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文檔簡介
1、本試驗探索板藍根生物堿的提取工藝,測定板藍根生物堿的抗菌及抗病毒活性,熒光定量檢測板藍根生物堿的抗病毒活性。
本試驗采用醇提法從板監(jiān)根中提取板藍根水溶性生物堿和脂溶性生物堿,采用倍比稀釋法測定其最低抑菌濃度(MIC),測定其對豬腎細胞(PK-15細胞)的最大無毒濃度(TC0)、半數中毒濃度(TC50),應用MTT法先加藥物后接病毒、先接病毒后加藥物、病毒和藥物同時加入、病毒和藥物體外作用2h后再加入四種方式測定了生物堿的體
2、外抗PPV效果,用熒光定量PCR檢測板藍根生物堿抗豬細小病毒的效果。
板藍根生物堿的提取結果表明:板藍根藥物中水溶性生物堿的提取率為0.044%,板藍根脂溶性生物堿的提取率為0.50%。
體外抑菌試驗結果表明:板藍根水溶性生物堿對金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢桿菌、魏氏梭菌、沙門氏菌、綠膿桿菌的最小抑菌濃度分別是175、175、87.5、350、43.75mg/ml,對雞源大腸桿菌沒有測到最小抑菌濃度;對金黃色葡萄
3、球菌、蠟樣芽孢桿菌、魏氏梭菌、沙門氏菌、綠膿桿菌的抑菌圈分別是8、7、10、6.3、8.3mm,對雞源大腸桿菌沒有測到抑菌圈。板藍根脂溶性生物堿對金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢桿菌、魏氏梭菌、沙門氏菌、綠膿桿菌的最小抑菌濃度分別是50、25、25、100、100mg/ml,對雞源大腸桿菌沒有測到最小抑菌濃度;對金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢桿菌、魏氏梭菌、沙門氏菌、綠膿桿菌的抑菌圈分別是10.3、16、12.3、11.3、11mm,雞源大腸桿菌沒有
4、測到抑菌圈。
體外抗病毒試驗結果表明:板藍根水溶性生物堿TCo、TC50分別為1mg/ml、0.95mg/ml,脂溶性生物堿的TCo、TC50分別為0.5mg/ml、0.105mg/ml;兩種生物堿均有一定的抗PPV作用,其中水溶性生物堿以先加藥物后加病毒的方式抗病毒效果較好。脂溶性生物堿以先接種病毒后加藥及病毒和藥物體外作用2h后再同時加入的方式抗病毒效果較好,且與其濃度呈正相關。
本實驗建立了SYBR G
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