草莓抗枯萎病突變體的篩選及其抗性生理研究.pdf

1、本研究建立了草莓離體葉片再生技術(shù)體系，以5個(gè)品種草莓組培苗為試材，應(yīng)用草莓枯萎病菌毒素作為選擇壓力，篩選草莓抗枯萎病突變體。并對(duì)突變體再生植株與野生型植株的生長(zhǎng)、分化、抗病性、抗性生理進(jìn)行了研究。結(jié)果如下：
　　 1.以草莓葉片為外植體，明確了碳源、激素、AgNO3對(duì)葉片愈傷組織誘導(dǎo)的影響，建立了離體葉片再生體系。草莓葉片愈傷組織誘導(dǎo)的最佳條件為MS +麥芽糖30g/L+TDZ 3mg/L。適宜濃度的BA也能誘導(dǎo)出愈傷組織，但誘

2、導(dǎo)出愈傷組織的質(zhì)量低于TDZ誘導(dǎo)。
　　 2.草莓枯萎病菌粗毒素對(duì)植株和莖尖生長(zhǎng)點(diǎn)均有較強(qiáng)的毒害作用，經(jīng)粗毒素處理的植株能產(chǎn)生與枯萎病相似的癥狀。毒素濃度與莖尖枯死率呈正相關(guān)。粗毒素含量10％為豐香、全明星、童子1號(hào)、達(dá)賽萊克特等草莓品種誘變的適宜選擇壓力；森格納草莓適宜選擇壓力為毒素含量15％。
　　 3.在含毒素的培養(yǎng)基上繼代培養(yǎng)可提高不定芽對(duì)毒素的抗性。在連續(xù)培養(yǎng)過(guò)程中，5個(gè)品種草莓不定芽存活率均有所提高。在含毒素

3、的培養(yǎng)基上突變體不定芽分化顯著低于空白對(duì)照，但高于野生型不定芽對(duì)照。經(jīng)毒素處理的突變體再生植株，其株高、根長(zhǎng)和干重等生長(zhǎng)指標(biāo)均高于野生型植株。抗病性鑒定結(jié)果表明，突變體再生植株對(duì)枯萎病菌的抗性高于野生型再生植株。
　　 4.對(duì)篩選得到的2個(gè)突變體進(jìn)行RAPD分析，發(fā)現(xiàn)有2個(gè)引物在2株突變體中的擴(kuò)增產(chǎn)物與野生型不同。
　　 5.用草莓枯萎病菌處理突變體和野生型再生植株，測(cè)定6d內(nèi)不同基因型植株根系內(nèi)保護(hù)性酶活性的變化。測(cè)定

4、結(jié)果表明，突變體再生植株根系內(nèi)的保護(hù)性酶活力增強(qiáng)，其中SOD、CAT、POD酶活性的變化趨勢(shì)基本一致，即先升高后降低，且病原菌處理的突變體植株酶活性始終高于病原菌處理的野生型植株。未經(jīng)處理的突變體和野生型植株SOD、CAT、POD酶活性沒(méi)有明顯變化。經(jīng)病原菌處理后突變體和野生型植株根系內(nèi)MDA含量均呈上升趨勢(shì)，突變體植株上升的幅度高于野生型植株。根系活力隨著病原菌處理時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸下降，并且經(jīng)病原菌處理的突變體植株根系活力始終高于病原菌