刺芹側(cè)耳的細(xì)胞工程育種及栽培研究.pdf

1、食用菌具有高蛋白，低脂肪的特點(diǎn)，屬于“天然，營(yíng)養(yǎng)，多功能”食品，符合近年來(lái)國(guó)際上對(duì)食品提出的“低鹽，低糖，低脂肪，高蛋白”的新要求，隨著人們對(duì)食用菌營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及藥用價(jià)值的認(rèn)識(shí)，食用菌育種工作也成為科研工作者關(guān)注的熱點(diǎn)。
　　 原生質(zhì)體技術(shù)是食用菌育種工作的重要方法之一，因其具有操作簡(jiǎn)單，容易獲得，且對(duì)誘變因子較敏感等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于各種食用菌的育種工作中。
　　 本文以刺芹側(cè)耳為出發(fā)菌株，通過原生質(zhì)體技術(shù)結(jié)合紫外線誘變獲

2、得再生變異菌株269株，探索了適合刺芹側(cè)耳原生質(zhì)體形成與再生的條件，得出適宜條件為“菌齡96h，酶解溫度30℃，酶解時(shí)間2h，酶系統(tǒng)為1％纖維素酶+1％蝸牛酶的混合酶，在該條件下，刺芹側(cè)耳原生質(zhì)體產(chǎn)量達(dá)到較高水平，產(chǎn)量為1.75×107個(gè)/mL。再生過程中，以0.6mol/L的甘露醇做滲穩(wěn)劑，能使原生質(zhì)體再生率達(dá)4.8％，明顯優(yōu)于蔗糖和MgSO4。由原生質(zhì)體紫外誘變可知，刺芹側(cè)耳原生質(zhì)體對(duì)紫外線的作用非常敏感，低劑量就能達(dá)到較高致死率，

3、致死率在70％～80％時(shí)，正變率較高，因此選擇致死率80％，照射時(shí)間15s為適宜的紫外誘變時(shí)間。
　　 通過對(duì)再生變異菌株長(zhǎng)勢(shì)、長(zhǎng)速、拮抗程度等方面的實(shí)驗(yàn)，篩選出長(zhǎng)速優(yōu)于出發(fā)菌株的再生變異菌株。
　　 通過對(duì)再生菌株發(fā)酵過程中生物量、pH值、還原糖含量、胞外酶活性等指標(biāo)的檢測(cè)，篩選出一株長(zhǎng)速快、生物量高、利用還原糖能力好、胞外酶活性高的的優(yōu)良菌株08X-013，酯酶同工酶分析可知菌株08X-013譜帶表達(dá)不同于出發(fā)菌株，