轉(zhuǎn)Fat-1基因蒙古綿羊胎兒成纖維細(xì)胞系的建立.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、ω-3多不飽和脂肪酸對于維持有機(jī)體的正常生長和發(fā)育是必不可少的，然而人體中ω-3PUFAs的含量嚴(yán)重不足，ω-6PUFAs的含量卻很高。由于ω-6和ω-3脂肪酸在代謝和功能上截然不同，以及它們具有許多相互對立的生理學(xué)功能，因而二者的平衡對有機(jī)體的自身穩(wěn)定和正常發(fā)育非常重要。本研究從家畜育種角度出發(fā)，把控制ω-6多不飽和脂肪酸轉(zhuǎn)化為ω-3多不飽和脂肪酸的基因Fat-1導(dǎo)入綿羊體細(xì)胞，利用體細(xì)胞克隆技術(shù)創(chuàng)造富含ω-3PUFAs的新型綿羊，培

2、育轉(zhuǎn) Fat-1基因高品質(zhì)肉羊新品種。
　　實驗建立了雄性蒙古綿羊胎兒成纖維細(xì)胞系，以秀麗隱桿線蟲總 RNA為模板合成第一鏈cDNA，引用設(shè)計好的引物擴(kuò)增cFat-1基因，純化后連接到pTEK載體構(gòu)建pTFK-c重組質(zhì)粒，轉(zhuǎn)化DH-5α感受態(tài)細(xì)胞后進(jìn)行重組質(zhì)粒的提取和測序。然后對核對正確的cFat-1基因進(jìn)行密碼子優(yōu)化后得到 oFat-1，將oFat-1連接到載體pTEK上構(gòu)建pTEK-o重組質(zhì)粒，脂質(zhì)體介導(dǎo)法轉(zhuǎn)染蒙古綿羊胎兒成纖

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