shù)、 Goodnight和Whitley生物指數(shù)、Trent生物指數(shù)和Chandle計分制等。原生動物結構簡單，生命周期短，與它們所生存的環(huán)境直接接觸，對污染反應迅速。當外部環(huán)境存在脅迫時，原生動物群落特征都會發(fā)生相應規(guī)律性變化[10]，及時反映出水體環(huán)境的突然變化。另外，絕大多數(shù)原生動物種類為世界性分布，不受季節(jié)和地區(qū)差異的限制。黃彬等[1

38、1]用原生動物做指示，來評價福州市內河的環(huán)境情況。劉松巖等[12]也將原生動物應用水體生物的檢測中。</p><p>　　利用纖毛蟲的種類組成分布特征及優(yōu)勢種的生態(tài)耐性，不僅可以評價水體的污染狀況，還可應用纖毛蟲監(jiān)測土壤環(huán)境[13]。實踐表明，纖毛蟲可用于檢測土壤中的重金屬毒性。膨大腎形蟲和齒脊腎形蟲是土壤中常見的兩種纖毛蟲，許多毒性實驗證明[14],它們與其他常用的測試生物一樣對環(huán)境的變化敏感，甚至更為敏感，因

39、為它們沒有保護性的細胞壁，更直接的暴露在周圍環(huán)境中，與污染物相接觸。Martin Gonzalez等研究發(fā)現(xiàn)，土壤中重金屬Cd、Zn污染能促進土壤纖毛蟲的超微結構變化，使細胞的活動能力受限[15]。</p><p>　　2.2 反映水質狀況</p><p>　　原生動物與細菌之間存在相互依存的功能關系，直接觀察原生動物的種類組成和生長，不僅能反映出細菌的生長情況，也能間接地監(jiān)測出水質，起著

40、指示的作用。利用化學綜合污染指數(shù)[16]這一普遍接受的水質化學評價方法，將原生動物對污染的反映屬性直接建立在化學參數(shù)的基礎之上，從而更客觀地反映出水質的狀況。在自然環(huán)境中，水質較好的水體自養(yǎng)程度高，植物性鞭毛蟲所占比例較高；隨著水體有機污染程度的提高，異養(yǎng)程度增加，動物性鞭毛蟲所占比例將增加[17]。原生動物與細菌之間也存在相互依存的功能關系，掠食性的原生動物可以使細菌生長維持在對數(shù)生長期， 防止細菌種群的衰老，提高細菌酶的活力[18]

41、。林利明等[19]曾利用草履蟲對不同水質的趨化性，分析它們移動到實驗區(qū)水樣的數(shù)目，從而判斷水質的污染程度和毒性大小。許木啟等[20]報道了北京通惠河原生動物群落多樣性特征與水質的相互關系。李鳳超等[21]應用PFU微型生物群落監(jiān)測方法，對長期處于低水位狀態(tài)下的白洋淀水質進行了綜合評價。結果表明，白洋淀水域受府河污水的影響，淀內的內源性污染對原生動物群落造成了極大的影響。</p><p>　　2.3 生物系統(tǒng)物質循

42、環(huán)</p><p>　　研究發(fā)現(xiàn)，不同生境中的原生動物在食物鏈中所占據(jù)的營養(yǎng)級是不同的，它不僅僅是有機物和碎屑的分解者，細菌、藻類的捕食者和浮游動物的捕食對象，還起到連接具有高生產力的，能保持大量營養(yǎng)成分的微生物圈和后生動物的作用[22]。因此它在水生態(tài)系的物質循環(huán)和能量流動中起到十分重要的作用。目前世界上普遍采用活性污泥法進行污水處理，即利用活性污泥中的細菌吸附、氧化分解污染物[23]。原生動物是活性污泥中細菌

43、的主要捕者，而纖毛蟲在運行良好的活性污泥中占原生動物總數(shù)70％，通過纖毛蟲對細菌的捕食作用，使活性污泥中的細菌始終保持在對數(shù)生長期，促進生物消耗，減少污泥生成量，所以纖毛蟲是活性污泥中最常見也是最重要的捕食者[24]。在畜牧業(yè)方面，瘤胃內的原生動物主要有兩個亞類：鞭毛蟲綱和纖毛蟲綱，前者主要存在幼年動物中，后者則是成年反芻動物體內主要的類群，占整個瘤胃微生物生物量30％～80％[25]。纖毛蟲在增加瘤胃飽和脂肪酸的含量、維持細菌必需的厭

44、氧環(huán)境及降低硝酸鹽和亞硝酸鹽的致毒作用方面有重要意義[26]。</p><p><b>　　3. 展望</b></p><p>　　原生動物群落的變化可以指示和預報水域污染的現(xiàn)狀和發(fā)展的趨勢， 我們可以利用它們在水體的變化情況監(jiān)測水質的變化，在監(jiān)測評價水質的瞬時變化和長期內的連續(xù)變化方面，原生動物作為理想的監(jiān)測生物具有不可替代的作用。但是由于水質情況復雜，生態(tài)系統(tǒng)多種

45、多樣，適應能力各不相同，難以確定污染物的性質和含量。因此，在條件許可的情況下，應采取多種方法進行綜合監(jiān)測，以確保監(jiān)測結果的科學性。</p><p><b>　　參考文獻</b></p><p>　　[1]張毅強.近代獸醫(yī)原生動物學的分類概況[J].廣西畜牧獸醫(yī)2005,21(2):88-91.</p><p>　　[2]齊桂蘭,劉桂杰.常見原生

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47、v Aquat Sci, 1992, 6: 139-181.</p><p>　　[5]張毅強.近代獸醫(yī)原生動物學的分類概況[J]. 廣西畜牧獸醫(yī),2005,21(2):88-91.</p><p>　　[6]劉磊.簡析活性污泥中微生物群體的特征及作用[J].環(huán)境科學與技術,2009,32(6C):561-562.</p><p>　　[7]科海所.海洋原生動物[J

48、].齊魯漁業(yè),2007,24(8):60.</p><p>　　[8]Campbell L, Landry LR. Response of microbial community structure to env- -ironmental forcing in the Arabian sea[J]. Deep-sea Research.1998, 45(2): 2301-2325. </p><

49、;p>　　[9]李江平,李雯.指示生物及其在環(huán)境保護中的應用[J].云南環(huán)境科學,2001,20(1):51-54.</p><p>　　[10]范曉鵬,沈韞芬.環(huán)境因素對原生動物群落特征的影響[J].應用與環(huán)境生物學報,2001,7(6):554-447.</p><p>　　[11]黃彬,張明鳳,陳寅山,許友勤.原生動物生物指數(shù)在福州市內河水質評價中的運用[J].福建環(huán)境,200

50、3,20(4):29-31. </p><p>　　[12]劉松巖,吳坤杰,田海軍.原生動物在水體生物監(jiān)測中的應用研究[J]. 信陽農業(yè)高等專科學校學報,2007,17(3):112-113.</p><p>　　[13]王婭寧,施心路,劉桂杰等.纖毛原生動物研究的經(jīng)濟意義[J].生物學雜志, 2009,26(6):72-75.</p><p>　　[14]周可新,

51、許木啟,曹宏等.土壤原生動物在環(huán)境監(jiān)測中的應用[J]．動物學雜志, 2003,38(1):80-83. </p><p>　　[15] Martin-gonzalez A, Borniquel S, Diaz S. Ultrastructural alterations in ciliated protozoa under heavy metal exposure[J]. Cell BiolInt, 2005,

52、29(2): 119-126.</p><p>　　[16]沈韞芬,馮偉松,顧曼如.河流的污染監(jiān)測[M].北京:中國建筑工業(yè)出版社,1995. </p><p>　　[17]崔木子,施心路,劉桂杰等.原生動物的水質監(jiān)測及凈化作用研究綜述[J].吉首大學學報(自然科學版),2008,28(1):90-93.</p><p>　　[18]邢宏,邢光印,張楊.水中原生動物

53、對細茵的影響[J].中國給水排水,2006,22(10):4.</p><p>　　[19]林利明,朱延彬,譚石慈.利用原生動物的趨化性進行水質生物檢測的方法研究[J].華南師范大學學報:自然科學版,1994,4:42-46. </p><p>　　[20]許木啟,翟家驥,邵永怡.利用PFU原生動物群落多樣性快速監(jiān)測北京通惠河水質[J].動物學雜志,1998,33(4):1-7. <

54、/p><p>　　[21]李風超,沈韞芬,劉存歧.應用原生動物群落評價枯水期白洋淀的水質現(xiàn)狀[J].生態(tài)學雜志,2005,24(7):785-789. </p><p>　　[22]Cairns JJ. Bidwell JR. Toucity testing with communities : microcosms mesocosms and whole-sustem manipulatio

55、ns[J]. Rev Environ Contam Toxical.1996,147:45-69.</p><p>　　[23]陳聲貴，許木啟,楊向平等.原生動物在活性污泥中的作用[J].生態(tài)學雜志,2002,21(3):47-51. </p><p>　　[24]Lin Xiaofeng, Song Weibo. Redescription of the marine ciliate,

56、Certesia quadrinucleata (Protozoa: Ciliophora) from Qingdao, China[J]. J. Mar. Biol. Ass. U.K.,2004,84, 1-6.</p><p>　　[25]Song Weibo, Chen Shao, Yi Zhenzhen, Li Liqiong, et al.. The morphology, morphogenesis

57、 and SSrRNA gene sequence of a new marine ciliate, Diophrys apoligothrix spec. nov. (Ciliophora; Euplotida) [J].ScienceDirect,2009,45,38-50.</p><p>　　[26]劉春龍, 李忠秋, 孫海霞. 纖毛蟲對反芻動物瘤胃內環(huán)境指標、營養(yǎng)物質代謝的影響的研究[J]. 家畜生態(tài),

58、 2004, 25(3): 57-60.</p><p><b>　　本科畢業(yè)設計</b></p><p><b>　?。?0_ _屆）</b></p><p>　　甬江中下游兩種纖毛蟲的形態(tài)研究</p><p><b>　　目　錄</b></p><p&g

59、t;<b>　　1 引言1</b></p><p>　　1.1 環(huán)境污染指示1</p><p>　　1.2 反映水質狀況1</p><p>　　1.3 生物系統(tǒng)物質循環(huán)1</p><p>　　2 實驗方法與材料2</p><p><b>　　2.1 采樣2</b>

60、</p><p>　　2.1.1 采集工具準備2</p><p>　　2.1.2 采集地點和時間2</p><p>　　2.1.3 采集標本2</p><p>　　2.2 分離與培養(yǎng)2</p><p>　　2.2.1 分離2</p><p>　　2.2.3 培養(yǎng)2</p>

61、<p>　　2.3 活體觀察2</p><p>　　2.4 染色觀察3</p><p>　　2.4.1 蛋白銀法3</p><p>　　2.4.2 銀氨染色法3</p><p><b>　　3 結果與分析3</b></p><p>　　3.1 相似瓦榴彈蟲Pinacocol

62、eps similis (Kahl, 1933)3</p><p>　　3.1.1 形態(tài)描述3</p><p>　　3.1.2 分析比較4</p><p>　　3.2 東方諾蘭德蟲Nolandia orientalis6</p><p>　　3.2.1 形態(tài)描述6</p><p>　　3.2.2 分析比較6

63、</p><p><b>　　4討論11</b></p><p><b>　　致謝11</b></p><p><b>　　參考文獻12</b></p><p>　　摘要：甬江水系為浙江七大水系之一，流域面積約占寧波總面積的48%，為浙東地區(qū)的重要水資源。隨著經(jīng)濟的發(fā)展及

64、城市人口的急劇增長，工業(yè)廢水與生活污水的無序排放對該水系的生態(tài)系統(tǒng)造成巨大損害。纖毛蟲原生動物作為良好的生物指示種，在環(huán)境監(jiān)測中扮演重要角色，但關于甬江水體內纖毛蟲原生動物的研究少有報道。鑒于此，我們開展了對該水體內纖毛蟲的種類構成、群落結構的變化等研究。本文主要對兩種纖毛蟲，Pinacocoleps similis (Kahl, 1933)相似瓦榴彈蟲與Nolandia orientalis東方諾蘭德蟲，進行詳盡的形態(tài)描述，主要內容包

65、括活體形態(tài)、蛋白銀與氨銀法染色后得到纖毛圖式、大核形狀等特征。</p><p>　　關鍵詞：甬江;原生動物；纖毛蟲；形態(tài)描述。</p><p>　　ABSTRACT: Yongjiang River is one of the seven major river systems in Zhejiang Province, the drainage area approximately co

66、mposes the Ningbo total area 48%, which is a important water resource for the Eastern Zhejiang Province. With economic development and rapid growth of urban population, industrial wastewater and domestic sewage discharge

67、 of the water system disorder caused enormous damage to the ecosystem. Ciliate is a good biological indicator species and play an important role in monitoring</p><p>　　KEYWORDS: Yongjiang river; Protozoa; ci

68、liate; morphological description.</p><p><b>　　1 引言</b></p><p>　　甬江水系為浙江省七大水系之一[1]，發(fā)源于奉化、新昌和嵊州交界的烏山。上游稱剡江，中游稱奉化江，在寧波市區(qū)以下始稱甬江，在鎮(zhèn)?？谕庥紊阶⑷霒|海, 是寧波的母親河，干流總長106km，流域面積5400km2。甬江流域是浙江省城市化程度最高

69、、經(jīng)濟最發(fā)達地區(qū)之一，隨著經(jīng)濟的發(fā)展和城市化進程的推進，流域的水資源問題日益嚴重[2]，導致生物多樣性的降低。而原生動物與細菌之間存在相互依存的功能關系，直接觀察原生動物的種類組成和生長，不僅能反映出細菌的生長情況，也能間接地監(jiān)測出水質，起著指示的作用。近20年來，我國纖毛蟲的研究已取得了長足的進展，但至今為止，還沒有任合有關甬江纖毛蟲類的研究。</p><p>　　1.1 環(huán)境污染指示</p>&

70、lt;p>　　指示生物又叫生物指示物，指那些在一定地區(qū)范圍內，能通過其特性、數(shù)量、種類群落等變化，指示其環(huán)境或某一環(huán)境因子特征的生物[3]。目前比較經(jīng)典的生物指數(shù)如：Beck生物指數(shù)、Goodnight和Whitley生物指數(shù)、Trent生物指數(shù)和Chandle計分制等。原生動物結構簡單，生命周期短，與它們所生存的環(huán)境直接接觸，對污染反應迅速。當外部環(huán)境存在脅迫時，原生動物群落特征都會發(fā)生相應規(guī)律性變化[4]，及時反映出水體環(huán)境的

71、突然變化。另外，絕大多數(shù)原生動物種類為世界性分布，不受季節(jié)和地區(qū)差異的限制。黃彬等[5]用原生動物做指示，來評價福州市內河的環(huán)境情況。劉松巖等[6]也將原生動物應用水體生物的檢測中。</p><p>　　利用纖毛蟲的種類組成分布特征及優(yōu)勢種的生態(tài)耐性，不僅可以評價水體的污染狀況，還可應用纖毛蟲監(jiān)測土壤環(huán)境[7]。實踐表明，纖毛蟲可用于檢測土壤中的重金屬毒性。膨大腎形蟲和齒脊腎形蟲是土壤中常見的兩種纖毛蟲，許多毒性

72、實驗證明[8],它們與其他常用的測試生物一樣對環(huán)境的變化敏感，甚至更為敏感，因為它們沒有保護性的細胞壁，更直接的暴露在周圍環(huán)境中，與污染物相接觸。Martin等(2005)研究發(fā)現(xiàn)，土壤中重金屬Cd、Zn污染能促進土壤纖毛蟲的超微結構變化，使細胞的活動能力受限[9]。</p><p>　　1.2 反映水質狀況</p><p>　　原生動物與細菌之間存在相互依存的功能關系，直接觀察原生動物的

73、種類組成和生長，不僅能反映出細菌的生長情況，也能間接地監(jiān)測出水質，起著指示的作用。利用化學綜合污染指數(shù)[10]這一普遍接受的水質化學評價方法，將原生動物對污染的反映屬性直接建立在化學參數(shù)的基礎之上，從而更客觀地反映出水質的狀況。在自然環(huán)境中，水質較好的水體自養(yǎng)程度高，植物性鞭毛蟲所占比例較高；隨著水體有機污染程度的提高，異養(yǎng)程度增加，動物性鞭毛蟲所占比例將增加[11]。原生動物與細菌之間也存在相互依存的功能關系，掠食性的原生動物可以使細

74、菌生長維持在對數(shù)生長期， 防止細菌種群的衰老，提高細菌酶的活力[12]。林利明等(1994) [13]曾利用草履蟲對不同水質的趨化性，分析它們移動到實驗區(qū)水樣的數(shù)目，從而判斷水質的污染程度和毒性大小。許木啟等(1998) [14]報道了北京通惠河原生動物群落多樣性特征與水質的相互關系。李鳳超等(2005) [15]應用PFU微型生物群落監(jiān)測方法，對長期處于低水位狀態(tài)下的白洋淀水質進行了綜合評價。結果表明，白洋淀水域受府河污水的影響，淀內

75、的內源性污染對原生動物群落造成了極大的影響。</p><p>　　1.3 生物系統(tǒng)物質循環(huán)</p><p>　　研究發(fā)現(xiàn)，不同生境中的原生動物在食物鏈中所占據(jù)的營養(yǎng)級是不同的，它不僅僅是有機物和碎屑的分解者，細菌、藻類的捕食者和浮游動物的捕食對象，還起到連接具有高生產力的，能保持大量營養(yǎng)成分的微生物圈和后生動物的作用[16]。因此它在水生態(tài)系的物質循環(huán)和能量流動中起到十分重要的作用。目前世

76、界上普遍采用活性污泥法進行污水處理，即利用活性污泥中的細菌吸附、氧化分解污染物[17]。原生動物是活性污泥中細菌的主要捕者，而纖毛蟲在運行良好的活性污泥中占原生動物總數(shù)70％，通過纖毛蟲對細菌的捕食作用，使活性污泥中的細菌始終保持在對數(shù)生長期，促進生物消耗，減少污泥生成量，所以纖毛蟲是活性污泥中最常見也是最重要的捕食者。在畜牧業(yè)方面，瘤胃內的原生動物主要有兩個亞類：鞭毛蟲綱和纖毛蟲綱，前者主要存在幼年動物中，后者則是成年反芻動物體內主要

77、的類群，占整個瘤胃微生物生物量30％～80％。纖毛蟲在增加瘤胃飽和脂肪酸的含量、維持細菌必需的厭氧環(huán)境及降低硝酸鹽和亞硝酸鹽的致毒作用方面有重要意義[18]。</p><p><b>　　2 實驗方法與材料</b></p><p>　　實驗主要步驟是采樣，分離培養(yǎng)，活體觀察，染色觀察，數(shù)據(jù)記錄。</p><p><b>　　2.1 采

78、樣</b></p><p>　　2.1.1 采集工具準備</p><p>　　準備500和1000ml廣口瓶各一, 用于盛放載玻片的染色缸, 裝PFU (海綿塊約7x7x7 cm)的具蓋水桶等, 拖浮網(wǎng)以及若干個由培養(yǎng)皿改制成的潮濕房以備用(分離培養(yǎng)用)。</p><p>　　為進行定量研究, 備有浮游生物計數(shù)框、水樣采集器（5-10升）及量筒(500-

79、1000ml)等。對于浮游生種類我們準備約20-50 m孔徑的小型微孔浮游生物網(wǎng)；水樣采集器；PFU。對于周叢生種類以及固著生種類我們對前者仍可用PFU塊進行采集, 而后者則需用載玻片框。</p><p>　　培養(yǎng)和分離用水是選取潔凈的自然水, 并經(jīng)加熱(至80℃即可), 冷卻充氣后封口保存?zhèn)溆?</p><p>　　2.1.2 采集地點和時間</p><p>　　

80、于2011年3月15日—4月15日在甬江中下游——寧波大學南側江段。</p><p>　　2.1.3 采集標本</p><p>　　在淺的水體(淺灘的積水處),用木桿將水攪動, 至底層沉積物泛起后以大廣口瓶采水, 并應撈取若干漂浮物(枯葉、敗絮等)。</p><p>　　采用浮游生物網(wǎng),在水中經(jīng)若干次來回拖捕以富集蟲體。所獲之蟲體水樣在瓶內不應裝得過滿, 以免造成水

81、體缺氧。</p><p>　　用載玻片框，將框沉入水中并作好標記。通常視水中蟲體多寡而讓其在水中暴露1至數(shù)周。取出時應盡量避免攪動，以染色缸取原位水小心將玻片插入缸內帶回。</p><p>　　海綿塊(PFU)墜以重物, 浸入水中后擠干內部的氣泡（浸入水中需先行反復擠壓數(shù)次以去除氣泡）。調節(jié)海綿塊的深度，上端固定于水面標志物上。</p><p><b>　

82、　2.2 分離與培養(yǎng)</b></p><p>　　由于蟲體經(jīng)采集后是一非正常的、高度濃縮了的群落結構，因此我們在分離和處理時力爭在數(shù)小時內進行, 以避免所獲種類消亡。</p><p><b>　　2.2.1 分離</b></p><p>　　解剖鏡下進行, 根據(jù)蟲體的大小而選用不同口徑的微吸管將所需蟲體挑選至已備好的多孔凹玻片內。當

83、用多孔凹玻片分離蟲體時, 為防止干涸，分離后的玻片立即置于潮濕房內。當我們不能立刻分離時, 則加培養(yǎng)水至樣品內以稀釋并暫于低于原水環(huán)境5-10℃的培養(yǎng)箱內保存(但此步不應超過24小時)。</p><p><b>　　2.2.3 培養(yǎng)</b></p><p>　　根據(jù)培養(yǎng)蟲體的單一程度可至少將培養(yǎng)類型分為三種, 即粗培養(yǎng), 純培養(yǎng)和克隆培養(yǎng),我們選用粗培養(yǎng)。</

84、p><p>　　粗培養(yǎng)：直接吸取原采集樣入培養(yǎng)皿中, 鏡下去除大型后生動物及多余的沉積物, 加適量米粒或剪開的麥粒以致富細菌(水較富時也可不加)。通?？擅咳諜z查1-2次, 以清除某些快速繁殖的不欲保留的種類, 并每日更新約半量的培養(yǎng)水。</p><p>　　此種培養(yǎng)對于不易建立純培養(yǎng)的種類或小型種類特別值得提倡。此外當培養(yǎng)水體中種類較豐富而個體數(shù)量(總數(shù)量)不大時, 均可采取此方法以達到富集蟲

85、體且最大限度地保存各種的目的。此方法由于蟲體生活在原來的水環(huán)境內, 較之純培養(yǎng)更易于全面地檢獲和保存標本, 因此也更多地應用于對某生境所有種類的構成研究上。</p><p><b>　　2.3 活體觀察</b></p><p>　　活體觀察方法主要用以獲取纖毛蟲活體細胞大小、外形、運動、纖毛器、伸縮泡、食物泡、內質顆粒及射出體等特征, 以彌補單純染色的不足。</

86、p><p>　　具體步驟用毛細吸管吸一小滴蟲體于載玻片上，加蓋玻片(四周涂以少許凡士林以避免直接壓在蟲體上)；觀察與標本原始數(shù)據(jù)的記錄。在低倍鏡下測量， 觀察并記錄蟲體的大小、外形、運動特征；中倍鏡下觀察，纖毛及纖毛器的長度,分布和排列特征等；伸縮泡的位置，數(shù)目以及形成過程，排空間歇時間，有無收集管等；內質中有無特殊的油球、空泡、結晶體、食物泡數(shù)目和分布特征等；色素體的有無及體色。油鏡下觀察，我們特別注意細胞的表膜結

87、構，纖毛特征，射出體的有無、分布和形態(tài)，伸縮泡的形成及變化過程，食物泡和內質，表膜下顆粒分布特點等分類學特征。</p><p><b>　　2.4 染色觀察</b></p><p>　　本次實驗中一共用到兩種染色方法：蛋白銀染色法和氨銀染色法。</p><p>　　2.4.1 蛋白銀法</p><p>　　蛋白銀染色技術

88、最早為一組織染色法, Bodion 1937年首先將之應用于原生動物上，經(jīng)過幾十年來不斷的改進，已成為纖毛蟲纖毛圖式顯示的最重要和最基本的方法。本方法對大部分纖毛蟲的染色效果極佳，但對于咽膜類、腎形類及籃環(huán)目等類群則常常不夠理想。其主要用以顯示蟲體的皮層及內部結構，如纖毛下器、毛基體、核器及各種表膜下纖維系統(tǒng)等，而銀線系統(tǒng)則不被染色。</p><p>　　具體步驟：(1) 將蟲體于胚胎皿中用Bouin液或飽和升汞

89、(HgCl2)固定5-10min；(2) 蒸餾水洗3-4次(Bouin液以水洗至無色為準)；(3) 以最細微吸管小心將蟲體“吹”至胚胎皿中心；(4) 用0.1-0.2%的次氯酸鈉(NaClO)微量直接供至蟲體處以漂白至“透明”(約1-2min) ；(5) 蒸餾水洗兩次(以清洗完全為度)；(6) 將胚胎皿中蛋白銀濃度控制在約0.5%，加蓋后于50-60℃的恒溫箱底板上保持30min；(7) 室溫下用0.1-0.2 %的顯影液顯影1-5mi

90、n；(8) 鏡檢后用5%的硫代硫酸鈉(Na2S2O3)定影約5min；(9) 蒸餾水洗一次(此時應清潔蟲體)，將蟲體轉入載玻片上并與等量的蛋白膠混勻，用眉毛筆調體位，除去余液，至溫箱烘片約10min；(10) 常規(guī)脫水封片。</p><p>　　2.4.2 銀氨染色法</p><p>　　又名碳酸銀染色法。此染色法的突出特點是快速簡便，顯示功能強，應用得當時可在十幾分鐘內得到高質量的類似蛋

91、白銀的染色效果。這對于許多不易用蛋白銀染色的種類如大部分咽膜目類，腎形目類及籃環(huán)目類尤其突出。</p><p>　　具體步驟：（1）在凹玻片中加一滴10%福爾馬林（4%甲醛），然后加一滴蟲體懸液，靜置1min；（2）于其中加入一滴Fernandez-Galiano液；（3）將凹玻片置于約60℃的電熱板上，不停振動；（4）待溶液由黃色變?yōu)樽厣珪r，約5min，加一滴冷水或硫代硫酸鈉溶液終止顯影；（5）鏡檢，拍照；（6

92、）清洗后入載玻片加等量的蛋白膠混勻，調體位，除余夜后烘片約5-10min；（7）常規(guī)脫水封片。</p><p><b>　　3 結果與分析</b></p><p>　　3.1 相似瓦榴彈蟲Pinacocoleps similis (Kahl, 1933)</p><p>　　3.1.1 形態(tài)描述</p><p>　　大部

93、分活體體長和形狀相近，大約55-65×20-30μm，卵圓型或圓筒形，橫向面為圓形。橫向面的前末端較短且第二層盔板的前末端像個皇冠般尖銳化；其后末端明顯鈍圓（圖1A, 2A-D）。射出體呈桿形，長約3.0×0.5μm，主要位于口區(qū)，由于十分小且數(shù)目較少，所以很難觀察到（圖1K）。無色的細胞質中經(jīng)常有若干個灰色至褐色的食物泡（直徑最大可達15μm）和顆粒（在2-8μm）。一個大小12×10μm的橢圓形大核，多

94、數(shù)位于身體中部，而且有一個連接緊密的小核（圖1A, 2M, N）。身體末端有一個直徑大約10–15 μm收縮液泡，排泄孔位于身體的尾部（圖1A, C-E, 2H）。游泳速度快，有時沿底層爬行。</p><p>　　相似瓦榴彈蟲的盔板分 6層排布：圍口層，前端的次二層，前端主層，后端主層，后端次二層和尾層。每層平均由15個無色長方形盔板組成，且大多數(shù)盔板的形狀大小相同。圍口層幾乎在活體中很難辨認。前端次二層有兩個尖

95、銳的尖刺（圖1A, B, 2G）。前端主層，后端主層和后端次二層沒有獨特性。尾層只能在間接或極后端的視圖中才能看到，且尾端有一些5-6μm長的尾端刺毛（圖1A, 2A-D, I）。盔板中比較精細的結構在圖1B, 2E-G中：盔板無開口；靠近右側邊緣的脊光滑且發(fā)達；右側邊緣的一系列長齒與脊沒有相連；左側邊緣的曲線非常平滑和細長。</p><p>　　口位于細胞頂端。圍口動基列是由配對的毛基體組成的，此動基列被三個口

96、區(qū)細胞器打斷（圖1E,2K）?？趨^(qū)細胞器短，斜向排布（圖1E）：細胞器1由4對的毛基粒組成；細胞器2和3都由三對的毛基粒組成。活體口腔筐不明顯，通過蛋白銀染法可看到其長大約15-20μm（圖1K, 2K）。</p><p>　　軀體纖毛長度約10μm并有規(guī)則的排布，平均的組成14個橫環(huán)和15個縱列（表1）。在頂端的每縱列有4個成對緊密分布的毛基粒出現(xiàn)（圖1E, K, 2K）。在尾部有一明顯（長約25μm）的纖毛（

97、圖1A, 2A, D）。</p><p>　　3.1.2 分析比較</p><p>　　根據(jù)Foissner et al. (2008), Pinacocoleps Diesing,1865所描繪的特征，相似瓦榴彈蟲擁有六層多刺的盔板。該屬中的Pinacocoleps incurvus (Ehrenberg, 1833)[19]彎曲瓦榴彈蟲，P. tesselatus (Kahl, 193

98、0)[20] 棋格瓦榴彈蟲，P. pulcher (Spiegel, 1926) [21]美麗瓦榴彈蟲，這三個物種已經(jīng)被研究描述過。但這些描述并沒有運用現(xiàn)代的方法，所以這些纖毛蟲的纖毛圖式還是未知的。</p><p>　　Pinacocoleps similis 與P. tesselatus的形態(tài)相似(Kahl, 1930) [20]。然而，前者有著比后者更顯著的盔板結構：(1)前端次二層的前末端有兩個尖刺（P.

99、 tesselatus只有一個）；(2)前端主層有6枚齒狀結構（P. tesselatus有3-5枚，Kahl, 1930的描述中是3枚，Noland, 1937描述中是4枚，Borror, 1972描述中是5枚）；(3)齒與脊無連接（P. tesselatus有連接）；（4)至少有6個尾部刺毛（P. tesselatus有三個）（表2,圖1F, I；Borror, 1972; Kahl, 1930, 1933）。</p>

100、<p>　　根據(jù)他們盔板的結構，其他三個種都被歸到瓦榴彈蟲屬中：P. heteracanthus (Noland, 1937)[22]。（圖3F；basionym Coleps heteracanthus Noland, 1937），P. spiralis (Noland, 1937) [22]。(圖1J; basionym Coleps spiralis Noland, 1937)和P. arenarius (Bock,

101、1952) [23] (圖3G; basionym Coleps arenarius Bock, 1952)。</p><p>　　圖1 A-K. 活體形態(tài)和纖毛圖式(A–E, G, H, K)是Pinacocoleps similis (Kahl, 1933)。（F, I）是P. tesselatus (Kahl, 1930) Foissner et al., 2008，以及（J）是P. spiralis (N

102、oland, 1937)。A.一個典型個體的側面觀。B.一個盔板列。圍口板已省略。C.一個細長個體的側面觀。D.一個豐滿個體的側面觀。E. 側面觀的纖毛圖式和口腔結構。F. P. tesselatus (Kahl, 1930) (from Kahl, 1930)。G. P. similis (Kahl, 1933) (from Kahl, 1933)。H. P. similis (Kahl, 1933) (from Kahl, 1935

103、)。I. P. tesselatus (Kahl, 1930) (from Borror, 1972)。J. P. spiralis (Noland, 1937) comb. nov. (from Noland, 1937)。K.從側面觀來展示纖毛圖式，口腔筐，大核，小核和射</p><p>　　圖2A-N.活體Pinacocoleps similis (Kahl, 1933)（A-J），氨銀染色后（K，L）和蛋

104、白銀染色后（M, N）。A-C.整體觀（A）以及輕微擠壓個體（B, C），尾刺毛（楔形符號），尾纖毛（A,C的箭頭處）。D.最近分裂的個體。注意身體的前半部分比較修長的，因為甲板還沒有形成。楔形符號指示尾刺毛，箭頭指示尾纖毛。E,F.主要的盔板。楔形符號指示的是纖毛孔，箭頭符號指示高聳的脊。G.前端次二板，楔形符號指示了前末端尖銳處。H.尾部觀，末端收縮泡（箭頭處）。I.尾部觀，楔形符號指示尾刺毛。J.頂端觀，楔形符號指示末端尖銳處。K

105、.頂面觀，展示的是口區(qū)細胞器（楔形符號處）。L.尾部觀，展示纖細的尾部纖毛圖式。M,N.側面觀，展示纖毛圖式，大核和口腔筐的外部（楔形符號處）。比例尺：25μm (A–D, F, M, N), 10 μm (E, G–K)。</p><p>　　3.2 東方諾蘭德蟲Nolandia orientalis </p><p>　　3.2.1 形態(tài)描述</p><p>

106、　　蟲體長約70–100 × 30–40μm，形態(tài)多樣但一般呈現(xiàn)圓筒形且有輕微不對稱，長與寬的比為2.5:1，在身體中部與主盔板連接處常輕微的變窄，側扁約5:3。橫向面的前末端較短，第二層盔板的前末端尖銳化像個皇冠；身體的末端有規(guī)律的縮短（圖3A, B, 4A-C）。射出體在銀染法后可見，約2.0 × 0.5 μm，沿纖毛列成簇分布，每簇3-4個（圖4K）。有無色或褐色的內質，通常有大量的顆粒（直徑3-6μm）食物泡

107、直徑約15μm（圖3A, 4A, B）。球狀大核直徑約10μm，球狀小核直徑約2μm，它們毗鄰或者相連接，大核（圖3A, L, 4I, J）。收縮泡位于尾部（圖3B, 4D）。依靠逆方向旋轉游泳。</p><p>　　東方諾蘭德蟲由六層盔板組成：圍口層，前端次二層，前端主層，后端主層，后端次二層和尾層，每層平均由19個長方形盔板組成。蟲體的圍口層幾乎很難辨認。前端次二層的前端明顯的尖銳使得看似皇冠狀，有些有著顯眼

108、的頂刺（圖3A, B, 4A, B）。前端主層常有6個單向窗（圖3A, 4F）。后端主層有5個單向窗，有些有著不明顯的尾刺毛（圖3A, D, 4A-C, G）。后端次二層有兩個窗口和堅硬的尾刺毛（圖3A, 4A-D）。尾層只能在斜向或極后端的視圖中看到，其擁有長達5μm的尾刺毛（圖4D）?？宓木毥Y構展示在圖3D, 4E-G：在右板邊緣有腎型單向窗；右板邊緣的齒與窗口交替排布；板脊光滑并與窗口相連；許多球形顆粒排布在鋸齒狀的左側邊緣。