長(zhǎng)牡蠣雜交育種的研究.pdf

1、由于生長(zhǎng)速度快，一齡體長(zhǎng)即可達(dá)到8～10 cm，長(zhǎng)牡蠣的養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴(kuò)大，產(chǎn)量大幅度提高，養(yǎng)殖區(qū)域遍布南北沿海，已成為我國(guó)主要的牡蠣養(yǎng)殖品種。但是，長(zhǎng)期的工廠化育苗和養(yǎng)殖導(dǎo)致長(zhǎng)牡蠣品質(zhì)下降以及生長(zhǎng)性狀退化，這些制約了長(zhǎng)牡蠣養(yǎng)殖業(yè)的持續(xù)、健康發(fā)展。雜交育種技術(shù)由于其雜種子代可能獲得新的遺傳性狀而具有雜種優(yōu)勢(shì)，已經(jīng)被廣泛用于動(dòng)植物的遺傳改良。1952年，Shull定義了雜種優(yōu)勢(shì)：雜交后代與自交后代相比，表現(xiàn)為活力增強(qiáng)，個(gè)體變大，產(chǎn)量提高，生

2、長(zhǎng)速度加快，抗病性強(qiáng)，耐寒耐熱。目前，已有很多關(guān)于雜種優(yōu)勢(shì)應(yīng)用于貝類群體遺傳改良的報(bào)道。 本研究以長(zhǎng)牡蠣為對(duì)象，進(jìn)行了長(zhǎng)牡蠣與巖牡蠣、熊本牡蠣的種間雜交，長(zhǎng)牡蠣中國(guó)群體與韓國(guó)群體、日本群體的不同地理群體間雜交。以探討雜交后代是否存在一定的雜種優(yōu)勢(shì)，進(jìn)而為長(zhǎng)牡蠣雜交育種提供理論依據(jù)。本研究觀察了雜交子代的受精細(xì)胞學(xué)過(guò)程，生長(zhǎng)、存活等生產(chǎn)性狀，其主要結(jié)果如下： 1.利用DAPI染色觀察了長(zhǎng)牡蠣和巖牡蠣正反雜交的受精卵在受精過(guò)

3、程，減數(shù)分裂和早期卵裂的核相變化。結(jié)果表明，長(zhǎng)牡蠣精子進(jìn)入巖牡蠣成熟卵子后，激活卵子完成2次成熟分裂，同時(shí)，精核出現(xiàn)了兩次明顯的體積膨大擴(kuò)散過(guò)程。第一次為精子剛?cè)肼褧r(shí)，精核由固縮狀態(tài)略微膨大去濃縮成為圓球形；另一次為第2次減數(shù)分裂之后，精核迅速擴(kuò)散形成雄性原核，幾乎與雌性原核同時(shí)形成。在長(zhǎng)牡蠣♀×巖牡蠣♂反交組中，受精卵內(nèi)核行為的變化與正交組相同。正反交組的胚胎發(fā)育過(guò)程都具有明顯的不同步現(xiàn)象，正交組的發(fā)育進(jìn)程比反交組滯后。 2.

4、以長(zhǎng)牡蠣和熊本牡蠣為材料，進(jìn)行了4個(gè)組合的雜交和自交實(shí)驗(yàn)。利用DAPI染色觀察了長(zhǎng)牡蠣和熊本牡蠣正反雜交的受精卵在受精，減數(shù)分裂和早期卵裂過(guò)程中的核相變化。分析了各實(shí)驗(yàn)組子一代在幼蟲、稚貝和成貝這3個(gè)不同階段的生長(zhǎng)和存活情況。結(jié)果表明，在長(zhǎng)牡蠣♀×熊本牡蠣♂正交組，熊本牡蠣精子進(jìn)入長(zhǎng)牡蠣卵子后，激活卵子完成2次減數(shù)分裂，同時(shí)，精核出現(xiàn)了兩次明顯的體積膨大擴(kuò)散過(guò)程。第一次為精子剛?cè)肼褧r(shí)，精核由固縮狀態(tài)略微膨大去濃縮成為圓球形；另一次為第2

5、次減數(shù)分裂之后，精核迅速擴(kuò)散形成雄性原核，幾乎與雌性原核同時(shí)形成。在熊本牡蠣♀×長(zhǎng)牡蠣♂反交組中，受精卵內(nèi)核行為的變化與正交組相同。正反交組的胚胎發(fā)育過(guò)程都具有明顯的不同步現(xiàn)象。在長(zhǎng)牡蠣♀×熊本牡蠣♂正交組中，精子進(jìn)入卵子后，大部分受精卵不再繼續(xù)進(jìn)行胚胎發(fā)育。對(duì)各實(shí)驗(yàn)組子一代的生長(zhǎng)和存活的研究結(jié)果表明，幼蟲階段，雜交后代的殼高、殼長(zhǎng)均明顯小于自交組；長(zhǎng)牡蠣♀×長(zhǎng)牡蠣♂和熊本牡蠣♀×長(zhǎng)牡蠣♂的存活率高于長(zhǎng)牡蠣♀×熊本牡蠣♂和熊本牡蠣♀×熊

6、本牡蠣♂。稚貝和成貝階段，雜交組子一代在殼高、殼長(zhǎng)和存活率3個(gè)生長(zhǎng)指標(biāo)上均小于自交組。 3.對(duì)來(lái)自中國(guó)的長(zhǎng)牡蠣群體(C)和韓國(guó)的長(zhǎng)牡蠣群體(K)進(jìn)行了完全的雙列雜交，分析了雜交后代和自交后代的受精率、孵化率、生長(zhǎng)和存活，以及雜交后代的雜種優(yōu)勢(shì)。結(jié)果表明，雜交組的受精率介于自交組之間；CK組的孵化率最高，KC組的孵化率最低。KC組在幼蟲期和稚貝期、養(yǎng)成期的殼高、殼長(zhǎng)平均值均大于其他三組，生長(zhǎng)最快；CK組在幼蟲期和稚貝期、養(yǎng)成期的殼

7、高、殼長(zhǎng)僅次于KC組；雜交組KC和CK在幼蟲期和稚貝期、養(yǎng)成期的殼高殼長(zhǎng)的雜種優(yōu)勢(shì)明顯；KC在幼蟲期存活率的雜種優(yōu)勢(shì)明顯，到了稚貝期養(yǎng)成期，雜種優(yōu)勢(shì)率為負(fù)值；而CK組正好相反，在幼蟲期存活率的雜種優(yōu)勢(shì)為負(fù)值，到了稚貝期養(yǎng)成期，雜種優(yōu)勢(shì)率為正值。雜交子一代中存在正交和反交結(jié)果不同的現(xiàn)象可能與母性效應(yīng)、遺傳和環(huán)境等因素有關(guān)。 4.以中國(guó)長(zhǎng)牡蠣(C)和日本長(zhǎng)牡蠣(J)為材料，進(jìn)行了4個(gè)組合的雜交和自交實(shí)驗(yàn)，分析了各實(shí)驗(yàn)組受精率、孵化率

8、，幼蟲和稚貝的生長(zhǎng)、存活以及雜交子代的雜種優(yōu)勢(shì)。結(jié)果表明，自交組的受精率介于雜交組之間，但是經(jīng)單因素方差分析表明沒有顯著性差異；JJ組的孵化率最高，其次是JC和CC組，CJ組的孵化率最低，相同卵子來(lái)源的組合在孵化率上無(wú)顯著差異。JJ組在幼蟲期和稚貝期、養(yǎng)成期的殼高、殼長(zhǎng)平均值均大于其它三組；JC組在幼蟲期和稚貝期、養(yǎng)成期的殼高、殼長(zhǎng)僅次子JJ組，其殼高、殼長(zhǎng)和存活率雜種優(yōu)勢(shì)率均較為明顯；CJ組的雜種優(yōu)勢(shì)率在幼蟲期和稚貝養(yǎng)成期的各個(gè)生長(zhǎng)性